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열기 필드 미로의 사용은 마우스의 운동력과 불안 같은 행동을 측정하기 위해

Published: February 6, 2015 doi: 10.3791/52434

Protocol

참고 : 여기서의 모든 절차에 제출하여 승인을 IACUC (연구 준수 사무소)에 의해 NIH의 지침에 따라 실시 하였다되었다. 행동 테스트 패러다임에 사용 된 마우스는 순진하고 다른 시험에 사용되지 않았다. 이 프로토콜에 사용되는 C57BL / 6 야생형과 똑 마우스는 9 이전에 설명하고 여기에 제시된 데이터는 원고에서 있습니다.

테스트 룸과 오픈 필드 장치 1. 준비

  1. 네 활동 챔버로 구성된 여러 단위 열기 필드 미로 (OFM)를 사용하는 것은 이러한 분석 (그림 1)에 사용되었다. 각 챔버 측정 50cm (길이) 50cm (폭) 38cm (높이) x 및 화이트 고밀도 및 비 - 다공성 플라스틱으로 제작 된 X.
  2. 미로의 벽이 부드러운 동안 보행시 견인을위한 미로의 바닥 질감입니다. 미로 사분면이 시험의 목적을 위해 완전히 비어있다. 이 프로토 나머지 고려COL 상술 미로 단일 사분면 OFM을 설명하기 위해 이용 될 것이다.
  3. 이전 주제 마우스로 남아있는 향기 단서를 제거하기 위해 사용하기 전에 95 %의 에탄올과 이후 테스트하기 전에 실을 닦습니다.
  4. 에탄올은 쥐를 테스트에 전에 완전히 증발하도록 허용합니다. 이것은 각 테스트 세션 사이에 5 ~ 10 분 정도 걸릴 수 있습니다.
  5. 이 분석을 위해, 기록 및 마우스 움직임을 평가 PanLab / 하버드 장치로부터 SMART 비디오 추적 소프트웨어를 사용한다.
    주 : 모든 CM 영상 추적 카메라 및 소프트웨어는 오픈 필드 미로 결과를 시험 대상을 추적하고 평가할 수있다. 최종 사용자가 교정하는 방법을 이해하고 각 분석에 사용되는 소프트웨어를 실행하는 것은 매우 중요하다. 카메라와 소프트웨어가 제대로 제조업체의 지시에 따라 보정하는 경우에 상관없이 비디오 카메라 및 사용 추적 소프트웨어는 최상의 결과를 얻을 수있다.
  6. 시험 I 수행NA 표준 미로 장치 및 소프트웨어를 실행하는 데 필요한 컴퓨터를 포함 할 수있는 공간을 조명. 천장에 부착 또는 카메라 렌즈가 미로 전체 영역 (도 2)을 참조 할 수있는 승강 지원 시스템을 이용하여 어느 미로 상기 비디오 카메라를 일시.
  7. 시험 인간 관리자로서, 마우스의 행동에 영향을하지 않도록 미로에 피험자에 의해 완전히 관측 될 방에 공간이 충분해야.

