一种检查方法检测细胞氧化的环境,来衡量的CM – H2DCFDA氧化。一旦氧化细胞内,CM – H2DCFDA的变化,从非荧光一种荧光的化合物。是用流式细胞仪检测荧光的这种变化,并表示在氧化环境中的细胞数量。
的病毒通常建议的机制,诱导神经元的损伤是氧化应激。星形胶质细胞有重要作用,在控制对中枢神经系统(CNS)的氧化应激。星形胶质细胞有助于保持神经元以及保护神经元的活性氧(ROS)的稳态环境。 CM – H2DCFDA是一个细胞的活性氧的存在透水的指标。 CM – H 2 DCFDA作为一个非荧光化合物进入细胞,并成为荧光细胞酯酶删除后的醋酸组,该化合物是氧化。细胞,流式细胞仪检测,发现绿色荧光细胞处于氧化状态的指示。 CM – H 2 DCFDA是由不同的ROS的大量氧化易感。这种缺乏特异性,对活性氧可以氧化CM – H 2 DCFDA,使该化合物为使用宝贵的摄政在一个发病调查的早期阶段,这种检测可以用于氧化的细胞环境到屏幕上,无论是其中的氧气自由基或活性氧相结合是负责细胞的条件。一旦它被建立,活性氧是目前CM – H 2 DCFDA氧化,然后可以进行更多的实验来确定在特定的发病过程中所涉及ROS或组合罗斯。这项研究的结果表明,与过氧化氢 增加CM – H 2 DCFDA的加入荧光检测与生理盐水对照,表明这个实验是一个宝贵的测试,检测G355 – 5细胞内的氧化环境猫星形胶质细胞株。
通常建议的病毒的机制诱导神经元的损伤是氧化应激1,4,7,9,13,15,16,18-22,27,31 。基本上,它是通过病毒暴露的神经胶质细胞(星形胶质细胞和小胶质细胞)释放,如氧化钾,超氧阴离子自由基,一氧化氮,和/或过氧化氢,这是有毒的神经细胞的活性氧自由基。同样,氧化应激也被作为一个主要的甲基苯丙胺神经毒性2,6,17的病理机制的建议。由于本集团在病毒和药物?…
The authors have nothing to disclose.
我们感谢他们的慷慨支持这些研究ReadiSorb产品。
Name of the reagent | Company | Catalogue number | Comments (optional) |
---|---|---|---|
DMEM | Cellgro | 15-013-CV | |
MEM Vitamins | Cellgro | 25-020-cl | 1% (v/v) |
L-glutamine | Hyclone | 17-605E | 1% (v/v) |
Non Essential Amino Acids | Hyclone | 25-025-cl | 1% (v/v) |
FBS | Hyclone | SH30071.03 | 20% (v/v) |
Essential Amino Acids | Cellgro | 25-030-cl | 0.2% (v/v) |
500ml vacuum filtration system | VWR | 87006-076 | |
15 ml conical tubes | Falcon | 352097 | |
75 cm2 tissue culture flasks | Falcon | 353136 | |
6 well tissue culture plate | Falcon | 353224 | |
CM-H2DCFDA | Invitrogen | C6827 | |
Propidium Iodide (PI) | Sigma | P4170-10mg | |
Trypsin | Lonza | 17-160F | |
H2O2 | Sigma | H6520 | |
HyQ Antibiotic | Hyclone | SV30079.01 | 0.1% (v/v) |
G355-5 cells | ATCC | CRL-2033 | Normal feline brain |