Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Medicine

Standardiseret rotte koronarringforberedelse og realtidsregistrering af dynamiske spændingsændringer langs kardiameter

Published: June 16, 2022 doi: 10.3791/64121
* These authors contributed equally

Summary

Den nuværende protokol beskriver trådmyografteknikken til måling af vaskulær reaktivitet af rottens kranspulsåre.

Abstract

Som en nøglebegivenhed af hjerte-kar-systemsygdomme er koronararteriesygdom (CAD) blevet bredt betragtet som den største synder af aterosklerose, myokardieinfarkt og angina pectoris, som alvorligt truer menneskers liv og sundhed over hele verden. Men hvordan man registrerer de dynamiske biomekaniske egenskaber ved isolerede blodkar har længe forvirret folk. I mellemtiden er præcis positionering og isolering af kranspulsårer til måling af in vitro dynamiske vaskulære spændingsændringer blevet en tendens i CAD-lægemiddeludvikling. Den nuværende protokol beskriver den makroskopiske identifikation og mikroskopiske adskillelse af rotte koronararterier. Sammentræknings- og udvidelsesfunktionen af koronararterierringen langs kardiameteren blev overvåget ved hjælp af det etablerede multimyografsystem. De standardiserede og programmerede protokoller for koronar ringspændingsmåling, fra prøveudtagning til dataindsamling, forbedrer repeterbarheden af de eksperimentelle data enormt, hvilket sikrer ægtheden af vaskulære spændingsregistre efter fysiologisk, patologisk og lægemiddelintervention.

Introduction

Koronararteriesygdom (CAD) er blevet bredt anerkendt og bekymret som en typisk og repræsentativ hjerte-kar-sygdom, der er den største dødsårsag i både udviklede lande og udviklingslande 1,2. Som en blod- og iltforsyningsrute for normal hjertefysiologisk funktion kommer cirkulerende blod ind og nærer hjertet gennem to hovedarterier og et blodvaskulært netværk på overfladen af myokardiet 3,4. Kolesterol og fedtdepoter i kranspulsårerne afskærer hjertets blodforsyning og det vaskulære systems voldsomme inflammatoriske reaktion, hvilket forårsager aterosklerose, stabil angina, ustabil angina, myokardieinfarkt eller pludselig hjertedød 5,6. Som reaktion på patologisk stenose i kranspulsårerne tilfredsstiller kompenserende accelereret fysiologisk hjerteslag blodforsyningen af selve hjertet eller vitale organer i kroppen ved at øge udgangen af venstre ventrikel7. Hvis langvarig koronar stenose ikke lindres i tide, kan omfattende nye blodkar udvikle sig i visse områder af hjertet8. På nuværende tidspunkt vedtager den kliniske behandling af CAD ofte lægemiddeltrombolyse eller kirurgisk mekanisk trombolyse og en eksogen bionisk vaskulær bypass med hyppig medicin og stor kirurgisk handicap9. Derfor er den funktionelle undersøgelse af koronararterie fysiologisk aktivitet stadig et presserende gennembrud for hjerte-kar-sygdomme10.

Der er ingen tilgængelige tekniske midler til at detektere koronar fysiologisk aktivitet, bortset fra trådløse telemetrisystemer, som dynamisk kan registrere in vivo koronartryk, vaskulær spænding, iltmætning i blodet og pH-værdier11. Derfor, i betragtning af koronararteriernes stoflige hemmeligholdelse og kompleksitet, er nøjagtig identifikation og isolering af kranspulsårer utvivlsomt de bedste valg til at udforske flere mekanismer af CAD in vitro4.