2. 활동을 측정 할 수있는 소프트웨어를 준비

  1. 비디오 추적 소프트웨어를 엽니 다.
  2. 소프트웨어가 열린 후, "데이터 수집"탭이 옵션을 열려면 클릭 한 번 아래에있는 "단일 주제 추적"옵션에 커서를 이동합니다.
  3. 화면 아래쪽에있는 "정적 배경"옵션을 선택합니다.
  4. 선택 후 "정적 배경"를 선택이다N, 이는 앞서 피험자의 첨가로 미로의 이미지를 촬영하기 위해 소프트웨어를 사용하는 것이 필요하다. 이렇게하려면 스크린과 한 번의 클릭의 아래쪽에있는 "사진"버튼에 커서를 이동합니다.
    주 : 소프트웨어 추적 처리 동안 촬영 화상으로부터 감산 될 것이다 시험 대상없이 시나리오의 사진을 찍을 것이다. 에만 피사체의 움직임이 소프트웨어에 의해 분석되는 경우가 빈번하게 발생한다.
  5. 상기 촬영 배경 이미지가 완전히 화면 하단에있는 "테스트"버튼에 커서를 이동 한 번 클릭하여 추적 소프트웨어에 의해 제거되는 것을 확인한다. 배경 이미지가 완전히 추적 이미지에서 제거되면 백색 고체 필드는 도시한다. 조명 조건 변경하거나 미로 실수로 이동하는 경우, 당신은 두 개의 이미지가 완벽하게 일치하지 않는 나타내는이 분야에서 검은 "그림자"를 볼 수있을 것입니다. 이 상황을 해결하려면 인트를 반복P 2.4 이상.
  6. 배경 설정을 확인한 후, 수집 시간 동안 제어되는 방식을 구성하는 타이밍 옵션을 사용. 이렇게하려면 "구성"탭으로 커서를 이동 한 후 "타이밍"제목을 클릭하면됩니다. 실험 매개 변수를 입력합니다 새로 열린 창을 사용합니다.
  7. 이 프로토콜의 경우, 10 분 추적 기간으로 "프로그램 된 시간"옵션을 선택했다. 미로의 중앙에 위치시키고 마우스를 추적 개시전 멀어 사용자 시간을 허용하기 위해 5 초에 "대기주기"를 설정한다. 시험 기간 동안 10 분의 "획득 시간"을 입력한다. "프로그램 시간 (10 분)이 끝나면"자동 카메라와 소프트웨어의 추적 기능이 꺼집니다되는 설정 "정지 제어"를 설정합니다.
  8. 모든 타이밍이 창을 닫습니다 설정 한 후 "닫기"버튼에 커서를 이동합니다. 이제 테스트를 시작할 준비가절차를 보내고.

열기 필드 테스트 3. 관리

주 :이 프로토콜에서 사용되는 소프트웨어 패키지는 한 번에 최대 16 개의 개별 마우스의 추적을 허용한다. 완성의 편의를 위해 위에서 언급 한 바와 같이, 여기에서 논의 된 프로토콜은 OFM의 하나의 사분면을 사용하여 하나의 마우스입니다. 이 프로토콜을 사용하고있는 기기의 경우, 4 개인 마우스의 최대 미로의 각 사분면을 사용하여 추적 할 수 있습니다. 멀티 인클로저 미로를 사용하는 경우, 그 정의 사분면의 첫 번째 주제 마우스를 배치 한 후, 분석을 추적하는 각각의 미로 사분면에 남아있는 마우스를 놓습니다. 이 프로토콜의 목적을 위해, 상기 명령은 미로의 사분면에 고유 한 것이다.

  1. 시험장에 자신의 주택 방에서 자신의 홈 케이지에 마우스를 가져. 쥐 실험을 시작하기 전에 30 분 이상 동안 절차 방에 적응하도록 허용.
  2. 단일 m를 제거부드럽게 꼬리를 잡고 홈 케이지에서 여러개 동시에 마우스의 움직임을 추적 시작하기 위해 시작 버튼 하나 클릭하여 SMART 소프트웨어를 활성화하는 동안 열기 필드 미로의 중앙에 마우스를 놓습니다. 마우스가 미로의 주변 벽과 릴리스의 타이밍 즉시 이동하고 마우스 캡처를 추적하는 것은이 운동을 기록 일치해야하는 것은 정상입니다.
  3. , 추적 소프트웨어는 움직임을 기록되는 시간 동안 하나의 10 분 기간 (그림 3)의 미로의 각 사분면에 걸쳐 주제 마우스의 무료 및 중단 운동을 허용합니다.
  4. 시험 기간이 끝나면, 부드럽게 피사체 마우스 픽업 미로에서 제거하고 그의 홈 케이지로 복귀.
  5. 미로를 청소하기 전에, 시각적으로 미로에 존재하는 배설물 boli 알약을 계산하고 수동으로 추가 분석을 위해 번호를 기록한다.
  6. 모든 분변 알약을 제거하고 소변의 모든 관광 명소를 닦아. 바닥과 95 % 에탄올로 미로 사분면의 벽을 뿌려 깨끗한 종이 타월로 닦아냅니다. 허용 에탄올 용액 이전에 다른 마우스를 테스트에 완전히 건조.
  7. 다음 마우스로 절차를 반복합니다.

