JoVE Journal > Bioengineering
Summary
Abstract
Introduction
Protocol
Results
Discussion
Disclosures
Acknowledgements
Materials
References
Automatic Translation
Bioengineering

Mekano-node-pore-sensing: En rask, etikettfri plattform for enkeltcellede viskoelastiske målinger med flere parametere

Published: December 02, 2022
doi:
10.3791/64665
, , , , ,
1Graduate Program in Bioengineering,University of California, Berkeley and University of California, San Francisco, 2Department of Mechanical Engineering,University of California, Berkeley, 3Department of Electrical Engineering and Computer Sciences,University of California, Berkeley

Summary

Presentert her er en metode for å mekanisk fenotype enkeltceller ved hjelp av en elektronikkbasert mikrofluidisk plattform kalt mekano-node-pore sensing (mekano-NPS). Denne plattformen opprettholder moderat gjennomstrømning av 1-10 celler / s mens den måler både de elastiske og viskøse biofysiske egenskapene til celler.

Abstract

Cellulære mekaniske egenskaper er involvert i et bredt spekter av biologiske prosesser og sykdommer, alt fra stamcelledifferensiering til kreftmetastase. Konvensjonelle metoder for å måle disse egenskapene, for eksempel atomkraftmikroskopi (AFM) og mikropipette aspirasjon (MA), fanger rik informasjon, som reflekterer cellens fulle viskoelastiske respons; Imidlertid er disse metodene begrenset av svært lav gjennomstrømning. Tilnærminger med høy gjennomstrømning, for eksempel sanntids deformabilitetscytometri (RT-DC), kan bare måle begrenset mekanisk informasjon, da de ofte er begrenset til enkeltparameteravlesninger som bare gjenspeiler cellens elastiske egenskaper. I motsetning til disse metodene er mekano-node-pore-sensing (mekano-NPS) en fleksibel, etikettfri mikrofluidisk plattform som bygger bro over gapet i å oppnå multiparameter viskoelastiske målinger av en celle med moderat gjennomstrømning. En likestrømsmåling (DC) brukes til å overvåke celler når de passerer en mikrofluidisk kanal, og sporer størrelsen og hastigheten før, under og etter at de blir tvunget gjennom en smal innsnevring. Denne informasjonen (dvs. størrelse og hastighet) brukes til å kvantifisere hver celles tverrgående deformasjon, motstand mot deformasjon og gjenoppretting fra deformasjon. Generelt gir denne elektronikkbaserte mikrofluidiske plattformen flere viskoelastiske celleegenskaper, og dermed et mer komplett bilde av cellens mekaniske tilstand. Fordi det krever minimal prøvepreparering, bruker en enkel elektronisk måling (i motsetning til et høyhastighetskamera), og drar nytte av standard myk litografifabrikasjon, er implementeringen av denne plattformen enkel, tilgjengelig og tilpasningsdyktig til nedstrømsanalyse. Denne plattformens fleksibilitet, nytte og følsomhet har gitt unik mekanisk informasjon om et mangfoldig utvalg av celler, med potensial for mange flere applikasjoner innen grunnleggende vitenskap og klinisk diagnostikk.

Introduction

Enkeltceller er dynamiske, viskoelastiske materialer1. En rekke interne og eksterne prosesser (f.eks. Utbruddet av mitose eller ombygging av den ekstracellulære matrisen [ECM]), påvirker deres struktur og sammensetning 2,3,4, noe som ofte resulterer i distinkte biofysiske egenskaper som utfyller deres nåværende tilstand. Spesielt har mekaniske egenskaper vist seg å være viktige biomarkører for cellulær utvikling, fysiologi og patologi, noe som gir verdifull kvantitativ informasjon som kan supplere kanoniske molekylære og genetiske tilnærminger 5,6,7. For eksempel beskrev Li og medarbeidere nylig de mekaniske forskjellene mellom medikamentresistente og medikamentresponsive akutte promyelocytiske leukemiceller, samtidig som de brukte RNA-seq for å avdekke differensielt uttrykte cytoskjelettassosierte gener8. Ved å forstå det komplekse samspillet mellom encellemekanikk og cellulær funksjon, har mekanofenofontyping bredere anvendelser i å transformere grunnleggende vitenskap og klinisk diagnostikk9.

