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Behavior

दर्दनाक मस्तिष्क की चोट के बाद वयस्क चूहों में प्रमुख-विनम्र व्यवहार का आकलन

Published: December 16, 2022 doi: 10.3791/64548
* These authors contributed equally

Summary

वर्तमान प्रोटोकॉल द्रव ताल-प्रेरित दर्दनाक मस्तिष्क की चोट के एक चूहे मॉडल का वर्णन करता है, जिसके बाद प्रमुख और विनम्र व्यवहार के विकास को समझने के लिए व्यवहार परीक्षणों की एक श्रृंखला होती है। विशिष्ट व्यवहार परीक्षणों के साथ संयोजन में दर्दनाक मस्तिष्क की चोट के इस मॉडल का उपयोग मस्तिष्क की चोट के बाद सामाजिक हानि के अध्ययन को सक्षम बनाता है।

Abstract

भोजन, क्षेत्र और साथी जैसे संसाधनों पर प्रतिस्पर्धा पशु प्रजातियों के भीतर संबंधों को महत्वपूर्ण रूप से प्रभावित करती है और सामाजिक पदानुक्रमों के माध्यम से मध्यस्थता की जाती है जो अक्सर प्रमुख-विनम्र संबंधों पर आधारित होते हैं। प्रमुख-विनम्र संबंध एक प्रजाति के व्यक्तियों के बीच एक सामान्य व्यवहार पैटर्न है। दर्दनाक मस्तिष्क की चोट सामाजिक संपर्क हानि और पशु जोड़े में प्रमुख-विनम्र संबंधों के पुनर्गठन का एक लगातार कारण है। यह प्रोटोकॉल वयस्क पुरुष स्प्राग-डॉवले चूहों में प्रेषण के बाद 29 दिनों से 33 दिनों के बीच किए गए प्रमुख-विनम्र परीक्षणों की एक श्रृंखला के माध्यम से भोले चूहों की तुलना में द्रव-पर्क्यूशन मॉडल का उपयोग करके दर्दनाक मस्तिष्क की चोट के प्रेरण के बाद विनम्र व्यवहार का वर्णन करता है। प्रमुख-विनम्र व्यवहार परीक्षण से पता चलता है कि मस्तिष्क की चोट भोजन के लिए प्रतिस्पर्धा करने वाले जानवरों में विनम्र व्यवहार को कैसे प्रेरित कर सकती है। दर्दनाक मस्तिष्क की चोट के बाद, कृन्तक अधिक विनम्र थे, जैसा कि उनके फीडर पर कम समय बिताने और नियंत्रण जानवरों की तुलना में गर्त में पहले पहुंचने की संभावना कम होने से संकेत मिलता है। इस प्रोटोकॉल के अनुसार, वयस्क पुरुष चूहों में दर्दनाक मस्तिष्क की चोट के बाद विनम्र व्यवहार विकसित होता है।

Introduction

अंतर-प्रजाति प्रतियोगिता तब होती है जब एक ही प्रजाति के सदस्य एकही समय में एक सीमित संसाधन के लिए प्रतिस्पर्धा करते हैं। इसके विपरीत, अंतर-प्रजाति प्रतियोगिता दो अलग-अलग प्रजातियों के सदस्यों के बीच होतीहै। अंतर-प्रजाति प्रतियोगिता को दो प्रकारों में विभाजित किया गया है, जिसमें हस्तक्षेप (अनुकूलित) और शोषण (प्रतियोगिता) शामिल है, और विवाद में संसाधन के प्रकार के आधार पर उत्पन्न होता है, जैसे कि भोजन और क्षेत्र3