4. 측정 및 시험 절차를 수행하는 동안 행동 분석

참고 : 측정을 위해, 오픈 필드 동작의 세 가지 측면 쉽게 (설명 참조)이 프로토콜을 사용하여 특징이다. 비디오 추적 소프트웨어에서 이러한 측정을 액세스하는 방법에 대한 간단한 명령어는 다음과 같다.

  1. SMART 소프트웨어의 주 화면에서, 존 편집기를 엽니 다 "영역"탭을 클릭 한 번으로 "정의"에 커서를 이동합니다.
  2. SMART 소프트웨어 사용자 설명서의 자세한 설명은 추적 경로에 오버레이 영역 또는 그리드를 정의 하는가에 따라. 여기서, 소프트웨어는 미로의 바닥을 덮는 10cm 정사각형의 5 × 5 그리드 (정의하는 데 사용 된
  3. SMART 소프트웨어의 메인 화면에서 "분석"탭으로 커서를 이동 한 데이터 분석 창을여십시오.
  4. "파일"탭으로 커서를 이동하고 위에서 만든 영역 파일을 엽니 다.
  5. "구성"탭으로 커서를 이동하고 "트랙 분석"옵션을 엽니 다. 이것은 "단일 주제 분석 구성"창이 열립니다.
    1. "표준"탭으로 커서를 이동시키고 포함 된 매개 변수 상자 (오른쪽)에 사용 가능한 매개 변수 상자 (왼쪽)에서 "여행하고 거리"매개 변수를 이동합니다.
    2. "영역 전환"탭으로 커서를 이동하고 위의 포함 된 매개 변수 상자에 모든 적절한 매개 변수를 이동합니다.
    3. "전체 트랙"상자가 창 하단에 선택되어 있는지 확인합니다.
    4. 모OK 버튼에 커서를했습니다 및 단일 주제 분석 구성 창을 닫습니다.
      참고 : 수행하고자하는 분석에 따라, 많은 다른 옵션은 분석에서 내 데이터에이 창에서 선택 될 수있다. 매개 변수 데이터의 분석을위한 가장 중요한 결정하기 위해 특정 프로그램의 자세한 사용 설명서를 읽어 보시기 바랍니다.
  6. 프로그램 창의 왼쪽 상단의 파일 탭에서 단일 주제 트랙 창을 열고 모든 트랙이 분석되고 옆에 체크 표시를합니다. 창 상단에있는 확인 표시 버튼에 커서를 이동하고 트랙 Explorer 창을 닫습니다.
  7. 데이터 분석 창에서 "이동"버튼에 커서를 이동하고 하나의 트랙 데이터의 분석을 시작합니다.
  8. 분석 데이터 중 하나를 ASCII 텍스트 파일로 출력 할 수 있습니다 또는 직접 엑셀 스프레드 시트로 내보낼 수 있습니다. 출력 다에 사용하는 소프트웨어 프로그램의 출력 도구를 사용하여자신의 사용에 따.
    참고 : 총 이동 거리 및 표시 영역에서 보낸 시간은 위에 설명 된 데이터 분석 단계에 따라 출력됩니다. 다시, 단계 사용한 사용자 소프트웨어 등에 따라 다르고, 여기에 나타낸 이들 측정에 도달하도록 강조된다. 그러나 데이터 자체와 결과의 해석은 소프트웨어 프로그램의 유사한 독립적이어야한다. 그것은 그 테스트 관리자 바이어스 소프트웨어가 아닌 관리자에 의해 측정 된 데이터를 정량화 수집 된 모든 데이터와이 프로토콜에서 제거도 주목할 필요가있다. 따라서 기술 된 바와 같이 수집 된 데이터에 더 qualifiable 요소는 없다.