Det mest brukte verktøyet for måling av encellemekanikk er atomkraftmikroskopi (AFM). Mens AFM muliggjør en høyoppløselig, lokalisert måling av cellulære mekaniske egenskaper, forblir den begrenset til en gjennomstrømning på <0,01 celler / s10. Alternativt er optiske bårer, som bruker to divergerende laserstråler for å fange og deformere suspenderte enkeltceller11, begrenset til marginalt høyere gjennomstrømning av <1 celle / s12. Nylige fremskritt innen mikrofluidisk teknologi har muliggjort en ny generasjon enheter for rask, encellet, mekanisk vurdering12,13. Disse teknikkene benytter smale innsnevringskanaler 14,15, skjærstrøm 16 eller hydrodynamisk strekking 17 for å deformere celler raskt ved gjennomstrømninger på 10-1000 celler / s 18. Selv om målehastigheten for disse tilnærmingene er betydelig raskere enn konvensjonelle teknikker, bytter de ofte høy gjennomstrømningsevne for begrensede mekaniske avlesninger (tilleggstabell 1). Alle de nevnte raske mikrofluidiske metodene fokuserer på grunnleggende enkeltparameterberegninger, for eksempel transittid eller deformabilitetsforhold, som bare gjenspeiler cellens elastiske egenskaper. Gitt den iboende viskoelastiske naturen til enkeltceller, krever en robust og grundig mekanisk karakterisering av celler imidlertid vurdering av ikke bare elastiske komponenter, men også viskøse responser.

Mekano-node-pore-sensing (mekano-NPS)2,8 (figur 1A) er en mikrofluidisk plattform som adresserer eksisterende begrensninger med encellet mekanofenotyping. Denne metoden muliggjør måling av flere biofysiske parametere samtidig, inkludert cellediameter, relativ deformabilitet og restitusjonstid fra deformasjon, med en moderat gjennomstrømning på 1-10 celler/s. Denne teknikken er basert på node-pore sensing (NPS) 19,20,21,22,23,24, som innebærer å bruke en firepunkts sondemåling for å måle den modulerte strømpulsen produsert av en celle som passerer en mikrofluidisk kanal som er segmentert av bredere regioner, referert til som “noder”. Den modulerte strømpulsen er et resultat av at cellen delvis blokkerer strømmen av strøm i segmentene (dvs. “porene”) og nodene, med mer strøm blokkert i førstnevnte enn i sistnevnte. I mekano-NPS er ett segment, “kontraksjonskanalen”, smalere enn en cellediameter; følgelig må en celle deformeres for å passere hele kanalen (figur 1B). Cellediameteren kan bestemmes av størrelsen på underpulsen som produseres når cellen passerer nodeporene før kontraksjonskanalen (figur 1B, C). Her er |ΔInp|, det nåværende fallet når cellen er i porene, proporsjonalt med volumforholdet mellom cellen og poren, V-celle/V-pore 2,8,19. Cellestivhet kan bestemmes av ΔTc, varigheten av den dramatisk større underpulsen som produseres når cellen passerer kontraksjonskanalen (figur 1B, C). En stivere celle vil ta lengre tid å passere kanalen enn en mykereen 2,8. Endelig kan celleutvinning, cellens evne til å gå tilbake til sin opprinnelige størrelse og form etter deformasjon, bestemmes av serien av underpulser produsert når cellen passerer nodeporene etter kontraksjonskanalen (figur 1B, C). Gjenopprettingstiden, ΔTr, er tiden det tar for de nåværende underpulsene å gå tilbake til størrelsen på de tidligere underpulsene, før cellen klemmes. Samlet sett registreres og analyseres de modulerte strømpulsene som produseres når en celle passerer den mikrofluidiske kanalen for å trekke ut de relevante enkeltcellede mekaniske parametrene (figur 1D) 2,8.

Reproduserbarheten og brukervennligheten til denne elektronikkbaserte mikrofluidiske plattformen har tidligere blitt demonstrert25. I tillegg presenterer plattformen en lav inngangsbarriere for encellet mekanofenotyping. Standard myk litografi brukes til å fremstille mikrofluidiske enheter. Målemaskinvaren består av billige komponenter, inkludert et enkelt kretskort (PCB), strømforsyning, forforsterker, datainnsamlingskort (DAQ) og datamaskin. Endelig er brukervennlig kode tilgjengelig for datainnsamling og analyse, noe som muliggjør enkel implementering. Denne mekanofenotypingsteknikken kan skille populasjoner av ikke-maligne og ondartede bryst- og lungeepitelcellelinjer, diskriminere mellom underlinjer i primære humane brystepitelceller, og karakterisere effekten av cytoskeletale forstyrrelser og andre farmakologiske midler 2,8. Samlet sett er denne plattformen en effektiv tilnærming for mekanofenotyping av enkeltceller.

