איתות אינסולין נשמרת המסלולים נמצא זבוב הפירות<em> תסיסנית melanogaster</em> להפוך את האורגניזם כלי פוטנציאל דוגמנות והפרעות מטבוליות כולל סוכרת מסוג II. לשם כך, חיוני להקים מבחני פיזיולוגיים ביעילות למדוד את פעילות האינסולין מערכתי סילוק הגלוקוז הפריפריה הזבוב הבוגר.
Abstract
שימור מנגנוני חישה התזונתיים הקיימים בין יונקים זבוב הפירות שבו פפטידים הדומה אינסולין גלוקגון יונקים, בהתאמה פונקציה לשמור על הומאוסטזיס הגלוקוז 1,2 במהלך שלבי התפתחות הזחל. מחקרים בעיקר שלאחר mitotic זבובים בוגרים חשפו ההפרעות של הומאוסטזיס הגלוקוז כתוצאה אבלציה הגנטי של פפטיד דמוי אינסולין (ILP) לייצר תאים (IPCs) 3. לפיכך, זבובי פירות בוגרים לקיים הבטחה גדולה כמערכת מודל מתאים גנטי הפרעות מטבוליות, כולל סוכרת מסוג II. על מנת להמשיך ולפתח את המערכת זבוב הפירות, מבחני השוואה פיזיולוגית למדידת סבילות לגלוקוז והרגישות לאינסולין אצל יונקים יש להקים. לשם כך, יש לנו תיאר לאחרונה הליך חדשנית למדידת גלוקוז העמסת תגובה לטוס מבוגרים הראו את החשיבות של IPCs מבוגרים בשמירה על הומאוסטזיס הגלוקוז 4,5. הנה, יש לנו נוהל שונה שתואר קודם להזרקת אינסולין 6 בשילוב עם שיטת השאיבה רומן hemolymph למדוד את הרגישות לאינסולין הפריפריה הזבוב הבוגר. באופן ייחודי, פרוטוקול שלנו מאפשרת מדידות פיזיולוגיות ישירה של היכולת לעוף של מבוגר להיפטר עומס הגלוקוז היקפית על הזרקת אינסולין, מתודולוגיה שעושה את זה אפשרי לאפיין מוטנטים אינסולין איתות התערבויות העשויים להשפיע על הסבילות לגלוקוז והרגישות לאינסולין הזבוב הבוגר.
Protocol
1. פתרון אינסולין הכנה הכן אינסולין טרי פתרון שור ידי המסת אינסולין PBS כדי להשיג את הריכוז של 0.01 מ"ג / מ"ל. שניהם אינסולין / PBS ושליטה פתרונות PBS חייב להישמר על הקרח לאורך הליך ההזרקה. פתרונות אלה צריכים להיות מוכנים ע…
Discussion
הטכניקה שתוארו בדו"ח זה הוא שימושי באופן פוטנציאלי בכל מחקר החוקר תהליכים פיזיולוגיים וכתוצאה מכך לגילוי שינויים בהרכב hemolymph תסיסנית. על ידי שילוב של הזרקה ואיסוף hemolymph באופן זה, ניתן לקבוע את ההשפעות רלוונטי מבחינה פיזיולוגית מיידית של טיפול ניסיוני מניפולצ…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
עבודה זו נתמכה על ידי תרומות של NIA כדי YW.CF (AG21068, AG31086).
Haselton, A. T., Fridell, Y. C. Insulin Injection and Hemolymph Extraction to Measure Insulin Sensitivity in Adult Drosophila melanogaster. J. Vis. Exp. (52), e2722, doi:10.3791/2722 (2011).