सामाजिक पदानुक्रम ों का अस्तित्व प्रमुख-विनम्र संबंधों (डीएसआर) के बिना असंभव है। प्रभुत्वजानवरों के जोड़े के भीतर "जीतने" और अधीनता को "हारने" के रूप में प्रस्तुत करता है। हालांकि, डीएसआर न केवल जोड़े में बल्कि तीन या अधिक के समूहों में भी दिखाई देते हैं। 1922 में, थोरलीफ श्जेल्डरप-एबे ने घरेलू मुर्गियों में प्रभुत्व पदानुक्रम का वर्णन किया। प्रमुख और अधीनस्थ जानवरों के बीच प्रमुख विशिष्ट संकेत फीडर और आक्रामक व्यवहार में बिताया गया समय था। प्रभुत्व पदानुक्रम को दो रूपों में विभाजित किया गया है: रैखिक और गैर-रेखीय5। रैखिक प्रभुत्व में दो समूह शामिल हैं, ए और बी। सकर्मक संबंधों के इस प्रतिमान6 में, समूह A समूह B पर हावी है, या समूह B समूह A पर हावी है। नॉनलाइनियर प्रभुत्व तब होता है जब कम से कम एक गोलाकार संबंध होता है: A, B C पर हावी होता है, और C, A7 पर हावी होता है।

प्रमुख-विनम्र व्यवहार का आकलन करने के लिए मॉडल विभिन्न प्रजातियों के लिए मौजूद हैं, जिनमें कृन्तक, पक्षी8, गैर-मानव प्राइमेट्स 9,10,11 और मनुष्य 12 शामिल हैं। प्रमुख-विनम्र विधि को साहित्य में अच्छी तरह से दर्शाया गया है और उन्माद और अवसाद13, साथ ही एंटीडिप्रेसेंट दवा गतिविधि14 का आकलन करने के लिए एक मॉडल के रूप में लागू किया गया है। इस मॉडल का उपयोग वयस्क चूहों15 में मातृ अलगाव के बाद प्रारंभिक जीवन तनाव की जांच करने के लिए किया गया है। डीएसआर प्रतिमानों को तीन मॉडलों में विभाजित किया जा सकता है: प्रमुख व्यवहार मॉडल 13,16 की कमी, विनम्र व्यवहार मॉडल14 की कमी, और प्रभुत्व मॉडल17 का क्लोनिडाइन-रिवर्सल।

यह अध्ययन खाद्य प्रतियोगिता के आधार पर कार्यों के माध्यम से डीएसआर की जांच को प्रदर्शित करता है। इस विधि के फायदे इसकी आसान प्रजनन क्षमता और प्रमुख-विनम्र व्यवहार का निरीक्षण और सटीक विश्लेषण करने की क्षमता है। इसके अलावा, प्रमुख-विनम्र व्यवहार कार्य तुलनीय व्यवहार कार्यों के विपरीत, क्षेत्र के बजाय भोजन पर निर्भर करता है, जो इस व्यवहार कार्य को कम लागत और सरल बनाता है और शोधकर्ताओं को कार्य करने और डेटा को संसाधित करने के लिए जटिल प्रशिक्षण से गुजरने की आवश्यकता नहीं होती है।

वर्तमान अध्ययन का समग्र लक्ष्य दर्दनाक मस्तिष्क की चोट (टीबीआई) के बाद डीएसआर के विकास को प्रदर्शित करना है। टीबीआई सामाजिक हानि, अवसाद और चिंता से जुड़ा हुआ है। टीबीआई को प्रेरित करने का मॉडल एक सरल और प्रभावी मानक मॉडल है जिसमें द्रव ताल उपकरण18,19 के साथ दर्दनाक मस्तिष्क की चोट को प्रेरित करना शामिल है।

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Protocol

प्रयोगों को नेगेव के बेन-गुरियन विश्वविद्यालय की पशु देखभाल समिति द्वारा अनुमोदित किया गया था। हेलसिंकी और टोक्यो की घोषणाओं की सिफारिशों और यूरोपीय समुदाय के प्रयोगशाला जानवरों की देखभाल और उपयोग के लिए दिशानिर्देशों के बाद प्रयोग किए गए थे। वर्तमान अध्ययन में 300-350 ग्राम वजन वाले वयस्क नर स्प्राग-डॉवले चूहों का उपयोग किया गया था। जानवरों को 22 डिग्री सेल्सियस ± 1 डिग्री सेल्सियस के कमरे के तापमान और हल्के-अंधेरे चक्रों के साथ 40% -60% की आर्द्रता पर रखा गया था।

