Encyclopedia of Experiments: Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.
Transcript
Please note that all translations are automatically generated.
- Om de voorkeur van een vrouwelijke vlieg voor het leggen van eieren of ovipositieplaatsen te testen, biedt een individuele vrouwelijke vlieg de keuze tussen twee verschillende substraten waarop ze haar eieren in een testkamer kan deponeren. De vlieg vergelijkt de beschikbare opties en kiest de locaties die ze verkiest, meestal het substraat dat het meest geschikt is voor haar nakomelingen.
Zorg ervoor dat de vlieg klaar is om veel eieren te leggen, dus er zijn robuuste einummers in elke proef. Verwijder aan het einde van het experiment de vlieg en tel de eieren op elk substraat om de ovipositievoorkeur van de vlieg te bepalen.
In het voorbeeldprotocol gebruiken we een test met hoge doorvoer om de voorkeur voor het leggen van eieren voor gewone of sacharosehoudende agarosesubstraten te testen.
- Ga verder met het experiment door eerder geconstrueerde acryl eierlegkamers te verkrijgen. Steek plastic vellen in de bovenkant en laad een stuk van de kamer om als bodemoppervlak te dienen.
Verdoof vervolgens de vrouwtjes op een koolstofdioxidekussen en laad ze individueel in elke eierleggende arena. Laat de vliegen 30 minuten om zich te herstellen van het koolstofdioxide en te acclimatiseren aan de nieuwe omgeving. Terwijl de vliegen zich aanpassen, vult u een buis met agarose tot de 10 milliliter markering. Bereid vervolgens een 150 millimolar sucrose substraat door 750 microliters van 2 molaire sacharose-oplossing in de buis te plaatsen.
Bereid het gewone substraat op dezelfde manier voor, maar vervang de sacharoseoplossing door gedestilleerd water. Verkrijg vervolgens het substraatstuk van de kamer en pipetteer 1.000 microliters van het agarosesubstraat in elke trog. Zet de agarose opzij om 30 minuten te stollen.
Zodra de agarose substraten en vliegen klaar zijn, monteert u alle drie de stukken van de eierlegkamer en haalt u vervolgens de plastic vellen eruit. Plaats de kamers 's nachts in vliegincubatoren.
Verdoof vrouwtjes door koolstofdioxide in de kamer te injecteren. Demonteer de kamer en gooi de verdoofde vliegen weg. Maak ten slotte foto's van de eieren voor registratie.
