신경 응답을 녹음하고 추적하는 주사에 대한 깨어 마우스의 작성
Summary
의 연결 응답 Electrophysiological 특성은 뇌의 기능을 이해와 경로 추적을위한 염료의 위치를지도 중요합니다. 그러나 많은 연구 anesthetized 동물에서 수행됩니다. anesthetics없이 뇌 기능을 이해하기 위해서, 우리의 연결 응답 특성을 기록하고 깨어있는 마우스에 염료를 주입하는 방법을 개발했습니다.
Abstract
그것은 잘 마취가 두뇌의 여러 지역에서 신경 반응 속성을 바꿀지도 모르겠어 것으로 알려져 있습니다. 13. 청각 시스템에서 임계값, 주파수 특이성 및 억제 sidebands 포함한 brainstem의 뉴런의 근본적인 응답 특성 1-2 마취하에 상당한 방법으로 변경됩니다. 이러한 관찰 physiologists은 마취의 오염 영향없이 하나의 뉴런에서 녹화할 수있는 방법을 모색하라는 메시지가 나타납니다. 한 결과는 brainstem 완전히 midbrain 4의 수준에서 그었습니다 decerebrate 준비했습니다. 이 준비의 단점 무서운 수술, forebrain의 전망을 내림차순의 철폐, 그리고 midbrain 위의 구조를 조사하는 감각 자극을 사용하는 무능력이다. 다른 전략은 동물이 깨어 및 / 또는 5,6를 행동 중에 하나의 뉴런과 multiunit 클러스터에서 녹음 만성 전극 배열을 이식해왔다 </suP>. 이 기술은 그러나 첫번째 electrophysiologically 뇌 구조를 특성화 후 추적 염료를 주입과 호환되지 않습니다. 하나의 뉴런에서 electrophysiological 응답 특성을 기록하면서 anesthetics와 신경 반응 등록 정보를 변경하지 않도록하기 위해, 우리는 오랫동안 마우스를 10-12로 박쥐 7-9에서 사용 헤드 구속 기법을 적응했습니다. 이 방법을 사용하여, 우리는 unanesthetized 마우스에서 며칠 동안 electrophysiological 레코딩을 수행할 수 있습니다. 레코딩 세션의 끝에, 우리는 다음 전극 위치 및 녹음 사이트를 재구성하거나 및 녹화 loci의 경로가 결정 수 있도록 추적기 주입하는 염료를 주입하실 수 있습니다. 이 방법은 사용 anesthetics없이 여러 일 동안 잘 격리 단일 신경 세포 녹음을 허용합니다.
Protocol
Discussion
마우스의 electrophysiological 및 neuroanatomical 실험을위한 헤드 게시물 구속 시스템의 장점은 실험 마취 약물로 인한 잠재적인 응답 오염을 제거, unanesthetized, 깨어있는 생쥐로 수행할 수있다는 것입니다. 또한, 세트까지보다 효율적인 동물 사용할 수 있도록 여러 일 동안 사용할 수 있습니다.
헤드 게시물에 대한 대부분의 구성 요소는 재고품이 가능합니다. 만이 헤드 게시물과 장…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
NSF 교부금 0,920,060, NIH 교부금 DC004395, NHMRC 교부금 1,009,482, 과학 및 의학 연구의 NSW Office 및 가넷 예스 러운와 로드니 윌리엄스 기념 재단 지원.
Materials
| Name | Company | Catalogue number | Comments |
| Etch gel for cleaning skull prior to dental cement | Henry Schein | 101-5396 | 12/pk with 1.2 mL syringes |
| Primer for dental cement | Kerr Optibond | 25881 | 8 mL bottle |
| Adhesive for dental cement | Kerr Optibond | 25882 | 8 mL bottle |
| Applicators for dental cement | Kerr Optibond | 24680 | 200/pk |
| Dental Cement | Charisma, Heraeus Kulzer | 66000085 | 4gm Syringe Refill |
| Tungsten Rod (Ground Pin) | A-M Systems | 717200 | 0.010″ diameter |
| Economy UV Curing Light | Henry Schein | CU-80 | |
| Head-post | Built in-house | ||
| Mounting bar | Built in-house | ||
| Mounting block | Built in-house | ||
| Stereotaxic Frame | David Kopf Instruments | 902 | |
| Mouse and Neonatal Rat Adaptor | Stoelting | 51625 | |
| Deltaphase Isothermal Pad | Braintree Scientific, Inc. | 39DP |
References
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