1. पशु तैयारी

  1. यादृच्छिक 30 वयस्क नर चूहों का चयन करें, और उन्हें दो समूहों में विभाजित करें: टीबीआई और शाम।
  2. चाउ ( सामग्री की तालिका देखें) और पानी एड लिबिटम प्रदान करें।
    नोट: व्यवहार प्रदर्शन पर दिन के समय के प्रभाव को नियंत्रित करने के लिए एक ही समय में परीक्षण के सभी चरणों का पालन करें। सामान्य गतिविधि से अशांति से बचने के लिए सुबह (सुबह 6:00 बजे से 12:00 बजे के बीच) व्यवहार परीक्षण करना सबसे अच्छा है।
  3. चूहों के दोनों समूहों में चोट से पहले न्यूरोलॉजिकल गंभीरता स्कोर का आधारभूत आकलन करें, जैसा कि चरण 3 और तालिका 1 में विस्तृत है।
  4. चूहों को 4% (प्रेरण के लिए) और 1.5% (रखरखाव के लिए) आइसोफ्लुरेन के साथ एनेस्थेटाइज करें। इंजेक्शन ब्यूप्रेनोर्फिन (0.05-0.1 मिलीग्राम / एससी) प्रीमेप्टिव एनाल्जेसिया के लिए।
  5. उत्तेजक के जवाब में आंदोलन या पेडल रिफ्लेक्स की कमी के लिए परीक्षण करके चूहे के स्थिरीकरण की जांच करें।
    नोट: संज्ञाहरण प्रशासन के लिए, आइसोफ्लुरेन के निरंतर प्रवाह की सिफारिश की जाती है।

2. शल्य चिकित्सा प्रक्रिया

नोट: सभी प्रक्रियाओं को सड़न रोकनेवाली स्थितियों में किया जाना है। बाँझ दस्ताने का उपयोग करें। यदि किसी गैर-बाँझ सतह को छुआ जाता है तो दस्ताने बदलें। सूखने से बचाने के लिए दोनों आंखों पर नेत्र स्नेहक लागू करें। पैरा-फ्लूइड-पर्क्यूशन चोट पहले प्रकाशित रिपोर्ट18,20 के बाद की गई थी।

  1. 0.5% बूपिवैकेन के साथ खोपड़ी में घुसपैठ करें ( सामग्री की तालिका देखें), 10 मिमी चीरा करें, और ऊतकों को पार्श्व रूप से वापस लें।
  2. क्रैनियोटॉमी18,20 4 मिमी पीछे और ब्रेग्मा के 4 मिमी पार्श्व का प्रदर्शन करें।
    नोट: सर्जिकल क्षेत्र को आयोडीन-आधारित या क्लोरहेक्सिडाइन-आधारित स्क्रब और अल्कोहल दोनों के साथ परिपत्र गति में कई बार कीटाणुरहित किया जाना चाहिए।
  3. तीन-तरफा स्टॉपकॉक के माध्यम से 21-23 एमएस से अधिक तरल-ताल उपकरण (सामग्री की तालिका देखें) द्वारा टीबीआई18,19 को प्रेरित करें।
    नोट: 2.5 एटीएम के आयाम के साथ मध्यम टीबीआई करें।
  4. शाम-संचालित चूहों के समूह पर क्रैनियोटॉमी करें (चित्रा 1)। दिखावटी संचालित समूह के लिए टीबीआई को प्रेरित न करें।
  5. घाव को बंद करने से पहले 0.1% बुपिवैकेन घुसपैठ करें। आइसोफ्लुरेन को वापस लेने से पहले पोस्टऑपरेटिव एनाल्जेसिया के रूप में इंट्रामस्क्युलर ब्यूप्रेनोर्फिन (0.01-0.05 मिलीग्राम / किग्रा) का प्रशासन करें।
    नोट: कम से कम 48 घंटे के लिए हर 12 घंटे में ब्यूप्रेनोर्फिन की खुराक दोहराएं।
  6. चूहे को रिकवरी रूम में स्थानांतरित करें, और 24 घंटे के लिए उसके श्वसन (जैसे, श्वसन गिरफ्तारी), न्यूरोलॉजिकल (जैसे, पक्षाघात), और कार्डियोवैस्कुलर स्थिति (जैसे, पुतलियों के रंग में परिवर्तन, नरम ऊतक छिड़काव में कमी, और ब्रैडीकार्डिया) की निगरानी करें।