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Representative Results

대부분의 경우 실험군 당 균주 개인의 평균 개수는 충분한 관련성 통계를 생성하기 위해 약 20이다. 그러나이 숫자는 마우스 가용성에 따라 8-30의 범위 일 수있다. 필요한 측정 또는 비교에 따라, 또한 연령 유사한 피사체를 사용하는 것이 바람직하다.

열기 필드 미로에서 측정하는 제 틀림없이 가장 중요한 특정 매개 변수는 총 외래 거리입니다. 측정 단위는 비교를 위해 부적절하지만, 가장 자주 메트릭 측정 (cm)로 표현된다. 여기에 (그림 5)에 제시된 실험에서, 야생형 (WT) 또는 정상 C57BL / 6 마우스는 특정 노크 아웃 C57BL / 6 마우스 변형 (KO)과 유사한 보행 능력을 보여줍니다. 총 거리가 이송 균주 또는 치료 사이의 유사한 경​​우 운동 활성을 효과적으로 등식에서 제거되기 때문에, 감정적 인 행동의 추가 분석이 간단해진다기. 테스트 마우스의 전위의 능력에 유의 한 차이가있는 경우 미로의 특정 지정된 영역에서 소비 영역 항목이나 시간이 비 활동 대신 변형 또는 치료 효과로 인해 왜곡 될 수있는 더 같은 분석한다. 기술은 동일하지 않은 운동 활성을 설명하기 위해 존재하지만 이들은 대부분 연구 문제에 따라 다릅니다.

두 개의 마우스 변종 사이의 총 외래 거리가 유사했다, 우리는 thigmotaxis을 분석 할 수 있었다, 또는 피사체의 경향은 WT KO 대 마우스 (그림 6)에, 벽에 가까운 유지. thigmotaxis의 정도는 마우스 (10)의 행동 불안 야기 측정으로 검증되었다. 불안 수준으로 Thigmotaxis 증가 상승. SMART 소프트웨어를 사용하여, 각각의 영역은 계산의 전체 시간 t (10 분)의 함수로서 표시 영역 외측 내측 대 영역에서 소요 된 마우스 (도 3) 및 시간에 의해 이동 경로 상에 적층했다그는 미로. 이 경우, KO 마우스는 WT에 비해 상당히 높은 불안 야기 동작 표시. 대표적인 이동 경로는 WT 마우스 경로가 두 마리의 마우스 이동 거리가 있더라도 미로의 벽 부근에 남아 KO 마우스보다 더 큰 주파수에서 미로의 중앙 영역을 통과하는도 4에서 알 수있는 유사한. 우리는 KO 마우스는 WT 쥐보다 더 높은 불안 관련된 동작을 보이는 그 결론에 도달 할 수 있습니다.

상기 지지체가 KO 마우스에서 불안 수준 증가에 시험 대상이 (도 13)을 제거하고 10 분 후에 시험 기간이 관찰자에 의해 카운트 된 후, boli는 분변에 남아 미로. WT 마우스에 비해 높은 감정적 동물 배변 증가를 나타낼 것으로 인기있는보기 이어 KO 마우스는 분변 boli 존재 상당한 증가를 나타낸다. 이 KO 마우스에서 측정 thigmotaxis의 수준과 상관 그쪽을 나타냅니다 그들의 대응 WT에 비해 t 본 연구에 사용 된 녹 - 아웃 마우스는 증가 감성과 불안을 보였다.

그림 1
네 개의 사분면 OFM 1. 예를 그림. OFM 사진은 샌디에고 악기에서 얻어진 것으로 설명 된 모든 시험 절차에 사용되었다. 미로의 사분면의 치수 센티미터에있는 각 사분면 (Q1-Q4)를 식별됩니다.

