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Medicine

Rat Heterotope Abdominal Herz / Einzel-Lungen-Transplantation in einer Volume-Konfiguration geladen

Published: May 29, 2015 doi: 10.3791/52418

Protocol

Alle Tiere wurden untergebracht und versorgt in Übereinstimmung mit nationalen und institutionellen Richtlinien für die Pflege und Verwendung von Labortieren. Ethik Genehmigung für dieses Protokoll wurde von der University of Animal Care Committee British Columbia gewährt. Männlich, Sprague-Dawley Ratten mit einem Gewicht zwischen 300-450 g wurden für dieses Protokoll verwendet wird.

1. Donor Betrieb

  1. In etwa 100 ml Kardioplegie (RT) in einem zylindrischen Kolben auf lange intravenöse (IV) Katheterschlauch durch einen 3-Wege-Hahn verbunden ist. Verwenden Sie ein Stativ, um den Kolben auf etwa 80 cm über der Arbeitsoberfläche zu erhöhen, so dass Kardioplegie Lieferung durch die Schwerkraft.
  2. Strukturen adäquat zu visualisieren, verwenden Sie ein Paar von Lupenbrillen oder einem Binokular.
    HINWEIS: Wir verwenden derzeit ein Fernglas Operationsmikroskop mit 3.4 - 21.3X Vergrößerung.
  3. Setzen Sie den Spender in einem Narkosekammer und veran Anästhesie mit 4 - 5% Isofluran. Übertragen Sie die Ratte auf eine Betriebsplattform und Aufrechterhaltung einer Narkose durch Nasenkegel mit 1-2% Isofluran. Bewerben vet Salbe auf die Augen des Tieres bis zur Trockenheit zu verhindern. Verwalten Midazolam (2 mg / kg) intraperitoneal mit einer 25 G-Nadel.
  4. Verwendung von chirurgischen Knipser, rasieren die Spender von xiphisternum zu Unterkiefer. Rasur einen kleinen Bereich der linken Leiste (für nachfolgende IV-Zugriff). Tragen Sie eine depilating Mittel auf die Wirkflächen, warten Sie etwa 5 Minuten, und entfernen Sie das Haar mit einem Stück Gaze.
  5. Prep die Operationsstellen mit einer PVP-Jod oder Chlorexidin-basierte Lösung (wir nur Chlorhexidin verwenden). Infiltrieren die incisional Sites mit 0,1 bis 0,5% Lidocain subkutan.
  6. Sichern Sie sich die Vorderbeine und linken Hinterlauf auf die Betriebssystem-Plattform mit Klebeband, so dass die rechte Hinterlauf frei für die Überwachung der Narkosetiefe und der Vitalfunktionen.
  7. Nachdem eine angemessene Narkosetiefe durch Pedal Prise, einen Einschnitt in der linken Leistenfalte mitein 22-Klinge Skalpell. Stumpf, setzen die linke V. femoralis communis und erhalten Zugang IV wie folgt:
    1. Vorsichtig einfahren, die über der Vena femoralis Gewebe und kanülieren die Vene mit einer 24 G IV. Verbinden Sie den IV auf eine kurze Länge von Kochsalzlösung gefüllte IV-Schlauch, und sichern Sie den Schlauch an Ort und Stelle mit Klebeband.
      HINWEIS: Das Verfahren für die Oberschenkel Venen-Kanülen in Ratten wird an anderer Stelle von Jespersen und Kollegen 14 beschrieben.
    2. Verbinden eines Kochsalzlösung gefüllten 10 ml Spritze mit dem IV-Schlauch, vorsichtig aspirieren Blut um die korrekte Positionierung des IV zu gewährleisten.
    3. Injizieren 300-500 IE unfraktioniertem Heparin durch den IV-Schlauch, und anschließend mit 3 spülen Sie den Schlauch - 5 ml Kochsalzlösung.
  8. Als nächstes tracheotomize den Spender wie folgt:
    1. Machen Sie eine Mittellinienschnitt in den Weichteilen zwischen der Halsschlag Kerbe und Unterkiefer mit einem 22-Blatt-Skalpell. Dringen in die Kapsel der Schilddrüse in der Mittellinie mit Metzenbaum Schere und separate seinen Lappen mit stumpf.
