Fitc-Dextran Alimentación: Un método para cuantificar la permeabilidad intestinal en C. elegans

Published: April 30, 2023

Abstract

Fuente: Le, T. A. N., et al. Medición de los efectos de bacterias y productos químicos sobre la permeabilidad intestinal de Caenorhabditis elegans. J. Vis. (2019). 

Este video introduce un método para visualizar y medir la integridad del lúmenes intestinales C. elegans alimentando gusanos con etiqueta FITC dextrano.  El protocolo de ejemplo muestra el ensayo realizado con gusanos tratados con 3,3′-diindolylmethane (DIM) y alimentados con patógenos.

Protocol

Este protocolo es un extracto de Le et al, Measuring the Effects of Bacteria and Chemicals on the Intestinal Permeability of Caenorhabditis elegans, J. Vis. (2019). Preparación de placas NGM para probar los efectos de un químico (DIM) en la permeabilidad intest…

Representative Results

Figura 1: El efecto de DIM en la permeabilidad intestinal de C. elegans alimentado P. aeruginosa. Imágenes microscópicas de gusanos de (A) E. coli OP50 sin alimentación FITC-dextran, (B) E. coli con alimentación FITC-dextrano, (C) P. aerugin…

Materials

3,3’-diindolylmethane  Sigma D9568
90×15 mm Petri dishes SPL Life Sciences, South Korea 10090
Bactor Agar Beckton Dickinson REF. 214010
Formaldehyde solution  Sigma F1635
Caenorhabditis elegans N2 Caenorhabditis Genetics Center (CGC) Wild type 
Cholesterol Sigma C3045
Costa Assay Plate, 96 Well Black With Clear Flat Bottom Non-treated, No Lid Polystyrene Corning Incorporated REF. 3631
Dimethyl sulfoxide Sigma D2650
Escherichia coli OP50 Caenorhabditis Genetics Center (CGC)
Fluorescein isothiocyanate – dextran Sigma FD10S
Harmony software  PerkinElmer verson 3.5
Magnesium sulfate heptahydrate  Fisher Bioreagents BP2213-1
Fluoromount aqueous mounting medium Sigma F4680
Operetta CLS High-Content Analysis System PerkinElmer  HH16000000
Peptone Merck EMD 1.07213.1000
Pseudomonas aeruginosa PA01 Korean Collection for Type Culture KCTC NO. 1637
Sodium Chloride Fisher Bioreagents BP358-1
Stereo Microscope Nikon, Japan SMZ800N

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Cite This Article
FITC-Dextran Feeding: A Method to Quantify Intestinal Permeability in C. elegans. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20167, doi: (2023).

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