그림 2
네 개의 사분면 OFM의 오버 헤드 카메라 뷰 2. 예를 그림. 표시된 화상은 트래킹 절차 이전 SMART 소프트웨어에 의해 인식 카메라 뷰 나타낸다. 각 사분면 (Q4)를 통해 (Q1)를 표시하고, 추적을위한 하나의 마우스 포함됩니다.

ove_content "FO : 유지-together.within 페이지 ="항상 "> 그림 3
WT 및 KO 마우스에 대한 트랙 경로 그림 3. 비교. WT 또는 KO 마우스 중 대표적인 트랙이 표시됩니다. 각 트랙은 테스트를 10 분 동안의 기간에 의해 이동 될 총 거리를 나타낸다. 시작점 (B)과의 추적 종료 지점 (E)가 표시된다. KO 트랙 thigmotaxis 증가 또는 불안 관련 행동을 나타내는 미로의 벽 부근에 가깝게 유지되는 동안 WT 예 트랙 정기적 미로의 중앙 부분에 교차.

그림 4
그림 OFM에서 thigmotaxis에 대한 추적 데이터를 해석하는 데 사용 4. 존 오버레이. SMART 분석 소프트웨어 패키지를 사용하여, 10 × 10cm의 영역이었다 일련 identifieD 및 대상 트랙을 평가하는 데 사용. 내측 영역 9 블록으로 구성하면서 식별 음영대로 외측 영역은 16 블록으로 구성되었다. 미로의 외부 영역에서 보낸 큰 시간이 증가 thigmotaxis로 기록되고 증폭 된 불안 관련 행동을 나타내는입니다.

그림 5
그림 5. 총 거리. OFM에서 WT 여행 (N = 24)와 KO (N = 27) 결합 된 마우스는 각각의 트랙 센티미터 OFM 및 총 거리 하였다 통계적으로 보행의 차이를 시각화 분석했다. 총 거리를 측정 할 때 WT 및 KO 마우스는 OFM 유사하게 수행 하였다. 데이터에 대한 결과를 평균으로 나타내었다 +/- SEM 통계는 (t의 -tests)는 엑셀 2010 (마이크로 소프트 레드몬드 WA) 및 9.2 SAS (SAS 인스티튜트 캐리 NC)를 사용하여 분석을 수행 하였다. [데이터가 변형 된 것입니다라 메쉬 바부에서 D, et.al., 2008]

그림 6
그림 6. 시간. OFM의 내부 및 외부 영역에서 보낸 WT (N = 24)와 KO는 (N = 27) 마우스는 통계적으로 마우스의 차이를 분석 한 미로의 내부 및 외부 영역에서 소비 된 OFM와 시간을 실시 하였다 균주. 7 측정 thigmotaxis 또는 벽 포옹 동작 그림에서 확인 된 미로의 외부 지역에서 보낸 시간은 불안 관련 행동을 나타낸다. KO 마우스는 WT thigmotaxis에 기초하여보다 높은 불안 대책을 나타냈다. 데이터에 대한 결과는 평균으로 표현했다 +/- SEM 통계는 (t의 -tests가) 엑셀 2010 (마이크로 소프트 레드몬드 WA) 및 SAS 9.2 (SAS 연구소, 캐리 NC)를 사용하여 분석을 수행 하였다. P <0.05를. [데이터 라 메쉬 바부에서 수정, et.al., 2008]