    2. Verwendung stumpf, trennen Sie die Halsmuskulatur des Halses in der Mittellinie, um die Vorderfläche der Luftröhre freizulegen.
    3. Verwenden einer gebogenen Pinzette stumpf sezieren einen umlaufenden Ebene um die Luftröhre. Umschließen die Luftröhre mit einem 4-0 Seidenkrawatte.
    4. Verwendung Iris Schere, einen Quereinschnitt im vorderen Luftröhre, etwa 5 mm unterlegen Schildknorpels. Sanft führen die Trachealkanüle (a 14 G IV) und befestigen Sie sie mit Hilfe des 4-0 Seidenkrawatte.
    5. Schließen Sie die Trachealkanüle mit einem mechanischen Ventilator. Leiten Sie die Zufuhr von Sauerstoff und Isofluran durch den Beatmungskreislauf, und lüften Sie den Spender mit einer Rate und Atemvolumen durch sein Gewicht 13 vorhergesagt.
  9. Einen Einschnitt in der Mittellinie der Brust (unter Verwendung eines 22-Blatt-Skalpell), zur Verlängerung der Schnitt an der Halsschlag Kerbe unterhalb des xipisternum.
  10. Der Aufenthalt in der Mittellinie, Führen Sie eine mediane Sternotomie mit einem Knochenschneider. Einfahren der Kanten des Sternums mit einer Selbsthalter. Geben Sie den Herzbeutel und Pleurahöhlen.
  11. Führen Sie eine Thymektomie. Am einfachsten ist es zunächst unverblümt teilen den Thymus in der Mittellinie, und dann trennen sie vom umgebenden Strukturen mit einer Kombination von stumpfer und scharfer Dissektion.
    HINWEIS: Der Ursprung der Brustwandarterien kann, wenn sezieren die Thymusdrüse entfernt von den überlegenen Brustbeinkanten verletzen. Um Blutungen zu verhindern, kann hämostatischen Klammern, bevor Sie den Thymus an diesen Stellen aufgebracht werden.
  12. Verwendung Metzenbaumschere und / oder eine scharfe Lauer, sezieren peri-Kava Fett weg von der unteren Hohlvene (IVC). Stellen Sie sicher, dass der IVC ist relativ frei von Fett und Bindegewebe aus dem Cavo-atrial Kreuzung superior, auf die Membran inferior.
  13. Mit einem scharfen Lauer, in Umfangsrichtung frei die obere Hohlvene (SVC) und umschließen Sie es mit einem 4-0 Seidenkrawatte.
  14. Als nächstes sezieren dielinks Hohlvene frei von umgebenden Strukturen, und unterbinden sie proximal und distal mit 4-0 Seidenkrawatten. Resezieren die dazwischen liegenden Teil des Cava, den linken Schlüsselbeinarterie freizulegen.
  15. In Umfangsrichtung frei Aortenbogen Gefäße mit einem scharfen Lauer. Bewerben proximalen und distalen Wundklammern an den Truncus, und teilen sie zwischen den Clips. Lassen Sie die linke Halsschlagader und der linken Schlüsselbeinarterie un-abgeschnitten.
  16. Als nächstes kanülieren die SVC mit 24 G IV-Katheter. Sichern Sie den Katheter mit dem zuvor platzierten 4-0 Seidenkrawatte.
  17. Bereiten Sie sich für eine zweckmäßige, aber schonende Transplantat Ernte.
  18. Mit Hilfe einer scharfen Schere, teilen Sie die IVC nur besser als die Zwerchfellfläche. Teilen Sie die SVC überlegen seinen Kanülierungsstelle, sicherzustellen, dass in der Nähe der Atemwege Strukturen nicht verletzt.
  19. Schalten Sie das Beatmungsgerät und ziehen Sie das Luftröhrenkanüle. Transekt die Luftröhre proximal.
  20. Fassen Sie die Luftröhre durchschnitten mit einer Pinzette und entfernen Sie das Herzund Lunge en-bloc. Dies wird leichten Zug mit scharfen Dissektion erforderlich wie die Herz-Lungen-Transplantat wird entfernt. Trennen Sie die Luftröhre von der zugrunde liegenden Speiseröhre. Nicht zu verletzen, die absteigende Aorta, so dass eine lange Teil davon intakt nach der Ernte bleibt.