Et serie multi myografsystem, især en mikrovaskulær spændingsdetektor (se Materialetabel), er en meget moden omsættelig anordning til registrering af in vitro vævsspændingsændringer af små vaskulære, lymfatiske og bronchiale rør med egenskaberne høj præcision og kontinuerlig dynamisk optagelse12. Det nævnte system er i vid udstrækning blevet anvendt til at registrere in vitro vævsspændingsegenskaber for hulrumsstrukturer med diametre på 60 μm til 10 mm. De kontinuerlige opvarmningsfunktioner på trådmikrografens platform opvejer stort set stimuleringen af det ugunstige ydre miljø. I mellemtiden giver de konstante indgange af gasblandingen og pH-værdierne os mulighed for at opnå mere nøjagtige vaskulære spændingsdata i en lignende fysiologisk tilstand13. I betragtning af kompleksiteten af anatomisk lokalisering af rotte koronararterier (figur 1) har dens isolation imidlertid været forvirrende og begrænset mekanismens udforskning af diversificeret hjerte-kar-sygdom og lægemiddeludvikling. Derfor introducerer denne protokol den anatomiske placering og separationsproces af rotte koronararterien i detaljer efterfulgt af spændingsmåling på trådmikrografens platform14.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Dyreprotokollen blev gennemgået og godkendt af forvaltningskomitéen fra Chengdu University of Traditional Chinese Medicine (record no. 2021-11). Hanrotter af Sprague Dawley (SD) (260-300 g, 8-10 uger gamle) blev anvendt til denne undersøgelse. Rotterne blev holdt i et dyrekammer og kunne frit drikke og spise under forsøget.

1. Forberedelse af opløsning

  1. Der fremstilles fysiologisk saltopløsning (PSS) ved at opløse 118 mM NaCl, 4,7 mM K+, 2,5 mMCaCl2, 1,2 mM KH2PO4, 1,2 mM MgCl2∙6H2O, 25 mM NaHCO3, 11 mM D-glucose og 5 mM HEPES (se materialetabel).
  2. Tilbered høj K+ saltopløsning ved at opløse 58 mM NaCl, 60 mM K+, 2,5 mM CaCl2, 1,2 mM KH2PO4, 1,2 mM MgCl2∙6H2O, 25 mM NaHCO3, 11 mM D-glucose og 5 mM HEPES.
  3. Mæt ovennævnte to opløsninger og boble med en blandet gas på 95%O2 og 5% CO2. I mellemtiden opretholdes opløsningens pH-værdier mellem 7,38 og 7,42 med 2 mM NaOH.
    BEMÆRK: For detaljer information om opløsningsforberedelse, se reference15.

2. Rotte koronararterie dissektion

  1. Bedøv rotten ved indånding af 2% isofluran. Bekræft dyb anæstesi ved tåspids og om nødvendigt administrere yderligere anæstetika. Åbn derefter straks brysthulen for at udsætte hjertet på det bærbare operationsbord efter en tidligere offentliggjort rapport12.
  2. Efter dissociering og fjernelse af hjertet, drænes det resterende blod fra alle hjertekamrene ved mildt at klemme med medicinsk plasttang. Det forbehandlede hjerte anbringes hurtigt i en petriskål indeholdende 95 % O2 + 5 % CO2-mættet PSS ved 4 °C med en pH-værdi på 7,40.
  3. For nøjagtigt at identificere koronararteriernes anatomiske position skal du justere det isolerede hjertes kropsholdning under lysmikroskopet i henhold til det skematiske diagram (figur 2A).
    BEMÆRK: På frontalvisningen var den højre auricle og lungearterien henholdsvis øverst til venstre og øverst til højre.
    1. Skær venstre og højre ventrikulære hulrum langs interventrikulær septum fra roden af lungearterien med kirurgisk saks og pincet (figur 2B).
  4. For at adskille venstre og højre kranspulsårer fra myokardievævet skal du dissekere højre ventrikel under et optisk anatomisk mikroskop for grundigt at udsætte den højre kranspulsåregren. Identificer derefter placeringen af den venstre kranspulsåre ved at rotere hjertevævet 45 ° med uret (figur 2D).
  5. Efter fjernelse af det omgivende klæbrige myokardievæv skelner eksplicit de pulserende venstre (ca. 5 mm) og højre (ca. 5 mm) kranspulsårer. Kranspulsårerne i midten adskilles straks, og pss nedsænkes fuldstændigt ved 4 °C. Få en arteriel ring på ca. 2 mm ved lodret at skære den løsrevne arterie med anatomisk saks for at registrere vaskulær spænding under forskellige stimuli (figur 2E).

3. Suspension og fiksering af arteriel ring

BEMÆRK: For detaljer om dette trin, se reference14.