그림 OFM 7. 대변 boli 예금. WT (N = 24)와 KO (N = 27) 쥐가 다시 자신의 홈 케이지에 미로에서 제거되기 전에 OFM에서 10 분 테스트를 완료하는 것이 허용되었다. 마우스를 제거한 후, 분변 또는 defecations boli 침전물의 개수 수동 관찰자에 의해 계수 하였다. boli의 증가 수는 대상 동물의 증가 불안과 감격을 표시 할 수 있습니다. WT에 비해 KO 마우스는 분변 boli의 증가를 나타냈다. 데이터에 대한 결과는 평균으로 표현했다 +/- SEM 통계는 (t의 -tests가) 엑셀 2010 (마이크로 소프트 레드몬드 WA) 및 SAS 9.2 (SAS 연구소, 캐리 NC)를 사용하여 분석을 수행 하였다. P <0.05를. [데이터가 원래 라 메쉬 바부 출판, et.al., 2008]

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Discussion

열기 필드 미로 동물 행동 연구에서 가장 널리 사용되는 플랫폼 중 하나입니다. 중요하고, 종래의 2,4- ethological 파라미터 번호를 수집하여 OFM의 수행 동안 분석 될 수있다. 이 자료는 연구자가 불안 관련 감정적 인 행동 8 전체 운동 활성에 이르기까지 행동을 측정 할 수 있습니다. 그러나, OFM의 사용에도 단점은 있습니다. 한가지 문제는 어떤 교란 시험 세션 동안 조작 될 수있는 정적 변수의 넓은 범위이다. 예를 들면 시간, 조명 조건과 새로운 개체 포함을 포함한다. 응용 프로그램의 광범위한 스펙트럼을 지원하는 데 필수적인 실험 프로토콜 설정 및 디자인 변동성은 어려운 연구를 비교할 수 있습니다. 이러한 배경 또는 유전자 변형 마우스 라인과 약물 치료 등의 다양한 주제 변동성이 포함되는 경우, 시험 비교의 어려움은 더욱 증가 할 수 있습니다. 이러한 문제에도 불구하고, OFM은 설치류 행동 연구에서 가장 널리 적용 기법 중 하나이다. 이 마우스 불안과 감격에 관련하여 여기에, 우리는 OFM에서 얻어진 결과 및 분석에 대해 설명합니다.

여기에 오픈 필드 동작의 세 가지 측면은 쉽게이 프로토콜을 사용하는 특징 : 1) 총 거리 cm에 (포함) 시험의 전체 시간 초과 부분 중을; 2) Thigmotaxis 또는 10 분 전체 테스트 시간의 비율의 측정은 피사체가 불안 유사 동작 나타내는 미로의 외부 벽에 인접하여 유지; 제거 대상이 계산 된 후 사분면에 남아있는 분변 펠렛 (boli) 3) 수입니다. 배변 설치류 5 감성의 음과 관련된 측정은 마우스 피사체에 불안의 레벨을 지시하는 데 사용될 수있다. SMART 소프트웨어에서 이러한 측정에 액세스하는 방법에 대한 간단한 명령은 다음과 같습니다.

피험자의 운동 활성이 중요하다이전 OFM 데이터의 분석 또는 그 문제에 어떤 동물 행동 미로에 대한 식별. 마우스 또는 약물 치료의 다양한 효과의 서로 다른 균주를 비교할 때, 마우스의 보행 능력은 매우 중요합니다. 된 운동 능력은 치료 효과로 인해 손상되는 경우, 혼동되어 이동하는 피사체의 능력에 의존하는 활동을 측정. 따라서,이 실험의 첫 번째 단계는 두 균주간에 총 피사체의 움직임을 비교하는 것이다. SMART 소프트웨어의 주제 추적 기능을 사용하여, 우리는 C57BL / 6 마우스의 두 개의 서로 다른 균주 (그림 4)에 의한 시험 기간 동안 미로에서 다루는 전체 보행 거리를 측정 하였다. 모두 야생형 (WT) 및 유전자 녹아웃 마우스 (KO)는 유사한 보행 능력을 표시. 이 (cm)에 총 거리에서 통계적으로 유의 한 차이는 없었다 실험의 10 분의 기간에 걸쳐 중 하나를 마우스 라인으로 이동했다. 한 균주에 비해 보행에 유의 한 차이를 보여 주었다다른, 어쩌면 다른 행동 패러다임을 사용하여 더 조사 전문은 차이를 특성화하기 위해 필요할 것이다. 그러나,이 경우, 피사체의 보행 균주는 또한 불안증 매개 변수를 조사하기 위해 보정되지 않은 OFM 유래 된 데이터의 동일한 수를 직접 사용했다. 그것은 일부 연구자가 높은 활동을 해석하거나 다른 사람이 감격 (11)의 독립적 인 탐색 행동의 임신 동안 낮은 감격의 인덱스로 탐색 행동을 증가했다고 여기에 주목해야한다. 하나는 운동 활성의 차이는 감정적 인 조치 (12)를 혼동 할 수 있음을 인정한다. 총 거리가 외래 여기서 사용 마우스 균주간에 유사 하였다 그러나, 마우스의 활동 수준이 감성 요소로부터 분리 하였다.