Protocol

1. Design enhet geometri Velg bredden på størrelses- og gjenopprettingssegmentene slik at den er bredere enn diameteren til de største cellene som skal måles, men opprettholder også et tilstrekkelig signal-til-støy-forhold (SNR). Se supplerende tabell 2 for eksempler på ulike størrelses- og gjenopprettingssegmentbredder for ulike cellelinjer. Velg sammentrekningssegmentbredden for å bruke en 30% -40% belastning på den gjennomsnittlige størrelsen på cellene…

Representative Results

Mekanofenotypingsplattformen som presenteres her er en enkel og allsidig tilnærming for å måle de biofysiske egenskapene til enkeltceller med moderat gjennomstrømning. Celler strømmes gjennom den mikrofluidiske kanalen (figur 1A) ved hjelp av konstant trykkdrevet strømning. Når cellene transiterer, registreres lengden på den mikrofluidiske kanalen og de produserte pulser ved hjelp av datainnsamlingsmaskinvaren. Det oppkjøpte signalet (figur 1B, …

Discussion

Måling av de mekaniske egenskapene til enkeltceller ved hjelp av denne mekanofenotypingsteknikken består av tre trinn: enhetsfabrikasjon, datainnsamling og dataanalyse. Innenfor hvert trinn er det bemerkelsesverdige aspekter som kan påvirke de eksperimentelle resultatene betydelig. Under fabrikasjon av enheter er konsistente kanalgeometrier og enhetlighet fra enhet til enhet avgjørende for nøyaktige og repeterbare resultater. Spesielt bør sideveggene til hver enhet være relativt glatte (figur …

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Denne forskningen ble støttet av tilskudd fra NIBIB 1R01EB024989-01 og NCI 1R01CA190843-01. A. L. og R. R. ble støttet av en H2H8 Association Graduate Research Fellowship. K. L. C. ble støttet av et National Science Foundation Graduate Research Fellowship og et Siebel Scholar Fellowship.