  1. To 2 cm ledninger i rustfrit stål klargøres (se materialetabel), og der lægges en 4 °C PSS-opløsning mættet med 95 %O2 + 5 % CO2 i blød. Før begge ledninger parallelt gennem arteriel ring sammen med fartøjets retning under et optisk anatomisk mikroskop og med ledninger af samme længde udsat i begge ender af vaskulærhulen.
  2. Fastgør arteriering med ståltråden foran og bagpå i badet på trådmikrografen fyldt med boblende PSS med 95% O2 + 5% CO2. Drej den vandrette skrueknap for en passende afstand for og bag, så de to ledninger er vandrette, og arterierringen er i en naturlig afslapningstilstand.
  3. Når du har installeret DMT-badet på det termostatiske apparat, skal du åbne dataindsamlingssoftwaren (se Materialetabel) for at sikre, at det tilsvarende stisignal blev registreret. Indstil følgende parametre: okularkalibrering (mm/div): 0,36; måltryk (kPa): 13,3; IC1/IC100: 0,9; online gennemsnitstid: 2 s; forsinkelsestid: 60 s. Trinene til arteriel ringfiksering er vist i figur 3.

4. Standardisering af vaskulær spænding i rottearteriel ring

BEMÆRK: For forskellige hulrumsprøver var optimal startspænding nødvendig for, at fartøjer kunne opretholde enestående aktivitet in vitro. Yderligere oplysninger findes i reference15.

  1. Opnå den optimale indledende spænding af arteriel ring ved at anvende en rimelig spænding langs beholderens diameter.
    BEMÆRK: Baseret på den foregående undersøgelse16 blev den maksimale agonistinducerede spænding opnået ved faktor k-værdien på 0,90 med den indledende strækspænding på 1,16 ± 0,04 mN/mm (referenceværdier for forskellige beholderprøver: k-værdi, 0,90-0,95; startspænding, 1,16-1,52 mN/mm).
  2. På dette tidspunkt skal du indstille den viste vaskulære spændingsværdi til nul. Påfør derefter en 3 mN trækstimulering på arterieringen ved at dreje badets spiralakse.
  3. Efter inkubation i 1 time i oxygenmættet PSS-buffer ved 37 °C, pH 7,40, indstilles spændingsværdien til 0 mN igen på trådmikrografens spændingskontrolpanel. Indstillingsprocessen for den indledende spænding af arteriel ring er vist i figur 4.

5. Påvisning af reaktivitet af koronararteriering

  1. Udfør koronararterierringens kontraktile aktivitet med trådmyografteknikken14, og valider i tre separate operationer ved at stimulere med 60 mM K + opløsning i 10 minutter hver.
  2. Efter hver stimulering skylles badet med iltmættet PSS, indtil vaskulær tone vender tilbage til sin oprindelige tilstand.
    BEMÆRK: Kun når spændingsudsvinget i de tre parallelle målinger var mindre end 10%, og amplituden af hver sammentrækning var større end 1 mN/mm, kunne kvalificerede og meget aktive arterielle ringe bruges til yderligere eksperimenter. Aktivitetsverifikationen af rottekronsringen er vist i figur 5.

6. Postkirurgisk behandling

  1. Efter operationen aflives dyrene efter institutionelt godkendte protokoller.
    BEMÆRK: I denne undersøgelse blev dyrene aflivet ved indånding af overskydende isofluran.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Anatomisk placeret, rotte koronararterier fordelt og skjult dybt i myokardievæv blev ikke let genkendt. Ved at sammenligne kranspulsårerne hos mennesker (figur 1A) og rotter (figur 1B) blev der udført hurtig og nøjagtig adskillelse af rottepulsårer i henhold til prøveudtagningsprocessen i figur 2. Efter nøjagtigt at have lokaliseret den højre aurikel, lungearterie og spids forfra under et optisk mikroskop, blev myokardiet dissekeret langs den faste sorte linje vist i figur 2A. Ca. 5 mm af den mellemliggende gren af kranspulsåren var tydeligt udsat for vores syn. Efter en fin adskillelse af det klæbrige myokardium, der omgiver den ventrikulære septalarterie, blev en 2 cm ledning brugt til at krydse en 2 mm sløjfe af koronararterien i retning af vaskulær justering. Straks blev den løsrevne 2 mm koronarring derefter forsvarligt fastgjort i DMT-badet, som vist i figur 3. Efter at en indledende 3 mN spænding blev påført arteriel ring (figur 4), oversteg dens spænding mere end 2 mN ved at anvende 60 mM K + parallelt tre gange (figur 5). Således havde procedurerne ovenfor resulteret i en isoleret koronarring med fremragende fysiologisk aktivitet.