동작을 사육하는 것은 수직 수직으로 뒷발 두 개 모두에 서 대상 동물로 구성되어 있습니다. 이는 탐색 동작으로 간주되어 사용되어왔다OFM 및 고가 플러스 미로 (13) 모두에서 불안의 측정. 그러나, 동작을 양육하는 불안 또는 불안 야기 중 하나입니다 명확한 표시가 없습니다. 일부 연구는 높일 수 양육 다른 사람들이 행동을 양육 감소하면서 가정하면 증가 불안 (15)를 나타낸다 마우스 (14)의 증가 불안 수준과 일치입니다. 실험 프로토콜과 조사 ethological 매개 변수에 따라, 여기에 분석되지 않은 양육하는 동안 따라서, 양육 간단한 보행 동작과 불안 연결된 행동을 구별하는 데 사용할 수 있습니다.

이것은 설치류 모델에서 불안을 측정하는 것은 훨씬 더 복잡 하나 미로 환경 (16)에 하나의 파라미터를 사용하는 것보다 것이 제안되어있다. 따라서, 여러 번의 시험에서 시험 또는 여러 측정 값을 사용하여 평가 결과를 강화할 수있다. Thigmotaxis 또는 벽 포옹 행동은 대부분의 설치류에서 관찰되며되기 불안에 연결되어haviors. 그것은 가장 가능성이 대형 오픈 영역 또는인지 된 위험 (17, 18)의 영역을 방지하기 위해 설치류의 기본 성향에 연결되어 있습니다. 에 관계없이 기본 원인, thigmotaxis은 종종 더 특정 불안 관련 검사 (19)의 출발점으로 간주되는 중요한 불안 링크 된 행동이다.

OFM에서 Thigmotaxis은 불안, 불안 야기 심지어 비 약물 치료를 평가하는 데 사용됩니다. 도파민 작용제는 D1과 D2 도파민 수용체가 증가 된 도파민 전송 (20) 불안 야기 같은 효과에 관여하는 것으로 나타났습니다 동안 같은 다이아 제팜과 chlordiazepoxide 등의 불안과 관련된 약물은 OFM 4 마우스 동작에 심각한 영향을 보여 주었다. OFM (21) 마우스 불안 같은 행동에 대응 명확한 변형 차이가있다. 예를 들어, BALB / c 마우스, 공통의 집 마우스의 흰둥이 실험실 사육 변형, 더 큰 행동 반응을 보여급성 스트레스에보다 C57BL / 6 마우스 (22)을한다. 종 특정 연구 문제에 사용하기위한 시험 패러다임과의 선택과 관련된 파라미터를 설정할 때 따라서 피사체 간의 반응에서 기저선 변동이 고려되어야한다.