Materials

Acetone J.T. Baker 5356-05 Purity (GC)  ≥ 99.5% (https://us.vwr.com/store/product/6057739/acetone-99-5-vlsi-j-t-baker)
Aluminum Foil n/a n/a
Analog Low-Pass Filter ThorLabs EF504 ≤240 kHz Passband, Coaxial BNC Feedthrough (https://www.thorlabs.com/thorproduct.cfm?partnumber=EF504#ad-image-0)
Biopsy Punch Integra Miltex 33-31AA-P/25 1mm, Disposable, with Plunger (https://mms.mckesson.com/product/573313/Miltex-33-31AA-P25)
Blade n/a n/a
BNC Cable Pomona Electronics 2249-C-12 https://www.digikey.com/en/products/detail/pomona-electronics/2249-C-12/603323?utm_adgroup=Coaxial%20Cables%20%28RF%29&utm_source=google&utm_
medium=cpc&utm_campaign=
Shopping_Product_Cable%20Assemblies_NEW&utm_term=
&utm_content=Coaxial%20Cables%20%28RF%29&gclid=Cj0KCQjwlK-WBhDjARIsAO2sErQqnVJ
pj5OXVObuTI8ZUf1ZeIn7zvzGnx
mCWdePrG6SdEJMF3X6ubUaAs
w-EALw_wcB
Cleanroom Polyester Swab Thermo Fisher Scientific 18383 https://www.fishersci.com/shop/products/texwipe-cleantip-alpha-polyester-series-swabs-6/18383
Current Preamplifier DL Instruments 1211 https://www.brltest.com/index.php?main_page=product_info&products_
id=1419
Custom PCB (w/ components) n/a n/a see Supplemental files 4 and 5
DAQ Terminal Block National Instruments BNC-2120 https://www.ni.com/en-in/support/model.bnc-2120.html
DAQ to BNC-2110 cable  National Instruments SHC68-68-EPM https://www.ni.com/en-in/support/model.shc68-68-epm.html
Data Acquisition Board (DAQ) National Instruments PCI-6251 https://www.ni.com/docs/en-US/bundle/pci-6251-feature/page/overview.html
Dessicator Thermo Fisher Scientific 5311-0250 https://www.thermofisher.com/order/catalog/product/5311-0250
Female BNC To Banana Plug Adapter Pomona Electronics 72909 https://www.digikey.com/en/products/detail/pomona-electronics/72909/1196318
Fetal Bovine Serum (FBS) VWR 89510-186 https://us.vwr.com/store/product/18706419/avantor-seradigm-select-grade-usda-approved-origin-fetal-bovine-serum-fbs
Glass Cutter Chemglass CG-1179-21 https://chemglass.com/plate-glass-cutters-diamond-tips
Gold Etchant TFA Transene NC0977944 https://www.fishersci.com/shop/products/NC0977944/NC0977944
Hot Plate Thermo Fisher Scientific SP131825 
Isopropyl Alcohol Spectrum Chemical I1056-4LTPL Purity (GC)  ≥99.5% (https://www.spectrumchemical.com/isopropyl-alcohol-99-percent-fcc-i1056)
Metal Hardware Enclosure Hammond Manufacturing EJ12126 https://www.digikey.com/en/products/detail/hammond-manufacturing/EJ12126/2423415
Methanol Sigma-Aldrich 34860 Purity (GC)  ≥99.8% (https://www.sigmaaldrich.com/IN/en/substance/methanol320467561)
MF-321 Developer Kayaku Advanced Materials n/a https://kayakuam.com/products/mf-321/
MICROPOSIT S1813 Positive Photoresist DuPont n/a https://kayakuam.com/products/microposit-s1800-g2-series-photoresists/
Phosphate Buffered Saline (PBS) Thermo Fisher Scientific 10010049 https://www.thermofisher.com/order/catalog/product/10010049?SID=srch-hj-10010049
Photomask Fineline Imaging n/a Photomask are custom ordered from our CAD designs (https://www.fineline-imaging.com/)
Plain Glass Microscope Slide Fisher Scientific 12-553-5B Material: Soda Lime, L75 x W50 mm, Thickness: 0.90–1.10 mm 
Plasma Cleaner Harrick Plasma PDC-001 https://harrickplasma.com/plasma-cleaners/expanded-plasma-cleaner/
Plastic Petri Dish Thermo Fisher Scientific FB0875712 100 mm (https://www.fishersci.com/shop/products/fisherbrand-petri-dishes-clear-lid-raised-ridge-100-x-15mm/FB0875712)
Pressure Controller Fluigent MFCS-EZ https://www.fluigent.com/research/instruments/pressure-flow-controllers/mfcs-series/
Pressure Controller Software Fluigent MAESFLO
Programming & Computation Software MATLAB R2021b for data acquisition and analysis (https://www.mathworks.com/products/matlab.html)
PTFE Tubing Cole Parmer 06417-31 0.032" ID x 0.056" (https://www.coleparmer.com/i/masterflex-transfer-tubing-microbore-ptfe-0-032-id-x-0-056-od-100-ft-roll/0641731)
Scepter 2.0 Handheld Automatic Cell Counter Millapore Sigma PHCC20060 https://www.sigmaaldrich.com/IN/en/product/mm/phcc20060
Silicon Wafer Wafer World 2885 76.2 mm, Single Side Polished (https://www.waferworld.com/product/2885)
Spin Coater n/a n/a
SU-8 3025 Negative Photoresist Kayaku Advanced Materials n/a https://kayakuam.com/products/su-8-2000/
SU8 Developer Kayaku Advanced Materials n/a https://kayakuam.com/products/su-8-developer/