2. Herstellung der Herz-Lungen-Graft

HINWEIS: beim Ausfüllen dieses Teils des Verfahrens sollte ein Assistent sein Betäubung den Empfänger Nager und die Vorbereitung für Graft-Implantation.

  1. Legen Sie die Herz-Lungen-Transplantat auf chirurgische Gaze mit der Vorderfläche des Herzens nach unten. Mit scharfen Dissektion, entfernen Sie alle verbleibenden Speiseröhre, die Vermeidung von Verletzungen der hinteren Atemwege.
  2. Suchen Sie die Aorta descendens und legen Sie eine 16 G stumpfen Kanüle. Sichern Sie die Kanüle an Ort und Stelle mit einem 4-0 Seidenkrawatte.
  3. Suchen Sie die Aortenbogen Gefäße und einer chirurgischen Klammer gelten für die linken Schlüsselbeinarterie. Lassen Sie die linke Halsschlagader un-beschnitten für UnterFolge Entlüftung.
  4. Verwalten der ersten Dosis von Kardioplegie durch Verbinden des Kardioplegie-Schlauch an den 16 G Aortenkanüle. Die Halsschlagader ist vorübergehend mit einer Pinzette verschlossen werden, um eine ausreichende Abgabe von Kardioplegielösung zu gewährleisten.
    HINWEIS: Ein Vorteil mit der Aortenkanüle angebracht ist, dass Kardioplegie kann kontinuierlich und / oder periodisch, wie gewünscht, verabreicht werden. Für intermittierenden Dosierung, liefern wir in der Regel jedes Kardioplegie 10-15 min in 5 ml Bolus über 30 - 45 sec.
  5. Verwendung Metzenbaumschere und / oder eine scharfe Lauer, sezieren peri-Aorten-Fett weg von der Aorta. Stellen Sie sicher, dass die Aorta relativ frei von Fett und Bindegewebe von der linken Schlüsselbeinarterie (distal Bogen), um seine Kanülierungsstelle.
  6. Als nächstes setzen den linken Hauptbronchus mit einem scharfen Lauer, und ligieren es proximal mit einem 4-0 Seidenkrawatte. Transekt den linken Bronchus distal der Ligatur mit Iris Schere. Führen Sie eine links Pneumonektomie durch Ligation des linken LungenArterie und Vene mit 4-0 Seidenkrawatten. Transekt distal der Ligatur und entfernen Sie die linke Lunge.
  7. Wie oben, entfernen Sie alle anderen Lungenlappen mit Ausnahme der rechten Ober- und Mittellappen. Nicht zu verletzen, die IVC in den Prozess der Durchführung lobectomies.
  8. Verbinden Sie den Schlauch mit dem Kardioplegie Aortenkanüle und verwalten kontinuierliche Kardioplegie während der Empfänger ist in Vorbereitung. Legen Sie die Herz-Lungen-Transplantat in einem sterilen Behälter (zB ein Becherglas).

3. Empfänger Betrieb

  1. Betäuben den Empfänger nach der Geberbetrieb vor. Verwenden vet Salbe auf die Augen des Tieres vor dem Austrocknen zu schützen. Bestätigen Narkose häufig durch Pedal Prise.
  2. Positionieren Sie das Tier nach der Geberbetrieb, diesmal Verlassen des rechten Vorderbein frei, Vitalzeichen und Narkosetiefe zu überwachen.
  3. Rasieren Sie den Bauch von xiphisternum Penis. Rasur einen kleinen Bereich der linken Leiste (für nachfolgende IV-Zugriff). Tragen Sie einedepilating Mittel auf die Wirkflächen, warten Sie etwa 5 Minuten, und entfernen Sie das Haar mit einem Stück Gaze.
  4. Prep die Operationsstellen mit einer Povidon-Jod oder Chlorexidin basierende Lösung. Infiltrieren die incisional Sites mit 0,1 bis 0,5% Lidocain subkutan.
  5. Tracheotomize und lüften Sie den Empfänger wie oben angegeben. Alternativ halten Sie den Empfänger unter Nasenkegel Anästhesie.
  6. Einführung eines Katheters in die Vena femoralis, wie oben beschrieben. Injizieren 300-500 IE unfraktioniertem Heparin durch den IV-Schlauch, und anschließend mit 3 spülen Sie den Schlauch - 5 ml Kochsalzlösung.
  7. Führen Sie eine Laparotomie, indem Sie eine Mittellinie Bauchschnitt mit einem 22-Blatt-Skalpell aus xiphisternum Penis. Ziehen Sie die Bauchdecke mit einem Wundspreizer. Als nächstes zurückzuziehen den Darm nach oben und zur linken Seite der Ratte. Wickeln Sie sie in warm, mit Kochsalzlösung getränkten Gaze.
  8. Setzen Sie das IVC und Bauchaorta von scharf Sezieren durch die darüber liegende Wiedertro-Bauchfett.
  9. Eine gekrümmte Gefäßklemme verfügbar und bereit.
  10. In Umfangsrichtung frei den IVC und der Aorta proximal und distal und umgeben sie mit 4-0 Seidenkrawatten. 3 cm Abstand zwischen diesen Seiten - Es sollte ungefähr 2 sein.
  11. Die gekrümmte Gefäßklemme vorsichtig anzuwenden, um sicherzustellen, dass ein ausreichender Teil sowohl IVC und der Aorta oberhalb der Backen der Klemme ausgesetzt.
  12. Einen Einschnitt in der vorderen Wand der IVC mit einer 25 G-Nadel in eine Kochsalzlösung gefüllten 1 ml Spritze verbunden. Verlängern Sie den Schnitt mit Scheren Potts, um die Länge des Spenders IVC Öffnung entsprechen.
  13. Entfernen Sie die Herz-Lungen-Transplantat aus seinem Behälter und trennen Sie es von Kardioplegie. Legen Sie das Transplantat in den Bauch des Empfängers in einer optimalen Position, um den venösen Anastomose durchzuführen.
    HINWEIS: Die Herz-Lungen-Transplantat letztlich leicht schräg ausgerichtet werden, wobei der Scheitelpunkt in Richtung des Bauches des linken unteren Quadranten.
  14. Sichern Sie die Ferseund Zehenenden der Anastomose mit 9-0 Nylonnaht. Binden Sie eine sichere Knoten an jedem Ende, so dass die Nadel an einen langen Arm des Nahtmaterials befestigt ist, und eine kurze Ende des Fadens zu einem späteren Zeitpunkt gebunden werden, um. Verwalten Sie eine Dosis von Kardioplegie.
  15. In Lauf Mode, komplette die Hälfte der Nahtlinie und Bindung an die gegenüberliegende kurze Naht Arm. Verwalten Sie eine Dosis von Kardioplegie.
  16. Schließen Sie die andere Hälfte der Nahtlinie und binden Sie es nach unten. Die venöse Anastomose vollständig ist. Verwalten Sie eine Dosis von Kardioplegie
  17. Richten Sie die Herz-Lungen-Transplantat mit der Herzspitze in Richtung des Bauches des linken unteren Quadranten. Stellen Sie sicher, dass die venöse Anastomose nicht geknickt oder verdreht werden.
  18. Beurteilen Sie die Länge des Spender Aorta, die erforderlich sein werden, um den Empfänger zu erreichen Aorta, die Aufrechterhaltung sowohl IVC und Aorta anastomosiert in spannungsfreie und un-Kinked-Konfigurationen.
  19. Teilen Sie den absteigenden Aorta (distal der linken Arteria subclavia) mit einer Iris Schere.
  20. Machen Sie ein incision in der vorderen Wand der Aorta des Empfängers mit einer 25 G-Nadel in eine Kochsalzlösung gefüllten 1 ml Spritze verbunden. Verlängern Sie den Schnitt mit Scheren Potts, um die Länge des Spenders Aortenostium entsprechen.
  21. Verankern Sie die Zehe (superior Aspekt) des Spenders Aorta an den Empfänger Aorta mit einem 9-0 Nylonnaht. Dann übergeben Sie die Nadel auf der medialen Seite der Aorta und füllen die Hälfte der Anastomose in Lauf Mode.
  22. An der Ferse des Aorten-Anastomose, kehren Sie die Ausrichtung der Nahtlinie (ein Übergang in Richtung der Naht), und schließen Sie die seitliche Hälfte der Anastomose in Lauf Mode.
  23. Entfernen Sie langsam den IV-Katheter in der SVC und Ligieren der SVC mit einer chirurgischen Klammer.
  24. De-Luft die Aorta, indem Sie das un-abgeschnitten linke gemeinsame Halsschlagader. Halten Sie die Arterie offen, in einer aufrechten Position, mit denen die Luft frei geräumt werden.
  25. Kurz öffnen die Backen des gekrümmten Gefäßklemme und damit die Halsschlagader zu bluten (dE-Luft) für 2 - 3 Sekunden. Erneut bewerben das Schiff Klemme.
  26. Tragen Sie eine chirurgische Klammer in die Halsschlagader. Entfernen Sie die gekrümmte Gefäßklemme.
  27. Überprüfen Sie für Blutungen an den Nahtlinien. Falls vorhanden, gelten sanfte Kompression mit chirurgischer Gaze oder Reparatur mit einer Länge von 9-0 Nylonnaht (abhängig von der Schwere der Blutung).
  28. Das Spenderherz sollte wieder innerhalb von Minuten zu schlagen.
  29. Achten Sie genau auf die Lebenszeichen des Empfängers ein Narkosetiefe und verwalten Volumengabe, wie gebraucht.
  30. In Abhängigkeit von den experimentellen Endpunkten, schließen Sie das Tier Bauch und lassen Sie es von der Anästhesie zu erholen, oder bereiten Sie das Tier für kardiovaskuläre Beurteilung.
    Hinweis: Beispiele für Transplantat Beurteilung gehören in vivo Maßnahmen der lastabhängigen und lastunabhängige Hämodynamik, in vitro Maßnahmen der Funktion in Langendorff-Herz und Arbeitsweisen, und (in der Überlebens Chirurgie) echokardiographische oder MRT-Untersuchungen.
  31. AmEnde der akuten Klemme Experimenten werden die Tiere durch Ausbluten getötet.

