Drosophila Disección de glándulas accesorios masculinas: un método para aislar las células secundarias
Published: April 30, 2023
Abstract
Fuente: Immarigeon, C., et al. Un protocolo basado en FACS para aislar el ARN de las células secundarias de las glándulas accesorios masculinas de Drosophila. J. Vis. (2019).
Este video describe la disección de las glándulas accesorias de las moscas masculinas y muestra un ejemplo en el que la glándula aislada se disociará en una sola suspensión celular.
Protocol
Este protocolo es un extracto de Immarigeon et al., Un protocolo basado en FACS para aislar el ARN de las células secundarias de las glándulas accesorios masculinas de Drosophila, J. Vis. Exp. (2019). 1. Soluciones y preparación de materiales Prepare las siguientes soluciones. Preparar medio suero suplementado (MUS): Medio de Drosophila de Schneider complementado con 10% suero bovino fetal inactivado por calor y 1% pe…
Materials
| Binocular microscope for dissection | |||
| Binocular with light source for GFP | |||
| Bunsen | |||
| Plastic microtubes 1.5 mL | Eppendorf | ||
| Fine dissection forceps | |||
| Foetal bovine serum | Gibco | 10270-106 | heat inactivated prior to use |
| Glass dishes for dissection | |||
| Ice bucket | |||
| P1000 | Gilson | ||
| P20 | Gilson | ||
| P200 | Gilson | ||
| Papain | 50U/mL stock | ||
| PBS | home made | ||
| Penicillin-Streptomycin | Gibco | 15070-063 | |
| Schneider’s Drosophila medium | Gibco | 21720-001 | |
| Tipone 1250 μL graduated tip | Starlab | S1161-1820 | |
| Tipone 200 μL bevelled tip | Starlab | S1161-1800 | |
| TrypLE Express Enzyme | Gibco | 12604013 |
Cite This Article
Drosophila Male Accessory Gland Dissection: A Method to Isolate Secondary Cells. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20100, doi: (2023).