또한 높은 감정적 동물 배변 증가를 나타낼 것으로 인기 도면이다. 이보기는 일부에 의해 뒷받침되었지만, 불안의 고유 한 조치로 배변의 유효 기간은 23 일에 의문을 제기하고있다. 그러나, 설치류의 감성과 배변 이벤트의 상관 관계를 홀의 원래 논문 (1934) 이후, 주제에 문학의 많은 양의 관계 2를 재확인했다. 최근의 연구 결과는 응답의 차이가 덜 분명 긴 관찰 (30 분)에 반대 defecations가 실제로 여기에 수행 상대적으로 짧은 테스트 기간에 정서적 불안과 관련된 행동의 유용한 지표가 될 수 있음을 나타내었다 (21)

그것은 OFM들이 촉각 감각에 의존 생쥐의 행동을 주목하는 것이 중요하다. 마우스가 더 쉽게 3 중앙 부분을 미로의 벽에 촉각 접촉을 잃고 입력 할 때 따라서 마우스에 대한 손상 또는 수염의 부족을 측정 불안 연결된 행동의 감소의 원인이 될 수 있습니다. 미로 탐사는 테스트 과정 중에 또는 미로 층 (24)의 색에 물이나 음식 박탈, 조명에 의존 할 수있다. 그것은 불안 관련 행동을위한 OFM 결과를 해석하기 전에, 이러한 변수뿐만 아니라, 임의의 처리 유도 인자를 검증하는 것이 중요하다. 원고의 모든 시험 조건의 자세한보고는 적절한 교차 연구 비교를 용이하게하는 것이 중요합니다.

우리는 모터와 운동 조사 생쥐의 감성에 관한로서 OFM의 사용을 논의 여기하면서 또한, OFM 또한 SU 다른 행동을 테스트하기 위해 사용될 수있다새로운 물체 인식 및 메모리 25 채널. 메모리의 유형을 분석하고에 따라, 새로운 객체와 미로의 시간은 5 분에서 24 시간까지 다양 할 수 있습니다. 신규 대상 인식 시험에서 미로의 용이성과 유연성은 단기 또는 장기 기억 테스트 가능하고, 선택적으로 기억 형성의 특정 스테이지에 급성 약물 치료의 효과를 분석하는데 사용될 수있다. 결론적 OFM 성능 (26)의 정단 시험이다. 측정 된 불안과 관련된 행동은 여러 가지 행동 기본 프로세스의 누적입니다. 응답이 검출 가능하게 측정되면 이에 따라, 그것은 특정 결함을 식별하도록 추가로 그 응답을 조사하기 위해 종종 필요하다.

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Materials

Name Company Catalog Number Comments
Multi Unit Open Field Test San Diego Instruments, Inc. White 7001-0354 Any single or multi unit open field maze can be used
SMART DT Tracking Software PanLab/Harvard Apparatus 76-0695 Any tracking software can be utilized with this protocol
Sony 990x Video Camera Recorder Sony CCD-TRV328 Any suitable video camera can be attached to computer for recording tracking profiles.

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Hall, C. S. Emotional behavior in the rat: defecation and urination as measures of individual differences in emotionality. J. Comp. Psychol. 18, 385-403 (1934).
  2. Walsh, R. N., Cummins, R. A. The open field test: a critical review. Psychol. Bull. 83, 482-504 (1976).
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  4. Choleris, E., Thomas, A. W., Kavaliers, M., Prato, F. S. A detailed ethological analysis of the mouse open field test: effects of diazepam, chlordiazpoxide and an extremely low frequency pulsed magnetic field. Neurosci. Biobehav. Rev. 25, 235-260 (2001).
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행동 문제 96 오픈 필드 미로 행동 동물 모델 불안 운동력 활동 Thigmotaxis 약물 치료
열기 필드 미로의 사용은 마우스의 운동력과 불안 같은 행동을 측정하기 위해
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Seibenhener, M. L., Wooten, M. C.More

Seibenhener, M. L., Wooten, M. C. Use of the Open Field Maze to Measure Locomotor and Anxiety-like Behavior in Mice. J. Vis. Exp. (96), e52434, doi:10.3791/52434 (2015).

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