Sygard 184 Polydimethlysiloxane Dow Chemical 4019862 https://www.ellsworth.com/products/by-market/consumer-products/encapsulants/silicone/dow-sylgard-184-silicone-encapsulant-clear-0.5-kg-kit/
Tape Scotch 810-341296 https://www.staples.com/Scotch-Magic-Tape-810-3-4-x-36-yds-1-Core/product_130567?cid=PS:GS:SBD:PLA:OS&gclid=
Cj0KCQjwlK-WBhDjARIsAO
2sErRwzrrgjU0NjFkDkne1xm
vT7ekS3tdzvAgiMDwPoxocgH
VTQZi7vJgaAvQZEALw_wcB
Titanium, Platinum, Gold n/a n/a
Triple Output Power Supply Keysight E36311A https://www.newark.com/keysight-technologies/e36311a/dc-power-supply-3o-p-6v-5a-prog/dp/15AC9653
UV Mask Aligner Karl Suss America MJB3 Mask Aligner 
DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Pegoraro, A. F., Janmey, P., Weitz, D. A. Mechanical properties of the cytoskeleton and cells. Cold Spring Harbor Perspectives in Biology. 9 (11), 022038 (2017).
  2. Kim, J., et al. Characterizing cellular mechanical phenotypes with mechano-node-pore sensing. Microsystems & Nanoengineering. 4, 17091 (2018).
  3. Mierke, C. T. Bidirectional mechanical response between cells and their microenvironment. Frontiers in Physics. 9, 619 (2021).
  4. Kumar, S., Weaver, V. M. Mechanics, malignancy, and metastasis: The force journey of a tumor cell. Cancer and Metastasis Reviews. 28 (1), 113-127 (2009).
  5. Nia, H. T., Munn, L. L., Jain, R. K. Physical traits of cancer. Science. 370 (6516), (2020).
  6. Fletcher, D. A., Mullins, R. D. Cell mechanics and the cytoskeleton. Nature. 463 (7280), 485-492 (2010).
  7. Wirtz, D., Konstantopoulos, K., Searson, P. C. The physics of cancer: The role of physical interactions and mechanical forces in metastasis. Nature Reviews Cancer. 11 (7), 512-522 (2011).
  8. Li, B., et al. Mechanical phenotyping reveals unique biomechanical responses in retinoic acid-resistant acute promyelocytic leukemia. iScience. 25 (2), 103772 (2022).
  9. Kozminsky, M., Sohn, L. L. The promise of single-cell mechanophenotyping for clinical applications. Biomicrofluidics. 14 (3), 031301 (2020).
  10. Li, M., Dang, D., Liu, L., Xi, N., Wang, Y. Atomic force microscopy in characterizing cell mechanics for biomedical applications: A review. IEEE Transactions on Nanobioscience. 16 (6), 523-540 (2017).
  11. Wottawah, F., et al. Optical rheology of biological cells. Physical Review Letters. 94 (9), 1-4 (2005).
  12. Darling, E. M., Di Carlo, D. High-throughput assessment of cellular mechanical properties. Annual Review of Biomedical Engineering. 17 (1), 35-62 (2015).
  13. Carey, T. R., Cotner, K. L., Li, B., Sohn, L. L. Developments in label-free microfluidic methods for single-cell analysis and sorting. Wiley Interdisciplinary Reviews: Nanomedicine and Nanobiotechnology. 11 (1), 1529 (2019).
  14. Bagnall, J. S., et al. Deformability of tumor cells versus blood cells. Scientific Reports. 5, 18542 (2015).
  15. Byun, S., et al. Characterizing deformability and surface friction of cancer cells. Proceedings of the National Academy of Sciences. 110 (19), 7580-7585 (2013).
  16. Otto, O., et al. Real-time deformability cytometry: On-the-fly cell mechanical phenotyping. Nature Methods. 12 (3), 199-202 (2015).
  17. Gossett, D. R., et al. Hydrodynamic stretching of single cells for large population mechanical phenotyping. Proceedings of the National Academy of Sciences. 109 (20), 7630-7635 (2012).
  18. Guck, J., Chilvers, E. R. Mechanics meets medicine. Science Translational Medicine. 5 (212), 3-6 (2013).
  19. Balakrishnan, K. R., et al. Node-pore sensing: A robust, high-dynamic range method for detecting biological species. Lab on a Chip. 13 (7), 1302-1307 (2013).
  20. Carbonaro, A., Sohn, L. L. A resistive-pulse sensor chip for multianalyte immunoassays. Lab on a Chip. 5 (10), 1155-1160 (2005).
  21. Saleh, O. A., Sohn, L. L. Direct detection of antibody-antigen binding using an on-chip artificial pore. Proceedings of the National Academy of Sciences. 100 (3), 820-824 (2003).
  22. Saleh, O. A., Sohn, L. L. An artificial nanopore for molecular sensing. Nano Letters. 3 (1), 37-38 (2003).
  23. Saleh, O. A., Sohn, L. L. Quantitative sensing of nanoscale colloids using a microchip Coulter counter. Review of Scientific Instruments. 72 (12), 4449-4451 (2001).
  24. DeBlois, R. W., Bean, C. P. Counting and sizing of submicron particles by the resistive pulse technique. Review of Scientific Instruments. 41 (7), 909-916 (1970).
