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ड्रोसोफिला अंडा बिछाने वरीयता परख

 
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ड्रोसोफिला अंडा बिछाने वरीयता परख: मक्खियों में निर्णय लेने का परीक्षण करने के लिए एक विधि

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- अंडे बिछाने, या अंडाशय साइटों के लिए एक मादा फ्लाई की वरीयता का परीक्षण करने के लिए, एक व्यक्तिगत मादा फ्लाई को दो अलग-अलग सब्सट्रेट्स के बीच एक विकल्प प्रदान करता है जिस पर एक परीक्षण कक्ष के भीतर उसके अंडे जमा करने के लिए। फ्लाई उपलब्ध विकल्पों की तुलना करेगी और उन साइटों का चयन करेगी जिन्हें वह पसंद करती हैं, आमतौर पर सब्सट्रेट उसकी संतानों के लिए सबसे उपयुक्त है।

सुनिश्चित करें कि फ्लाई को कई अंडे देने के लिए प्रिंड किया जाता है, इसलिए प्रत्येक परीक्षण में मजबूत अंडे की संख्या होती है। प्रयोग के अंत में, फ्लाई को हटा दें, और फ्लाई की ओविपोशन वरीयता निर्धारित करने के लिए प्रत्येक सब्सट्रेट पर अंडे गिनें।

उदाहरण प्रोटोकॉल में, हम सादे या सुक्रोज युक्त एग्रास्ट्रेट सब्सट्रेट्स के लिए अंडे बिछाने की वरीयता का परीक्षण करने के लिए एक उच्च थ्रूपुट परख का उपयोग करेंगे।

- पहले निर्मित ऐक्रेलिक अंडे बिछाने वाले कक्षों को प्राप्त करके प्रयोग जारी रखें। नीचे की सतह के रूप में सेवा करने के लिए कक्ष का एक टुकड़ा लोड करते हुए, शीर्ष में प्लास्टिक शीट डालें।

इसके बाद, कार्बन डाइऑक्साइड पैड पर महिलाओं को एनेस्थेटाइज करें, और उन्हें प्रत्येक अंडे बिछाने वाले क्षेत्र में व्यक्तिगत रूप से लोड करें। मक्खियों को कार्बन डाइऑक्साइड से उबरने और नए वातावरण में प्रवेश करने के लिए 30 मिनट की अनुमति दें। - जबकि मक्खियां एडजस्ट कर रही हैं तो 10 मिलीलीटर के निशान तक एग्रास के साथ एक ट्यूब भरें। 2 मोलर सुक्रोज सॉल्यूशन के 750 माइक्रोलीटर को ट्यूब में रखकर 150 मिलीमोलर सुक्रोज सब्सट्रेट तैयार करें।

सादे सब्सट्रेट को उसी तरीके से तैयार करें, लेकिन सुक्रोज के घोल को आसुत पानी से बदल दें। इसके बाद, चैंबर का सब्सट्रेट टुकड़ा प्राप्त करें और प्रत्येक गर्त में एग्राज्ड सब्सट्रेट के 1,000 माइक्रोलीटर प्राप्त करें। 30 मिनट के लिए जमना करने के लिए एग्राज को अलग सेट करें।

एक बार जब एगरेग्रेट्स और मक्खियां तैयार हो जाती हैं, तो अंडे बिछाने वाले कक्ष के सभी तीन टुकड़ों को इकट्ठा करें और फिर प्लास्टिक की चादरें निकाल लें। रात भर फ्लाई इनक्यूबेटर में कक्षों को रखें।

कक्ष में कार्बन डाइऑक्साइड का इंजेक्शन लगाकर महिलाओं को एनेस्थेटाइज करें। कक्ष को अलग करें और एनेस्थेटाइज्ड मक्खियों को त्यागें। अंत में, रिकॉर्ड रखने के लिए अंडों की तस्वीरें लें।

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