Kumulativ K + (20, 28, 39, 55, 77 og 108 mM) eller U46619 (0,01, 0,03, 0,1, 0,3 og 1 μM) blev tilsat til badet af DMT 620M, hvilket resulterede i en koncentrationsafhængig stigning i in vitro vaskulær tone. Den næste koncentration af K+ eller U46619 (en thromboxan A2 (TP) receptoragonist)15 blev tilsat, når vasokonstriktionseffekten nåede et plateau. De eksperimentelle resultater er vist i figur 6A,B. For isolerede koronarringe indsnævret af K + (60 mM) og U46619 (0,3 μM) forårsagede testlægemidlet apigenin (1, 3, 10, 30 og 100 μM) vasodilatation på en overraskende koncentrationsafhængig måde (figur 6C).

Figure 1
Figur 1: Frihåndstegninger af humane og rotte koronararterier. (A) præsenterer egenskaberne ved den overfladiske fordeling af venstre og højre kranspulsårer fra det menneskelige hjertes forside og genkendes let af det blotte øje. (B) demonstrerer rottens venstre og højre kranspulsårer dybt inde i myokardiet og deres forgrenede interventrikulære septum. Forkortelser: RCA = højre kranspulsåre; LCA = venstre kranspulsåre; ISB = interventrikulær septum gren. Klik her for at se en større version af denne figur.

Figure 2
Figur 2: Diagram over koronararterieseparation hos rotter. (A) Den højre aurikel, lungearterie, spids og anatomiske linje i rottehjertet blev observeret fra fronten under et lysmikroskop. (B) Venstre og højre ventrikulære lumen blev indskåret langs septum fra roden af lungearterien. (C) Anatomisk placering af venstre og højre kranspulsårer og deres interventrikulære septale gren. (D) En 2 mm ring af arterien. (E) Arterierringen er fastgjort med ledning langs fartøjets retning. Forkortelser: RA = højre auricle; PA = lungearterie; RCA = højre kranspulsåre; ISB = interventrikulær septumgren; LCA = venstre kranspulsåre. Klik her for at se en større version af denne figur.

Figure 3
Figur 3: En skematisk af arteriel monteringsprocedure. Arterieringen med ledning blev overført til (A) og fastspændt på DMT-badet (B). Ståltråden blev fastgjort og skruet med uret til øverst til venstre (C) og nederst til venstre (D). (E) Kæberne fra hinanden blev skruet sammen for at give plads til at lade den anden ledning passere gennem arterieringen. (F) Den anden ledning var parallel gennem arteriel ring. Ståltråden blev fastgjort og skruet med uret øverst til højre (G) og nederst til højre (H). (I) Kæberne fra hinanden blev løst skruet for at efterlade arteriel ring i sin naturlige tilstand. De grønne linjer repræsenterer ledningerne, og de orange cylindre repræsenterer 2 mm isoleret arteriel ring. Klik her for at se en større version af denne figur.

Figure 4
Figur 4: Normaliseringsprocedure for arteriel ring. Efter at spændingen af den faste isolerede arterielle ring vendte tilbage til 0 mN, blev der påført en 3 mN trækkraft på arteriel ring ad gangen. Efter 5 minutter faldt vaskulærspændingen til 2,5 mN. Ved at øge spændingen til 3 mN og holde den stabil i 5 minutter blev spændingen af koronararterierringen initialiseret til 0 mN og hvilet i 1 time til efterfølgende undersøgelser af vaskulær spænding af forskellige stimuli. Klik her for at se en større version af denne figur.

Figure 5
Figur 5: Testning af vaskulær reaktivitet. Tre anvendelser på 60 mM K+ stimulerede spændingen af den isolerede koronararteriering til mere end 2 mN, og de tre målinger var mindre end 10%, hvilket tyder på en overlegen vaskulær aktivitet. Efter hver stimulering skylles badet forsigtigt med en 37 °C iltmættet PSS-opløsning, indtil spændingen var 0 mN. Klik her for at se en større version af denne figur.

