Encyclopedia of Experiments: Biology
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- Per testare la preferenza di una mosca femmina per la deposizione delle uova, o siti di ovideposizione, fornire a una singola mosca femmina la scelta tra due diversi substrati su cui depositare le uova all'interno di una camera di prova. La mosca confronterà le opzioni disponibili e sceglierà i siti che preferisce, di solito il substrato più adatto per la sua prole.
Assicurarsi che la mosca sia innescata per deporre molte uova, quindi ci sono numeri di uova robusti in ogni prova. Alla fine dell'esperimento, rimuovere la mosca e contare le uova su ogni substrato per determinare la preferenza di ovideposizione della mosca.
Nel protocollo di esempio, utilizzeremo un saggio ad alta produttività per testare la preferenza per la deposizione delle uova per substrati di agarosio semplici o contenenti saccarosio.
- Continuare con l'esperimento ottenendo camere di deposizione delle uova acriliche precedentemente costruite. Inserire fogli di plastica nella parte superiore, caricando un pezzo della camera per fungere da superficie inferiore.
Successivamente, anestetizza le femmine su un cuscinetto di anidride carbonica e caricale individualmente in ogni arena di deposizione delle uova. Lasciare che le mosche per 30 minuti si riprendano dall'anidride carbonica e si acclimatino al nuovo ambiente. Mentre le mosche si stanno regolando, riempire un tubo con agarosio fino alla marca di 10 millilitri. Quindi, preparare un substrato di saccarosio da 150 millimolare posizionando nel tubo 750 microlitri di soluzione di saccarosio molare. Conservare una bottiglia di agarosio fuso all'1% in un bagno d'acqua.
Preparare il substrato semplice nello stesso modo, ma sostituire la soluzione di saccarosio con acqua distillata. Successivamente, ottenere il pezzo di substrato della camera e pipettare 1.000 microlitri del substrato di agarosio in ogni trogolo. Mettere da parte l'agarosio per solidificarsi per 30 minuti.
Una volta che i substrati e le mosche dell'agarosio sono pronti, assemblate tutti e tre i pezzi della camera di deposizione delle uova e quindi estraete i fogli di plastica. Posizionare le camere nelle incubatrici di mosche durante la notte.
Anestetizzare le femmine iniettando anidride carbonica nella camera. Smontare la camera e scartare le mosche anestetizzate. Infine, scattare foto delle uova per la tenuta dei registri.
