Encyclopedia of Experiments: Biology
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- Pour tester la préférence d’une mouche femelle pour la ponte, ou sites d’oviposition, offrez à une mouche femelle individuelle le choix entre deux substrats différents sur lesquels déposer ses œufs dans une chambre d’essai. La mouche comparera les options disponibles et choisira les sites qu’elle préfère, habituellement le substrat le mieux adapté à sa progéniture.
Assurez-vous que la mouche est amorcée pour pondre de nombreux œufs, de sorte qu’il y a des nombres d’œufs robustes à chaque essai. À la fin de l’expérience, retirez la mouche et comptez les œufs sur chaque substrat pour déterminer la préférence d’oviposition de la mouche.
Dans le protocole d’exemple, nous utiliserons un essai à haut débit pour tester la préférence pour la ponte pour les substrats d’agarose ordinaires ou contenant du saccharose.
- Poursuivre l’expérience en obtenant des chambres acryliques de ponte préalablement construites. Insérer des feuilles de plastique dans le haut, en chargeant un morceau de la chambre pour servir de surface inférieure.
Ensuite, anesthésiez les femelles sur un tampon de dioxyde de carbone et chargez-les individuellement dans chaque arène de ponte. Laissez les mouches se remettre pendant 30 minutes du dioxyde de carbone et s’acclimater au nouvel environnement. Pendant que les mouches s’ajustent, remplissez un tube d’agarose jusqu’à la marque de 10 millilitres. Ensuite, préparez un substrat de saccharose de 150 millimères en plaçant 750 microlitres de solution de saccharose molaire dans le tube. Gardez une bouteille de saccharose fondue de 1 % dans un bain d’eau.
Préparer le substrat nature de la même manière, mais remplacer la solution de saccharose par de l’eau distillée. Ensuite, obtenir le morceau de substrat de la chambre et pipette 1000 microlitres du substrat agarose dans chaque auge. Mettre l’agarose de côté pour solidifier pendant 30 minutes.
Une fois que les substrats et les mouches de l’agarose sont prêts, assemblez les trois morceaux de la chambre de ponte, puis sortez les feuilles de plastique. Placez les chambres dans des incubateurs de mouches pendant la nuit.
Anesthésier les femelles en injectant du dioxyde de carbone dans la chambre. Démonter la chambre et jeter les mouches anesthésiées. Enfin, prendre des photos des œufs pour tenir des registres.