Figure 6
Figur 6: Repræsentativ sporing af kumulativ dosiskontraktion af rotte koronararterie via K + eller U46619. Efterhånden som dosis af K+ (A) og U46619 (B) steg, steg kraften dosisafhængig. (C) henviste til apigenins afslappende virkning på 60 mM K+- og 0,3 μM U46619-kontraheret arteriel ring på en koncentrationsafhængig måde. Klik her for at se en større version af denne figur.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Forstyrrelsen af koronar mikrocirkulation, som involverer en bred vifte af patienter med CAD, er gradvist blevet anerkendt og vedrørte grundlaget for tilstrækkelig myokardiumperfusion. I betragtning af de alvorlige komplikationer af pludselig koronar hjertesygdom og hjerte-kar-sygdom er rettidig lægemiddelforebyggelse og behandling ekstremt vigtig for en klinisk person med CAD17. Uundgåeligt har hemmeligholdelsen af koronararterieanatomi og kompleksiteten af dens fysiologiske struktur alvorligt begrænset den rationelle og videnskabelige evaluering af effektiviteten af lægemidler og behandlinger for CAD 18,19,20,21,22,23,24,25 . Uden tvivl er nøjagtig lokalisering og isolering af aktive koronararterier en forudsætning for at fremme udforskningen af patologiske mekanismer og evaluering af forebyggelses- og behandlingsforanstaltninger for CAD-relaterede sygdomme. Trådmikrografens platform er velegnet til utrættelig registrering af in vitro-vævsspænding med ringformede og hulrumsstrukturer, der varierer i diameter fra 60 μm til 10 mm. Koronararterierringen kan fastgøres til kammeret med to ledninger med konstant temperatur og iltkontrol. Dataene om vasokonstriktion og afslapning efter tilsætning af forskellige lægemidler indtastes i computeren gennem spændingssensoren, med data, der løbende erhverves og dokumenteres14.

Denne artikel beskriver hovedsageligt rottens koronararterie konkrete position og separationsproces. Og den dynamiske proces med koronararteriespændingsændringer hos rotter blev målt af trådmikrografsystemet. I betragtning af heterogeniteten af menneskelige og rottearter skal vi være opmærksomme på disse forskelle, når vi leder efter og isolerer rotte koronararterier. Rotte koronararterierne er opdelt i venstre og højre arterier med en uafhængig interventrikulær septal gren. De menneskelige kranspulsårer er på overfladen af hjertet, mens rotte koronararterierne er lidt dybere. Ved måling af arteriel ringspænding blev al bufferopløsning mættet og boblet med 95%O2 + 5% CO2 ved 37 °C, pH = 7,40. Den faste proces af arteriel ring med to ledninger blev introduceret i detaljer. Arterien i kroppen er i en tilstand af mikroindsnævring snarere end en tilstand af fuldstændig afslapning. Og arteriens kontraktile funktion er tæt forbundet med den trækkraft, der til en vis grad påføres dem. Derfor er det nødvendigt at standardisere arteriel ring, så den er i en optimal forudindlæst tilstand for at opretholde overlegen vaskulær fysiologisk aktivitet i det efterfølgende eksperiment. Da høj K + tilstand (60 mM) kan depolarisere cellemembranen og aktivere spændingsstyrede Ca2 + kanaler, forårsager dette tilstrømningen af ekstracellulær Ca2+ og arteriel sammentrækning26.