3. न्यूरोलॉजिकल गंभीरता स्कोर मूल्यांकन

नोट: व्यवहार परिवर्तन और मोटर फ़ंक्शन के लिए उच्चतम संभव स्कोर 24 अंक है। 0 का स्कोर बरकरार न्यूरोलॉजिकल स्थिति का प्रतिनिधित्व करता है, और 24 का स्कोर गंभीर न्यूरोलॉजिकल डिसफंक्शन21,22,23 (तालिका 1) का प्रतिनिधित्व करता है।

  1. न्यूरोलॉजिकल गंभीरता स्कोर (एनएसएस) का मूल्यांकन करें जैसा कि पहले टीबीआई पर24 वर्णित था और सर्जरी से पहले शाम चूहों पर, सर्जरी के 48 घंटे बाद (चित्रा 2 ए), और सर्जरी के बाद 28 वें दिन (चित्रा 2 बी)।

4. प्रमुख-विनम्र व्यवहार का अध्ययन करना

  1. परीक्षण से 1 सप्ताह पहले चूहों को यादृच्छिक रूप से पिंजरों में विभाजित करें।
    नोट: प्रत्येक पिंजरे में एक शाम-संचालित चूहा और एक टीबीआई चूहा होना चाहिए।
  2. परीक्षण से पहले 2 दिनों के लिए हर दिन एक 15 मिनट का सत्र करें ताकि चूहे प्रोटोकॉल का पालन कर सकें।
    नोट: प्रमुख-विनम्र कार्य चोट के बाद 29 वें दिन शुरू किया गया था (चित्रा 1)।
  3. एक उपकरण (सामग्री की तालिका देखें) का उपयोग करें जो दो पारदर्शी ऐक्रेलिक ग्लास बॉक्स (30 सेमी x 20 सेमी x 20 सेमी, बॉक्स ए और बॉक्स बी, चित्रा 3) से बना है, जो एक पतला 15 सेमी x 15 सेमी x 60 सेमी सुरंग 15,19,25 से जुड़ा हुआ है।
  4. मीठे दूध के साथ एक फीडर (चित्रा 3) भरें, और इसे सुरंग के केंद्र में रखें। 10% चीनी और 3% वसा युक्त दूध का उपयोग करें।
  5. उपकरण को फर्श से 80 सेमी की ऊंचाई के साथ एक मेज पर रखें।
  6. पहले 2 दिनों में आदत के लिए प्रत्येक चूहे को 15 मिनट के लिए उपकरण में रखें। 2 आदत दिनों के बाद कार्य शुरू करें।
  7. यादृच्छिक रूप से नियंत्रण समूह से एक चूहे और दर्दनाक मस्तिष्क की चोट (टीबीआई) समूह से एक का चयन करें, और उन्हें फीडर से समान दूरी पर सेट करें, जिससे उन्हें 5 मिनट के लिए पता लगाने की अनुमति मिल सके।
  8. चूहों को पानी के एड लिबिटम तक पहुंच की अनुमति दें।
    नोट: कार्य 5 दिनों तक चला। पूरे कार्य अवधि के लिए भोजन प्रतिबंध किया गया था। परीक्षण अवधि के बाद 1 घंटे के लिए हर दिन भोजन दिया जाता था।
  9. अन्य चूहों के साथ बाद के परीक्षण करने से पहले उपकरण को 5% अल्कोहल के साथ साफ करें।
    नोट: उपकरण की सफाई पिछले चूहों की गंध को खत्म कर देगी। उचित वायु परिसंचरण वाले कमरे में परीक्षण करें।

