מערכת העצבים stomatogastric (STNS) של הסרטן יונה (<em> ג borealis</em>) יכול לשמש electrophysiology, אימונוהיסטוכימיה, תרבות מחקרים התא. מיצוי STNS נעשית שני חלקים: דיסקציה הגולמי בסדר.
Abstract
הגנגליון stomatogastric (STG) הוא מודל מצוין לחקר אינטראקציות הסלולר ורשת מכיוון שהוא מכיל מספר קטן יחסית של תאים (כ 25 ב C. borealis) אשר מאופיינים היטב. התאים STG בתערוכה מגוון רחב של יציאות ואחראים על פעולות מוטוריות של הקיבה. הבטן מכיל את טחנת קיבה אשר מתפרק מזון עם שלוש שיניים פנימיים, השוער אשר מסננים את האוכל לפני שהוא מגיע midgut. STG מייצר שתי יציאות קצבית לשלוט טחנת קיבה השוער המכונה גנרטורים דפוס מרכזי (CPGs). כל תא STG יכולים להשתתף אחד או שני מקצבים אלה. CPGs אלה מאפשרים לחקר neuromodulation, הומאוסטזיס, השתנות הסלולר רשת, פיתוח רשת, והתאוששות הרשת.
דיסקציה של מערכת העצבים stomatogastric (STNS) מ הסרטן יונה (סרטן borealis) נעשית בשני חלקים: דיסקציה הגולמי בסדר. ב דיסקציה ברוטו הקיבה כולו גזור מן הסרטן. במהלך דיסקציה הקנס STNS מופק הקיבה באמצעות מיקרוסקופ דיסקציה מיקרו לנתיחה הכלים (ראה תרשים 1). STNS כולל את STG, הגנגליון הוושט (OG), ואת הגרעינים commissural (בורג), כמו גם את העצבים כי innervate את שרירי הבטן. כאן, אנו מראים כיצד לבצע דיסקציה מלאה של STNS לקראת ניסוי electrophysiology שבו התאים STG תהיה רשמה intracellularly ואת העצבים ההיקפיים ישמשו הקלטות תאיים. הטכניקה הנכונה למציאת העצבים הרצוי מוצג, כמו גם הטכניקה שלנו desheathing הגנגליון לחשוף את somata ו neuropil.
Protocol
1. גרוס Dissection המקום סרטן על קרח במשך 30 דקות למערכות משעמם החושי והמוטורי של החיה. להקיף אותו מכל צדדיו עם קרח. יש ללבוש כפפות בעת טיפול הסרטן. היכונו לנתיחה ברוטו ידי הנחת את המחבת לנתיחה וכלי …
Discussion
דיסקציה STNS היא הצעד הראשון בביצוע הניסוי electrophysiology או אימונוהיסטוכימיה, או לקבלת תאים תרבית תאים. ללא קשר הניסוי נועד, דיסקציה הגולמי יישאר ללא שינוי. עם זאת, דיסקציה הקנס עשוי להשתנות. חשוב לתכנן מראש של זמן שבו תאים אשר עצבים תוכלו להקליט. רוב הנוירונים STG יש תהליכים …
Acknowledgements
בהכרת תודה אנו מודים לחברי מעבדת מרדר. אנו מודים יועץ שלנו, ד"ר איב מרדר, על התמיכה והעידוד שלה. מחקר זה מומן על ידי המכון הלאומי להפרעות נוירולוגיות ושבץ מענקים NS-17813 ו – NS-058110.