I testen af vasokonstriktion og udvidelse blev den kontraktile virkning af K + eller U46619 på rotte koronararterier undersøgt. I resultaterne kan K + eller U46619 støt indsnævre koronararterierne hos rotter på en koncentrationsafhængig måde ved at virke på ionkanaler eller specifikke receptorer. K + indsnævrer kar hovedsageligt ved at depolarisere cellemembraner og åbne L-type Ca2+ kanaler27. I mellemtiden indsnævrer U46619, en analog af TXA2, skibe primært ved at aktivere cirkulære nukleotid-gatede kanaler og TXA2-receptorer. Apigenin, en slags flavonoid, findes bredt i frugt, grøntsager og traditionelle kinesiske lægemidler (Sæd plantaginis og kinesisk starjasmin)28. Resultaterne erklærede, at apigenin kunne koncentrationsafhængigt udvide sammentrækningen af koronararterier for 60 mM K + og 0,3 μM U46619 stimuli. I slutningen af eksperimentet blev koronarringen med gunstig aktivitet igen valideret ved at tilføje 60 mM K +, hvilket forårsagede vasokonstriktion svarende til den oprindelige stimulering. Selvom undersøgelsen hovedsageligt fokuserede på kranspulsårer, var trådmikrografsystemet også anvendeligt på andre ekstremt små vævskar, lymfatik og bronchus. Afslutningsvis beskrev denne artikel hovedsageligt placeringen og isoleringen af rotte koronararterier. I mellemtiden blev dens spændingsændringer målt ved hjælp af trådmikrografsystemplatformen, hvilket gav en nøjagtig og reproducerbar metode til CAD-udforskning.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Forfatterne har intet at afsløre.

Acknowledgments

Dette arbejde blev støttet af Key R&D-projektet fra Sichuan Provincial Science and Technology Plan (2022YFS0438), National Natural Science Foundation of China (82104533), China Postdoctoral Science Foundation (2020M683273) og Science &Technology Department of Sichuan Province (2021YJ0175).

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Apigenin Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China 150731
CaCl2 Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China A501330
D-glucose Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China A610219
HEPES Xiya Reagent Co., Ltd., Shandong, China S3872
KCl Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China A100395
KH2PO4 Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China A100781
LabChart Professional version 8.3  ADInstruments, Australia
MgCl2·6H2O Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China A100288
Multi myograph system  Danish Myo Technology, Aarhus, Denmark 620M
NaCl Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China A100241
NaHCO3 Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China A100865
Steel wires Danish Myo Technology, Aarhus, Denmark 400447
U46619 Sigma, USA D8174