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Representative Results

Die oben beschriebene HAHLT Technik ist sehr technisch und erfordert viel Liebe zum Detail. Tabelle 1 stellt einige der wichtigsten Faktoren im Vergleich mit erfolgreichen erfolglosen Verfahren verbunden und kann als Leitfaden für die Fehlersuche technischen Schwierigkeiten verwendet werden.

Nachdem der Empfänger Aorta wird ausgespannt, sollten die Transplantat Koronararterien zu sehen, um mit sauerstoffreichem Blut zu füllen. Dementsprechend sollte das Myokard zu rosa und gut durchblutet. In technisch erfolgreiche Experimente, das Herz beginnt zu kurz nach dem Transplantat Reperfusion schlagen. 30 min bis zur funktionellen Wiederherstellung zu ermöglichen - die Transplantat sollte in einem unbelasteten Zustand (mit den Empfänger IVC geklemmt) für einen Zeitraum von mindestens 20 gelassen werden. Im Anschluss daran kann das Transplantat die Belastungsbedingungen geändert werden, um experimentelle Ziele zu entsprechen. Können beliebig weitere quantitative Maßnahmen der Transplantatfunktion (und ein erfolgreiches Ergebnis) eingesetzt werden. Wie in dem Protokoll angegeben, in vivo in vitro-Funktionsstudien sowie echokardiographische und MRI-Untersuchungen können solche Informationen zu liefern. Die 1 und 2 sind Beispiele für in vitro-Basislinie und Vorspann Okklusionsdruck-Volumendaten, die akut mit dieser Methodologie abgeleitet werden können. Hämodynamische Daten aus diesen Studien können Ermittler mit Herzzeitvolumen, Schlagvolumen, Kammervolumen, Herzfrequenz, Ejektionsfraktion, endsystolische Elastance bieten, und Vorspannung rekrutierbar Schlagarbeit. Mehrerer anderer Parameter quantifiziert werden kann, wie gewünscht.

Abbildung 1
Abbildung 1 Basisdruck-Volumendaten. Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Figur zu sehen.

Abbildung 1 zeigt Basispresseure-Volumendaten von einer in vitro Arbeitsherz Beurteilung der Herzfunktion. EDV, enddiastolische Volumen; EDV, enddiastolische Druck; ESV, endsystolische Volumen; ESP, end-systolischen Druck.