5. वीडियो और डेटा विश्लेषण रिकॉर्ड करना

  1. एक कैमरा रखें, और डेटा को कैप्चर करने, सहेजने और संसाधित करने के लिए अनुशंसित कंप्यूटर सॉफ़्टवेयर ( सामग्री तालिका देखें) स्थापित करें।
    नोट: कैमरे को फर्श से 290 सेमी की ऊंचाई पर स्थापित करने की आवश्यकता है।
  2. चूहों के अखाड़े में होने के दौरान वीडियो रिकॉर्ड करें।
    नोट: कैमरा और उपकरण 210 सेमी अलग स्थित थे। क्षेत्र का वह हिस्सा जहां परीक्षण आयोजित किया जाता है, कैमरा फ्रेम में दिखाई देना चाहिए।
  3. समूहों में अंधे दो विश्लेषकोंद्वारा मैन्युअल रूप से डेटा विश्लेषण करें।

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Representative Results

न्यूरोलॉजिकल गंभीरता स्कोर मूल्यांकन
एनएसएस का उपयोग करके टीबीआई के बाद पुरुष चूहों में न्यूरोलॉजिकल घाटे का आकलन किया गया था। चूहों को दो समूहों में विभाजित किया गया था: एक टीबीआई समूह और एक नियंत्रण समूह। नियंत्रण समूह को दिखावटी सर्जरी के अधीन किया गया था। एनएसएस ने एक अंक प्रणाली22,23 द्वारा मोटर फ़ंक्शन और व्यवहार परिवर्तन के मूल्यांकन के लिए अनुमति दी; 24 का स्कोर एक गंभीर न्यूरोलॉजिकल डिसफंक्शन का संकेत देता है, और 0 का स्कोर बरकरार न्यूरोलॉजिकल स्थिति का प्रतिनिधित्व करता है। टीबीआई और शाम-संचालित समूहों के बीच सर्जरी से पहले 1 घंटे में न्यूरोलॉजिकल घाटे में कोई महत्वपूर्ण अंतर नहीं था। सर्जरी के बाद 48 घंटे में न्यूरोलॉजिकल घाटे टीबीआई चूहों के लिए शाम-संचालित चूहों की तुलना में पर्याप्त रूप से अधिक थे (5-7, औसत: 6 बनाम 0-0, औसत: 0; U = 0, p < 0.01, r = 0.89) (चित्र 2A)। सर्जरी के 28 दिनों के बाद, टीबीआई और शाम-संचालित समूहों के बीच अंतर महत्वहीन थे (मैन-व्हिटनी यू परीक्षण19) (चित्रा 2 बी)।

प्रमुख-विनम्र व्यवहार मूल्यांकन।
सर्जरी के 30 दिन बाद नर वयस्क चूहों के प्रमुख-विनम्र व्यवहार का आकलन किया गया था। यह एनएसएस मूल्यांकन के बाद किया गया था ताकि यह सुनिश्चित किया जा सके कि कोई लोकोमोटर डिसफंक्शन नहीं था। प्रमुख-विनम्र कार्य खाद्य प्रतिस्पर्धा पर आधारित था और दो मुख्य मापदंडों के संदर्भ में मूल्यांकन किया गया था: फीडर पर बिताया गया समय और फीडर में पहले कौन आया। फीडर पर बिताया गया समय शाम संचालित चूहों की तुलना में टीबीआई चूहों के लिए काफी कम था (33.1 एस ± 8.7 एस बनाम 55.9 एस ± 21 एस, टी (28) = 3.14, पी < 0.01, डी = 1.15) (चित्रा 4 ए)। शाम-संचालित चूहों की तुलना में कम टीबीआई फीडर में पहले आया (15 में से 3 बनाम 15 में से 12, पी < 0.01, ची-स्क्वायर परीक्षण और फिशर के सटीक परीक्षण19 के अनुसार) (चित्र4 बी)।

Figure 1
चित्र 1: प्रोटोकॉल समयरेखा का प्रदर्शन। चूहों को दो समूहों में विभाजित किया गया था: शाम-संचालित और टीबीआई। टीबीआई और क्रैनियोटॉमी तब किया गया जब चूहे 3 महीने के हो गए। प्रयोग की शुरुआत से पहले, सर्जरी के बाद 48 घंटे और सर्जरी के बाद 28 वें दिन टीबीआई और शाम चूहों के लिए एनएसएस स्कोर मापा गया था। प्रमुख-विनम्र व्यवहार का आकलन सर्जरी के बाद दिन 29 और दिन 33 (कुल 5 दिनों के लिए) के बीच किया गया था। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.

Figure 2
चित्रा 2: न्यूरोलॉजिकल गंभीरता स्कोर मूल्यांकन। सर्जरी के बाद () 48 घंटे और (बी) 28 दिनों में न्यूरोलॉजिकल गंभीरता स्कोर का आकलन, टीबीआई समूह की तुलना नियंत्रण समूह से करना। () के लिए पी < 0.01, मान-व्हिटनी यू परीक्षण द्वारा निर्धारित। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.

Figure 3
चित्रा 3: डीएसआर व्यवहार मूल्यांकन के लिए उपकरण। दो पारदर्शी ऐक्रेलिक ग्लास बॉक्स (30 सेमी x 20 सेमी x 20 सेमी, बॉक्स ए और बॉक्स बी) से बना एक उपकरण जो सुरंग के केंद्र में एक फीडर के साथ एक पतली 15 सेमी x 15 सेमी x 60 सेमी सुरंग से जुड़ा हुआ है। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.

Figure 4
चित्रा 4: प्रमुख-विनम्र व्यवहार मूल्यांकन। प्रमुख-विनम्र व्यवहार का आकलन सर्जरी के बाद 33 वें दिन किया गया था, टीबीआई चूहों की तुलना शाम-संचालित नियंत्रण चूहों से की गई थी। () फीडर पर बिताया गया समय और (बी) फीडर पर पहले आने वाले चूहे को दिखाया गया है। () के लिए पी < 0.01, एक टी-टेस्ट द्वारा निर्धारित। पी < (बी) के लिए 0.01, ची-स्क्वायर परीक्षण और फिशर के सटीक परीक्षण द्वारा निर्धारित। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.

तालिका 1: न्यूरोलॉजिकल गंभीरता स्कोर मूल्यांकन के लिए स्कोरिंग और ग्रेडिंग सिस्टम। कृपया इस तालिका को डाउनलोड करने के लिए यहाँ क्लिक करें।

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Discussion

नैदानिक अध्ययनों से संकेत मिलता है कि मस्तिष्क की चोट से मनोवैज्ञानिक विकारों का खतराबढ़ सकता है 26,27. इसके अलावा, टीबीआई सामाजिक व्यवहार28,29 के विकास को प्रभावित करता है। इस प्रोटोकॉल में, टीबीआई मॉडल का प्रमुख-विनम्र व्यवहार की प्रस्तुति पर प्रभाव पड़ा। प्रमुख-विनम्र व्यवहार फीडर पर बिताए गए समय के संदर्भ में प्रकट हुआ और फीडर में कौन पहले आया।

यहां किए गए व्यवहार कार्य के अलावा, प्रमुख-विनम्र संबंधों के मूल्यांकन के लिए अन्य कार्य मौजूद हैं, जैसे कि निवासी-घुसपैठिया प्रतिमान30,31 या खाद्य स्थिति के लिए जटिल डाइविंग32,33,34 इनमें से प्रत्येक कार्य सामाजिक व्यवहार के एक अलग पहलू को लक्षित करता है। निवासी-घुसपैठिया प्रतिमान आक्रामक आक्रामकता, रक्षात्मक व्यवहार और सामाजिक तनाव को मापने के लिए उपयुक्त है, और खाद्य स्थिति के लिए जटिल डाइविंग सामाजिक पदानुक्रम का अध्ययन करने के लिए अधिक उपयुक्त है। डीएसआर का आकलन करने के लिए प्रमुख-विनम्र कार्य सबसे उपयुक्त है।

उपकरण के आयाम कृन्तकों के आकार पर निर्भर करते हैं। उपकरण में दो प्लेक्सीग्लास कक्ष और उन्हें जोड़ने वाली एक सुरंग होनी चाहिए। केंद्र में मीठे दूध के साथ एक फीडर है। चूहों35 के लिए, कक्षों और सुरंग के आयाम क्रमशः 24 सेमी x 17 सेमी x 14 सेमी और 4.5 सेमी x 4.5 सेमी x 52 सेमी हैं। प्रारंभिक जीवन तनाव 32 के बाद डीएसआर के आकलन के लिए, उपकरण के आयाम कक्षों के लिए30 सेमी x 20 सेमी x 20 सेमी और सुरंग के लिए 15 सेमी x 15 सेमी x 60 सेमी हैं। चूहों36 के लिए उपकरण के आयाम क्रमशः कक्षों और सुरंग के लिए 12 सेमी x 8.5 सेमी x 7 सेमी और 2.5 सेमी x 2.5 सेमी x 27 सेमी हैं।

इस प्रोटोकॉल में कुछ महत्वपूर्ण कदम हैं। प्रमुख-विनम्र कार्य के लिए, अल्कोहल समाधान के साथ प्रत्येक बाद के परीक्षण के बाद उपकरण को साफ करना आवश्यक है। उसी समय, अखाड़े की सतह सूखी और साफ होनी चाहिए क्योंकि पिछले जानवरों से कोई भी अवशिष्ट गंध प्रयोगात्मक जानवरों के व्यवहार को प्रभावित कर सकती है। निरंतर वेंटिलेशन और शोर की अनुपस्थिति अनावश्यक तनाव कारकों से बचने के लिए कमरे में आवश्यक स्थितियां हैं जो व्यवहार पैटर्न को प्रभावित कर सकती हैं। फीडर में दूध को प्रत्येक व्यवहार सत्र के बाद प्रतिस्थापित किया जाना चाहिए। व्यवहार परीक्षण अंधेरे चरण के दौरान किए जाने हैं, और उच्च-रिज़ॉल्यूशन गुणवत्ता वाले कैमरे का उपयोग करके फिल्मांकन छवियों को अंधेरे में कैप्चर करने में सक्षम होगा।

इस अध्ययन की सीमाओं में समूहों के छोटे आकार, केवल एनएसएस द्वारा लोकोमोटर गतिविधि का आकलन और डेटा में वजन शामिल नहीं है। भविष्य के अध्ययनों में खुले क्षेत्र और / या ऊंचा प्लस भूलभुलैया परीक्षणों द्वारा लोकोमोटर फ़ंक्शन मूल्यांकन भी शामिल हो सकता है।

सर्जरी के बाद 48 घंटे में न्यूरोलॉजिकल घाटे टीबीआई चूहों के लिए शाम-संचालित चूहों की तुलना में उल्लेखनीय रूप से अधिक थे। चोट के 48 घंटे बाद, महत्वपूर्ण न्यूरोलॉजिकल घाटे थे, जो महत्वपूर्ण क्षति का संकेत देते थे। जब चोट के बाद 28 वें दिन चूहों पर एक न्यूरोलॉजिकल मूल्यांकन किया गया था, तो शाम चूहों और टीबीआई चूहों के बीच कोई महत्वपूर्ण अंतर नहीं था; इसलिए, घायल समूह का विनम्र व्यवहार बिगड़ा न्यूरोलॉजिकल स्थिति के कारण नहीं था। लोकोमोटर गतिविधि प्रभावित नहीं हुई थी और प्रमुख-विनम्र व्यवहार को प्रभावित नहीं किया था। फीडर पर बिताया गया समय शाम संचालित चूहों की तुलना में टीबीआई चूहों के लिए काफी कम था। शाम-संचालित चूहों की तुलना में कम टीबीआई चूहे फीडर में पहले आए (चित्रा 4 ए)। वर्तमान अध्ययन के प्रमुख निष्कर्षों ने टीबीआई के बाद चूहों में विनम्र व्यवहार और शाम-संचालित चूहों में प्रमुख व्यवहार का संकेत दिया। टीबीआई चूहों ने दो मापदंडों पर विनम्र व्यवहार का प्रदर्शन किया: फीडर पर बिताया गया समय और फीडर में पहले कौन आया।

सारांश में, इस अध्ययन की मुख्य खोज यह थी कि वयस्क चूहों में टीबीआई 1 महीने के बाद विनम्र व्यवहार की ओर जाता है। यह अनुमान लगाया गया है कि यह शोध टीबीआई के बाद सामाजिक व्यवहार को समझने और आकलन करने की हमारी क्षमता का विस्तार करेगा। भविष्य के अध्ययनों से पिछले मस्तिष्क की चोट की उपस्थिति के भविष्यवक्ता के रूप में विनम्र व्यवहार के लक्षण की जांच करने की उम्मीद है।

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Disclosures

लेखकों के पास खुलासा करने के लिए कुछ भी नहीं है।

Acknowledgments

किए गए काम दिमित्री फ्रैंक की पीएचडी थीसिस का हिस्सा हैं।

Materials

Name Company Catalog Number Comments
2% chlorhexidine in 70% alcohol solution SIGMA - ALDRICH 500 cc For general antisepsis of the skin in the operatory field
4 boards of different thicknesses (1.5 cm, 2.5 cm, 5 cm and 8.5 cm) This is to evaluate neurological defect
4-0 Nylon suture 4-00
Bottles Techniplast ACBT0262SU
Bupivacaine 0.1 %
Diamond Hole Saw Drill 3 mm diameter Glass Hole Saw Kit Optional.
Digital Weighing Scale SIGMA - ALDRICH Rs 4,000
Dissecting scissors SIGMA - ALDRICH Z265969
Ethanol 99.9 % Pharmacy 5%-10% solution used to clean equipment and remove odors
Fluid-percussion device custom-made at the university workshop No specific brand is recommended.
Gauze Sponges Fisher
Gloves (thin laboratory gloves) Optional.
Heater with thermometer Heatingpad-1 Model: HEATINGPAD-1/2 No specific brand is recommended.
Horizon-XL Mennen Medical Ltd
Isofluran, USP 100% Piramamal Critical Care, Inc NDC 66794-017 Anesthetic liquid for inhalation
Logitech Webcam Software Logitech 2.51 Software for video camera
Operating forceps SIGMA - ALDRICH
Operating Scissors SIGMA - ALDRICH
PC Computer for USV recording and data analyses Intel Intel core i5-6500 CPU @ 3.2GHz, 16 GB RAM, 64-bit operating system
Plexiglass boxes linked by a narrow passage Two transparent 30 cm × 20 cm × 20 cm plexiglass boxes linked by a narrow 15 cm × 15 cm × 60 cm passage
Purina Chow Purina 5001 Rodent laboratory chow given to rats,  is a lifecycle nutrition that has been used in biomedical research
Rat cages (rat home cage or another enclosure) Techniplast 2000P No specific brand is recommended
Scalpel blades 11 SIGMA - ALDRICH S2771
SPSS SPSS Inc., Chicago, IL, USA A 20 package
Stereotaxic Instrument custom-made at the university workshop No specific brand is recommended
Timing device Interval Timer:Timing for recording USV's Optional. Any timer will do, although it is convenient to use an interval timer if you are tickling multiple rats
Video camera Logitech C920 HD PRO WEBCAM Digital video camera for high definition recording of rat behavior under dominant submissive test

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

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Frank, D., Gruenbaum, B. F., Semyonov, M., Binyamin, Y., Severynovska, O., Gal, R., Frenkel, A., Knazer, B., Boyko, M., Zlotnik, A. Assessing Dominant-Submissive Behavior in Adult Rats Following Traumatic Brain Injury. J. Vis. Exp. (190), e64548, doi:10.3791/64548 (2022).

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