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Malakar, A. K., et al. A review on coronary artery disease, its risk factors, and therapeutics. Journal of Cellular Physiology. 234 (10), 16812-16823 (2019).
  2. Murray, C., et al. national age-sex specific all-cause and cause-specific mortality for 240 causes of death, 1990-2013: A systematic analysis for the global burden of disease Study 2013. The Lancet. 385 (9963), 117-171 (2015).
  3. Zhang, Y., et al. Adenosine and adenosine receptor-mediated action in coronary microcirculation. Basic Research in Cardiology. 116 (1), 22 (2021).
  4. Allaqaband, H., Gutterman, D. D., Kadlec, A. O. Physiological consequences of coronary arteriolar dysfunction and its influence on cardiovascular disease. Physiology. 33 (5), 338-347 (2018).
  5. Minelli, S., Minelli, P., Montinari, M. R. Reflections on atherosclerosis: Lesson from the past and future research directions. Journal of Multidisciplinary Healthcare. 13, 621-633 (2020).
  6. Alvarez-Alvarez, M. M., Zanetti, D., Carreras-Torres, R., Moral, P., Athanasiadis, G. A survey of sub-saharan gene flow into the mediterranean at risk loci for coronary artery disease. European Journal of Human Genetics. 25 (4), 472-476 (2017).
  7. LaCombe, P., Tariq, M. A., Lappin, S. L. Physiology, Afterload Reduction. StatPearls [Internet]. , StatPearls Publishing. Treasure Island (FL). (2022).
  8. Gutterman, D. D., et al. The human microcirculation: regulation of flow and beyond. Circulation Research. 118 (1), 157-172 (2016).
  9. Wang, G., Li, F., Hou, X. Complementary and alternative therapies for stable angina pectoris of coronary heart disease: A protocol for systematic review and network meta-analysis. Medicine. 101 (7), 28850 (2022).
  10. Markousis-Mavrogenis, G., et al. Coronary microvascular disease: the "meeting point" of cardiology. European Journal of Clinical Investigation. 52 (5), 13737 (2021).
  11. Allison, B. J., et al. Fetal in vivo continuous cardiovascular function during chronic hypoxia. The Journal of Physiology. 594 (5), 1247-1264 (2016).
  12. Wenceslau, C. F., et al. Guidelines for the measurement of vascular function and structure in isolated arteries and veins. American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology. 321 (1), 77-111 (2021).
  13. Liu, L., et al. Comparison of Ca2+ handling for the regulation of vasoconstriction between rat coronary and renal arteries. Journal of Vascular Research. 56 (4), 191-203 (2019).
  14. Sun, J., et al. Isometric contractility measurement of the mouse mesenteric artery using wire myography. Journal of Visualized Experiments. (138), e58064 (2018).
  15. Guo, P., et al. Coronary hypercontractility to acidosis owes to the greater activity of TMEM16A/ANO1 in the arterial smooth muscle cells. Biomedicine & Pharmacotherapy. 139, 111615 (2021).
  16. Ping, N. N., Cao, L., Xiao, X., Li, S., Cao, Y. X. The determination of optimal initial tension in rat coronary artery using wire myography. Physiological Research. 63 (1), 143-146 (2014).
  17. Niccoli, G., Scalone, G., Lerman, A., Crea, F. Coronary microvascular obstruction in acute myocardial infarction. European Heart Journal. 37 (13), 1024-1033 (2016).
  18. Mumma, B., Flacke, N. Current diagnostic and therapeutic strategies in microvascular angina. Current Emergency and Hospital Medicine Reports. 3 (1), 30-37 (2015).
  19. Lanza, G. A., Parrinello, R., Figliozzi, S. Management of microvascular angina pectoris. American Journal of Cardiovascular Drugs. 14 (1), 31-40 (2014).
  20. Zhu, T. Q., et al. Beneficial effects of intracoronary tirofiban bolus administration following upstream intravenous treatment in patients with ST-elevation myocardial infarction undergoing primary percutaneous coronary intervention: The ICT-AMI study. International Journal of Cardiology. 165 (3), 437-443 (2013).
  21. Huang, D., et al. Restoration of coronary flow in patients with no-reflow after primary coronary intervention of acute myocardial infarction (RECOVER). American Heart Journal. 164 (3), 394-401 (2012).
  22. Fu, W. J., et al. Anti-atherosclerosis and cardio-protective effects of the Angong Niuhuang Pill on a high fat and vitamin D3 induced rodent model of atherosclerosis. Journal of Ethnopharmacology. 195, 118-126 (2017).
  23. Li, J., et al. Chinese medicine She-Xiang-Xin-Tong-Ning, containing moschus, corydalis and ginseng, protects from myocardial ischemia injury via angiogenesis. The American Journal of Chinese Medicine. 48 (1), 107-126 (2020).
  24. Wu, W., et al. Three dimensional reconstruction of coronary artery stents from optical coherence tomography: Experimental validation and clinical feasibility. Scientific Reports. 11 (1), 1-15 (2021).
  25. Liu, M., et al. Janus-like role of fibroblast growth factor 2 in arteriosclerotic coronary artery disease: Atherogenesis and angiogenesis. Atherosclerosis. 229 (1), 10-17 (2013).
  26. Hu, G., Li, X., Zhang, S., Wang, X. Association of rat thoracic aorta dilatation by astragaloside IV with the generation of endothelium-derived hyperpolarizing factors and nitric oxide, and the blockade of Ca2+ channels. Biomedical reports. 5 (1), 27-34 (2016).
  27. Guo, Y., et al. Anticonstriction effect of MCA in rats by danggui buxue decoction. Frontiers in Pharmacology. 12, 749915 (2021).
  28. Jing, Y., et al. Apigenin relaxes rat intrarenal arteries, depresses Ca2+-activated Cl− currents and augments voltage-dependent K+ currents of the arterial smooth muscle cells. Biomedicine & Pharmacotherapy. 115, 108926 (2019).

Tags

Medicin udgave 184 koronararterie anatomisk position arteriel adskillelse spænding multimyografsystem
Standardiseret rotte koronarringforberedelse og realtidsregistrering af dynamiske spændingsændringer langs kardiameter
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Guo, P., An, W., Guo, Y., Sun, Z.,More

Guo, P., An, W., Guo, Y., Sun, Z., Wang, X., Zhang, S. Standardized Rat Coronary Ring Preparation and Real-Time Recording of Dynamic Tension Changes Along Vessel Diameter. J. Vis. Exp. (184), e64121, doi:10.3791/64121 (2022).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter