Encyclopedia of Experiments: Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.
Transcript
Please note that all translations are automatically generated.
- Dişi bir sineğin yumurtlama veya yumurtlama alanları tercihini test etmek için, bireysel bir dişi sineğin yumurtalarını bir test odasına yatıracağı iki farklı substrat arasında bir seçenek sunmasını sağlayın. Sinek, mevcut seçenekleri karşılaştıracak ve tercih ettiği siteleri seçecektir, genellikle yavruları için en uygun alt tabaka.
Sineğin birçok yumurta bırakmak için astarlı olduğundan emin olun, böylece her denemede sağlam yumurta sayıları vardır. Deneyin sonunda, sineği çıkarın ve sineğin yumurtlama tercihini belirlemek için her substrattaki yumurtaları sayın.
Örnek protokolde, düz veya sakkaroz içeren agarose substratları için yumurtlama tercihini test etmek için yüksek verimli bir test kullanacağız.
- Daha önce inşa edilmiş akrilik yumurtlama odaları elde ederek deneye devam edin.
Daha sonra, dişileri bir karbondioksit pedi üzerinde uyuşturun ve her yumurtlama arenasına ayrı ayrı yükleyin. Sineklerin karbondioksitten kurtulmasına ve yeni çevreye alışmasına 30 dakika izin verin. Sinekler ayarlanırken, bir tüpü 10 mililitre işaretine kadar agarozla doldurun. Ardından, tüpe 750 mikrolitre 2 molar sakkaroz çözeltisi yerleştirerek 150 milimoler sakkaroz substratı hazırlayın. Bir şişe erimiş% 1 agarose'u bir su banyosunda saklayın.
Düz substratı aynı şekilde hazırlayın, ancak sakkaroz çözeltisini damıtılmış suyla değiştirin. Daha sonra, odanın substrat parçasını elde edin ve her oluğa agarose substratının 1.000 mikrolitresini pipetleyin. Agarose'yi 30 dakika katılaştırmak için bir kenara koyun.
Agarose substratları ve sinekler hazır olduğunda, yumurtlama odasının üç parçasını da birleştirin ve ardından plastik tabakaları çıkarın. Odaları bir gecede sinek inkübatörlerine yerleştirin.
Odaya karbondioksit enjekte ederek dişileri uyuşturun.
