דרוזופילה (לא כולל) ניתוח בלוטת אביזר זכר: שיטה לבודד תאים משניים

Abstract

מקור: Immarigeon, C., ואח ‘. פרוטוקול מבוסס FACS כדי לבודד RNA מן התאים המשניים של בלוטות עזר זכר Drosophila. ג’יי ויס אקספ. (2019).

וידאו זה מתאר את הניתוח של בלוטות האביזר מזבובים זכרים ומראה דוגמה שבה הבלוטה המבודדת תהיה מנותקת לתוך השעיה תא יחיד.

Protocol

פרוטוקול זה הוא קטע מתוך Immarigeon et al., פרוטוקול מבוסס FACS כדי לבודד RNA מן התאים המשניים של בלוטות עזר זכר Drosophila, J. Vis. Exp. (2019). 1. פתרונות והכנת חומרים הכן את הפתרונות הבאים. הכן סרום בתוספת בינוני (SSM): מדיום דרוזופילה של שניידר משלים עם 10% חום מ…

Materials

Binocular microscope for dissection
Binocular with light source for GFP
Bunsen
Plastic microtubes 1.5 mL	Eppendorf
Fine dissection forceps
Foetal bovine serum	Gibco	10270-106	heat inactivated prior to use
Glass dishes for dissection
Ice bucket
P1000	Gilson
P20	Gilson
P200	Gilson
Papain			50U/mL stock
PBS			home made
Penicillin-Streptomycin	Gibco	15070-063
Schneider’s Drosophila medium	Gibco	21720-001
Tipone 1250 μL graduated tip	Starlab	S1161-1820
Tipone 200 μL bevelled tip	Starlab	S1161-1800
TrypLE Express Enzyme	Gibco	12604013