Un método de transferencia génica para el tratamiento de la insuficiencia cardíaca isquémica se describe usando un modelo porcino de infarto de miocardio. Nuestro método simple y reproducible que nos permite evaluar fácilmente la eficacia de la transferencia de genes diferentes con una forma muy sencilla y reproducible.
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Artículo de método
Transferencia génica para la insuficiencia cardiaca isquémica en un modelo preclínico
En este artículo
Resumen
Resumen
Varias tecnologías emergentes se están desarrollando para los pacientes con insuficiencia cardíaca. Bien establecidas las evaluaciones preclínicas son necesarios para determinar su eficacia y seguridad.
La terapia génica con vectores virales es uno de los enfoques más prometedores para el tratamiento de las enfermedades cardíacas. Entrega viral de varios genes diferentes, cambiando el portador del gen tiene un potencial terapéutico incalculable.
En este video, el proceso completo de un modelo animal de la creación de la insuficiencia cardíaca seguida de la transferencia de genes se presenta con un modelo porcino. En primer lugar, el infarto de miocardio es creado por la oclusión de la descendente anterior izquierda proximal arterias coronarias. Resultados corazón de remodelación en la insuficiencia cardíaca crónica. Único en nuestro modelo es una cicatriz bastante grande que refleje verdaderamente los pacientes con insuficiencia cardíaca grave que requieren una terapia agresiva para lograr resultados positivos. Después de la creación de miocardio infarto y el desarrollo de tejido cicatricial, una inyección intracoronaria de virus se demuestra con la infusión de nitroglicerina simultánea. Nuestro método de inyección proporciona una transferencia de gen simple y eficiente con una mayor expresión de los genes. Esta combinación de un infarto de miocardio modelo de cerdos con el virus de la entrega intracoronaria ha demostrado ser una metodología consistente y reproducible, lo que ayuda no sólo para probar el efecto de los genes individuales, sino también comparar la eficacia de muchos genes como candidatos terapéuticos.
Protocolo
1. La creación de infarto de miocardio
- Mujer cerdos Yorkshire (20 kg) de animales industrias de biotecnología (Doylestown, Pensilvania) se pre-medicado con Telazol (tiletamina / zolazepam) (8,0 mg / kg) y buprenorfina (0,6 mg).
- Los animales son intubados y ventilados con oxígeno al 100%. La anestesia general se mantiene con Propofol (5-8mg/kg/hr) durante todo el procedimiento.
- El sitio femoral se prepara con 70% de alcohol isopropílico seguido de povidona yodada. La punción percutánea permite el acceso a la arteria y la colocación de la vaina. Después de la inserción de la vaina, 3000-5000 UI de heparina se administra IV para mantener u....
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Discusión
Entre las diversas causas de la insuficiencia cardíaca, isquemia es por mucho el más frecuente en la etiología. Para superar esta grave enfermedad, diversos enfoques terapéuticos se están desarrollando. Cuidadosas evaluaciones de los tratamientos se requieren antes de que estas terapias prometedoras se puede aplicar a las clínicas. Por lo tanto, el establecimiento de un modelo de insuficiencia cardíaca isquémica, que representa las condiciones clínicas de los pacientes es fundamental para el desarrollo de las terapias d.......
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Divulgaciones
Todos los autores no tienen asociaciones comerciales que pudieran representar un conflicto de intereses en relación con el manuscrito.
Agradecimientos
Este trabajo es apoyado por la Fundación Leducq través de la red Caerus (RJH), por el NIH R01 HL093183, HL088434, HL071763, HL080498, HL083156 y P20HL100396 (RJH). DL recibió el apoyo de la Fundación Alemana de Investigación. Nos gustaría dar las gracias a Lauren Leonardson por su asistencia técnica en este proyecto.
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Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| Telazol | Fort Dodge Animal Health | 0856-9050-49 | |
| Propofol | APP Pharmaceuticals | 63323-270-20 | |
| Heparina | APP Pharmaceuticals | 63323-540-11 | |
| Amiodarona | APP Pharmaceuticals | 63323-616-03 | |
| Sulfato de atropina | Med-Pharmex | 54925-063-10 | |
| Acetato de potasio | American Regent Inc. | 2053-25 | |
| Nitroglicerina | American Regent Inc. | 4810-25 | |
| Salix (Furosemida) | Intervet Inc. | 710461 | |
| Catéter tipo palo de hockey de 5 Fr | Cordis | 556-278-0L | |
| Catéter tipo palo de hockey de 7 Fr | Cordis | 778-278-00 | |
| Alambre coronario | Abbott Laboratories | 1044588 | |
| Globo coronario | Abbott Laboratories | 1009447-08 | |
| Introducer de 8 Fr | Terumo Medical Corp. | RSS801 |
Referencias
- Perez de Prado, A. Closed-chest experimental porcine model of acute myocardial infarction-reperfusion. J Pharmacol Toxicol Methods. 60, 301-306 (2009).
- Angeli, F. S. Left ventricular remodeling after myocardi....
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Reimpresiones y permisos