Figur 2
Abbildung 2. Preload-Okklusion Druck-Volumen-Daten. Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Figur zu sehen.

Figur 2 zeigt die Vorspann Okklusionsdruck-Volumendaten von einer in vitro Arbeitsherz Beurteilung der Herzfunktion. EDPVR, end-diastolischen Druck-Volumen-Beziehung; ESPVR, End-systolische Druck-Volumen-Beziehung.

Erfolgreiche Vorgehens Erfolglose Ordnung
Spender
Donor Stabilität Stabil Instabil
Vorbereitende Dissection Effiziente, begrenzt Ineffizient, Übermäßige
Blutverlust Minimal Übertrieben
Zeit bis zur Explantation Minimierte Ausgedehnt
Kardioplegischen Arrest Schnell Verspätet
Transplantat
Insgesamt Ischämiezeit <90 min > 90 min
Kardioplegischen Arrest Von Zeit zu Zeit gepflegt Unvollständig
Empfänger
Empfänger Stabilität Stabil Instabil
Vorbereitende Dissection Effizient Ineffizient
Clamp Zeiten <45 min > 45 min
Anastomose Zeit <30 min > 30 min
Blutverlust Minimal Übertrieben
Graft Entlüften Ausreichend Ungenügend
Volume-Wiederbelebung Ausreichend Ungenügend
Erfolgreiche Reperfusion Ja Nein
Return of Stable Herzfunktion Ja Nein

Tabelle 1 Merkmale erfolgreicher Versus Erfolglose HAHLT Procedures.

Tabelle 1 </ Strong> sind Beispiele für Faktoren, die mit erfolgreichen und erfolglosen Spender Transplantat und Empfänger Maßnahmen verbunden.

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Discussion

Erfolg mit der hier beschriebenen Technik wird von mehreren Faktoren ausgesagt werden. Key unter ihnen wird die Stabilität von Spender und Empfängertiere, die Annahme sorgfältige Operationstechnik, die sicher und mit minimalem Blutverlust verbunden ist, ist, dass die uneingeschränkte kardioplegischen Stillstand mit einheitlichen Transplantat Kühlung minimieren insgesamt ischämischen Zeit und in angemessener Entlüftung des Transplantats. Wie bereits anerkannt, ist die technische Komplexität der Technik, die ihre Hauptbeschränkung.

Wir haben vorherige HAHLT Techniken in mehrfacher Hinsicht fortgeschritten. Die in den Geber- und Empfängeroperationen beschriebenen Modifikationen stellen ein Mittel zur Durchführung notwendigen Arbeitsschritte in einer kontrollierten und effizienten Weise. Die beschriebene Myokardprotektion Protokoll ist ein ideales Mittel während der ischämischen Periode minimiert Verletzungen. Das Endergebnis ist ein HAHLT Transplantat, in der Geometrie optimiert wurde, hat Verletzungen minimiert und Eigentransplantatfunktion wurde vorgediente zur weitestgehend.

Die oben beschriebene Technik ergibt eine HAHLT Transplantat mit dynamischen und möglicherweise in der Nähe von physiologischen ventrikulären-Belastungsbedingungen. Sobald der Technik bewältigt wurde, die Transplantation Konfiguration ermöglicht komplette in-vivo-Charakterisierung von Transplantatfunktion. Wie bereits erwähnt, können die Vor- und Nachlast Bedingungen akut oder chronisch verändert und Spenderlunge kann akut wieder belüftet werden. Ermittler können leicht und breit dieses Modell zum Studium der vielen medizinischen Bedingungen gelten, unter Beibehaltung der Fähigkeit, Transplantat Struktur und Funktion zu untersuchen.

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Disclosures

Die Autoren haben nichts zu offenbaren.

Acknowledgments

Mark J. Kearns erhält Unterstützung von der UBC Clinician Investigator Program (durch das Royal College of Physicians and Surgeons of Canada ausgezeichnet) und der UBC 4YF Promotionsstipendium.

