Encyclopedia of Experiments: Biology
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- Para testar a preferência de uma mosca fêmea por locais de colocação de ovos, ou locais de oviposição, forneça a uma mosca feminina individual uma escolha entre dois substratos diferentes sobre os quais depositar seus ovos dentro de uma câmara de teste.
Certifique-se de que a mosca está preparada para colocar muitos ovos, para que haja números robustos de ovos em cada ensaio. No final do experimento, remova a mosca e conte os ovos em cada substrato para determinar a preferência de oviposição da mosca.
No protocolo de exemplo, usaremos um ensaio de alta produtividade para testar a preferência de colocação de ovos para substratos de agarose simples ou contendo sacarose.
- Continue com o experimento obtendo câmaras de colocação de ovos de acrílico previamente construídas. Insira folhas plásticas na parte superior, carregando um pedaço da câmara para servir como superfície inferior.
Em seguida, anestesiar as fêmeas em uma almofada de dióxido de carbono, e carregá-las individualmente em cada arena de colocação de ovos. Deixe as moscas 30 minutos para se recuperar do dióxido de carbono e se aclimatar ao novo ambiente. Enquanto as moscas estão se ajustando, encha um tubo com agarose até a marca de 10 mililitros. Em seguida, prepare um substrato de sacarose de 150 mililitros colocando 750 microliters de 2 solução de sacarose molar no tubo.
Prepare o substrato simples da mesma forma, mas substitua a solução de sacarose por água destilada. Em seguida, obtenha a peça do substrato da câmara e a pipeta 1.000 microliters do substrato agarose em cada cocho. Coloque a agarose de lado para solidificar por 30 minutos.
Uma vez que os substratos e moscas agarose estejam prontos, monte todos os três pedaços da câmara de colocação de ovos e, em seguida, tire as folhas de plástico. Coloque as câmaras em incubadoras de moscas durante a noite.
Anestesiar fêmeas injetando dióxido de carbono na câmara. Desmonte a câmara e descarte as moscas anestesiadas.