  25. Li, B., et al. Evaluating sources of technical variability in the mechano-node-pore sensing pipeline and their effect on the reproducibility of single-cell mechanical phenotyping. PLoS ONE. 16 (10), 0258982 (2021).
  26. Zhang, Z. M., Chen, S., Liang, Y. Z. Baseline correction using adaptive iteratively reweighted penalized least squares. Analyst. 135 (5), 1138-1146 (2010).
  27. Alibert, C., Goud, B., Manneville, J. B. Are cancer cells really softer than normal cells. Biology of the Cell. 109 (5), 167-189 (2017).
  28. Fujiwara, I., Zweifel, M. E., Courtemanche, N., Pollard, T. D. Latrunculin A accelerates actin filament depolymerization in addition to sequestering actin monomers. Current Biology. 28 (19), 3183-3192 (2018).
  29. Saleh, O. A. . A novel resistive pulse sensor for biological measurements. , (2003).
  30. Dokukin, M. E., Guz, N. V., Sokolov, I. Quantitative study of the elastic modulus of loosely attached cells in AFM indentation experiments. Biophysical Journal. 104 (10), 2123-2131 (2013).
  31. Li, Q., Lim, C. T., Goh, J. C. H., et al. Probing the elasticity of breast cancer cells using AFM. 13th International Conference on Biomedical Engineering. IFMBE Proceedings. 23, 2122-2125 (2009).
  32. Rother, J., et al. Atomic force microscopy-based microrheology reveals significant differences in the viscoelastic response between malign and benign cell lines. Open Biology. 4 (5), 140046 (2014).
  33. Li, Q., et al. AFM indentation study of breast cancer cells. Biochemical and Biophysical Research Communications. 374 (4), 609-613 (2008).
  34. Xu, C., et al. Elasticity measurement of breast cancer cells by atomic force microscopy. Proc. SPIE 9230. Twelfth International Conference on Photonics and Imaging in Biology and Medicine. (PIBM 2014). 92300, (2014).
  35. Alcaraz, J., et al. Microrheology of human lung epithelial cells measured by atomic force microscopy. Biophysical Journal. 84 (3), 2071-2079 (2003).
  36. Li, M., Dang, D., Liu, L., Xi, N., Wang, Y. Atomic force microscopy in characterizing cell mechanics for biomedical applications: A review. IEEE Transactions on Nanobioscience. 16 (6), 523-540 (2017).
  37. Urbanska, M., et al. A comparison of microfluidic methods for high-throughput cell deformability measurements. Nature Methods. 17, 587-593 (2020).
  38. Hill, R. T., Chilkoti, A. Surface Patterning. Biomaterials Science: An Introduction to Materials: Third Edition. , 276-301 (2013).
  39. Wang, Z., Volinsky, A. A., Gallant, N. D. Crosslinking effect on polydimethylsiloxane elastic modulus measured by custom-built compression instrument. Journal of Applied Polymer Science. 131 (22), 41050 (2014).
  40. Gibson, L. J. The hierarchical structure and mechanics of plant materials. Journal of the Royal Society Interface. 9 (76), 2749-2766 (2012).
  41. Stephens, A. D., Banigan, E. J., Adam, S. A., Goldman, R. D., Marko, J. F. Chromatin and lamin a determine two different mechanical response regimes of the cell nucleus. Molecular Biology of the Cell. 28 (14), 1984-1996 (2017).
  42. Rosenbluth, M. J., Lam, W. A., Fletcher, D. A. Force microscopy of nonadherent cells: A comparison of leukemia cell deformability. Biophysical Journal. 90 (8), 2994-3003 (2006).
  43. Evers, T. M. J., Holt, L. J., Alberti, S., Mashaghi, A. Reciprocal regulation of cellular mechanics and metabolism. Nature Metabolism. 3 (4), 456-468 (2021).
  44. Balakrishnan, K. R., et al. Node-pore sensing enables label-free surface-marker profiling of single cells. Analytical Chemistry. 87 (5), 2988-2995 (2015).

Tags

Mechano-Node-Pore SensingSingle-cell Viscoelastic MeasurementsMicrofluidic PlatformLabel-freeElectronic MeasurementCell MechanicsCell ViscoelasticityCell PhenotypingCell BehaviorDisease ProgressionDrug Response

Play Video
PDF
DOI
DOWNLOAD MATERIALS LIST
Cite This Article
Lai, A., Rex, R., Cotner, K. L., Dong, A., Lustig, M., Sohn, L. L. Mechano-Node-Pore Sensing: A Rapid, Label-Free Platform for Multi-Parameter Single-Cell Viscoelastic Measurements. J. Vis. Exp. (190), e64665, doi:10.3791/64665 (2022).
Download Citation
Reprints and Permissions

View Video

✖

To prove you're not a robot, please enter the text in the image below

CAPTCHA Image
Play CAPTCHA Audio
Refresh Image