Drosophila (olika betydelser) Manlig tillbehörskörteldesektion: En metod för att isolera sekundära celler
Published: April 30, 2023
Abstract
Källa: Immarigeon, C., et al. Ett FACS-baserat protokoll för att isolera RNA från de sekundära cellerna i Drosophila manliga tillbehörskörtlar. J. Vis. Exp. (2019).
Den här videon beskriver dissekeringen av tillbehörskörtlarna från hanflugor och visar ett exempel där den isolerade körteln kommer att dissocieras till en enda cellupphängning.
Protocol
Detta protokoll är ett utdrag från Immarigeon et al., Ett FACS-baserat protokoll för att isolera RNA från de sekundära cellerna i Drosophila Male Accessory Glands, J. Vis. Exp. (2019). 1. Lösningar och materialberedning Förbered följande lösningar. Prepare Serum Supplemented Medium (SSM): Schneiders Drosophila medium kompletterat med 10% värme inaktiverat fetala nötkreatur serum och 1% Penicillin-Streptomycin….
Materials
| Binocular microscope for dissection | |||
| Binocular with light source for GFP | |||
| Bunsen | |||
| Plastic microtubes 1.5 mL | Eppendorf | ||
| Fine dissection forceps | |||
| Foetal bovine serum | Gibco | 10270-106 | heat inactivated prior to use |
| Glass dishes for dissection | |||
| Ice bucket | |||
| P1000 | Gilson | ||
| P20 | Gilson | ||
| P200 | Gilson | ||
| Papain | 50U/mL stock | ||
| PBS | home made | ||
| Penicillin-Streptomycin | Gibco | 15070-063 | |
| Schneider’s Drosophila medium | Gibco | 21720-001 | |
| Tipone 1250 μL graduated tip | Starlab | S1161-1820 | |
| Tipone 200 μL bevelled tip | Starlab | S1161-1800 | |
| TrypLE Express Enzyme | Gibco | 12604013 |
Cite This Article
Drosophila Male Accessory Gland Dissection: A Method to Isolate Secondary Cells. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20100, doi: (2023).