Drosophila Mandligt tilbehør Kirtel Dissektion: En metode til at isolere sekundære celler
Published: April 30, 2023
Abstract
Kilde: Immarigeon, C., et al. En FACS-baseret protokol til at isolere RNA fra de sekundære celler i Drosophila Mandlige Tilbehør Kirtler. J. Vis. Exp. (2019).
Denne video beskriver dissektion af tilbehør kirtler fra mandlige fluer og viser et eksempel, hvor den isolerede kirtel vil blive dissociated i en enkelt celle suspension.
Protocol
Denne protokol er et uddrag fra Immarigeon et al.,en FACS-baseret protokol til at isolere RNA fra de sekundære celler i Drosophila Male Accessory Glands, J. Vis. Exp. (2019). 1. Opløsninger og materialeforberedelse Forbered følgende løsninger. Forbered Serum Suppleret Medium (SSM): Schneider’s Drosophila medium suppleret med 10% varme inaktiveret føtal kvæg serum og 1% Penicillin-Streptomycin. Forbered a…
Materials
| Binocular microscope for dissection | |||
| Binocular with light source for GFP | |||
| Bunsen | |||
| Plastic microtubes 1.5 mL | Eppendorf | ||
| Fine dissection forceps | |||
| Foetal bovine serum | Gibco | 10270-106 | heat inactivated prior to use |
| Glass dishes for dissection | |||
| Ice bucket | |||
| P1000 | Gilson | ||
| P20 | Gilson | ||
| P200 | Gilson | ||
| Papain | 50U/mL stock | ||
| PBS | home made | ||
| Penicillin-Streptomycin | Gibco | 15070-063 | |
| Schneider’s Drosophila medium | Gibco | 21720-001 | |
| Tipone 1250 μL graduated tip | Starlab | S1161-1820 | |
| Tipone 200 μL bevelled tip | Starlab | S1161-1800 | |
| TrypLE Express Enzyme | Gibco | 12604013 |
Cite This Article
Drosophila Male Accessory Gland Dissection: A Method to Isolate Secondary Cells. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20100, doi: (2023).