John H. Boyd ist ein National Sanitorium Association und Michael Smith Foundation for Health Research Scholar. Finanzierung durch CIHR. Die Autoren danken Dr. M. Allard und Richard Wamboldt für ihre Unterstützung bei der Einrichtung und Wartung des Perfusionsausrüstung danken.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Celsior Cardioplegic Soution Genzyme The solution is kept on ice throughout the procedure. We prepare our own solution, with slight modifications.
Rodent Ventilator Harvard Apparatus Model 683
Vital Sign Monitor Nonin Model 9847V Displays SpO2 and heart rate.
IV Cannulae Jelco 3063 24 - 26 G x 3/4" cannulae.
IV Tubing CareFusion MP9259-C Short-length connector tubing (18 cm).
Surgical Clips Teleflex Medical 001204 Horizon titanium ligating clips.
Sutures Ethicon, Sharpoint LA54G, AK-0107 3-0 silk reel, and 9-0 prolene suture (single-armed, DR5 needle).
Surgical Instruments Not Applicable Not Applicable The instruments used are generic, and can be purchased from any surgical supply company.

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References

  1. Abbott, C. P., Lindsey, E. S. A technique for heart transplantation in the rat. Arch Surg. 89 (1964), 649-652 (1964).
  2. Ma, Y., Wang, G. Comparison of 2 heterotopic heart transplant techniques in rats: cervical and abdominal heart. Exp Clin Transplant. 9 (2), 128-133 (2011).
  3. Wiedemann, D., Boesch, F., Schneeberger, S., Kocher, A., Laufer, G., Semsroth, S. Graft function after heterotopic rat heart transplant with an isolated reperfused working heart: a methodic consideration. Exp Clin Transplant. 10 (2), 154-157 (2012).
  4. Chen, Z. H., Xia, S. S. The technique of heterotopic heart-lung transplantation in the rat. J Tongji Med Univ. 6 (2), 67-70 (1986).
  5. Ibrahim, M., Navaratnarajah, M., et al. Heterotopic abdominal heart transplantation in rats for functional studies of ventricular unloading. J Surg Res. 179 (1), e31-e39 (2013).
  6. Asfour, B., Hare, J. M., et al. A simple new model of physiologically working heterotopic rat heart transplantation provides hemodynamic performance equivalent to that of an orthotopic heart. J Heart Lung Transplant. 18 (10), 927-936 (1999).
  7. Figueiredo, J. -L., Nahrendorf, M., Sosnovik, D. E., Weissleder, R. MRI of a novel murine working heart transplant model. Circ Heart Fail. 2 (3), 272-274 (2009).
  8. Wen, P., Wang, X., et al. A simple technique for a new working heterotopic heart transplantation model in rats. Transplant Proc. 45 (6), 2522-2526 (2013).
  9. Didié, M., Biermann, D., et al. Preservation of left ventricular function and morphology in volume-loaded versus volume-unloaded heterotopic heart transplants. A.Am J Physiol Heart Circ Physiol. 305 (4), H533-H541 (2013).
  10. Galiñanes, M., Zhai, X., Hearse, D. J. The effect of load on atrophy, myosin isoform shifts and contractile function: studies in a novel rat heart transplant preparation. J Mol Cell Cardiol. 27 (1), 407-417 (1995).
  11. Yokoyama, H., Ohmi, M., Murata, S., Nakame, T., Tabayashi, K., Mohri, H. Proposal of a working left heart model with a heterotopic transplantation technique in rats. J Heart Lung Transplant. 14 (4), 706-712 (1995).
  12. Maruyama, T., Swartz, M. T., McBride, L. R., Pennington, D. G. Working heart model of heterotopic heart-lung transplantation in rats. J Thorac Cardiovasc Surg. 107 (1), 210-215 (1994).
  13. Pacher, P., Nagayama, T., Mukhopadhyay, P., Bátkai, S., Kass, D. A. Measurement of cardiac function using pressure-volume conductance catheter technique in mice and rats. Nat Protoc. 3 (9), 1422-1434 (2008).
  14. Jespersen, B., Knupp, L., Northcott, C. A. Femoral arterial and venous catheterization for blood sampling, drug administration and conscious blood pressure and heart rate measurements. J Vis Exp. (59), 3496-3410 (2012).
  15. Habertheuer, A., Kocher, A., et al. Innovative, simplified orthotopic lung transplantation in rats). J Surg Res. 185 (1), 419-425 (2013).

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