戈纳德微注射：一种化合物输送方法，直接进入C.elegans的细菌线

-为了准备注射， 使用蠕虫采摘在糖垫上铺设卤烃油的轨迹。将蠕虫放在油中，轻轻将蠕虫推上护垫，使其固定。 确保油完全覆盖动物。 它允许氧气进入蠕虫，同时防止干燥。 接下来，将阿加罗斯垫放在注射显微镜上，将针头垂直于蠕虫，瞄准性腺手臂的末端。  

轻轻将针头穿过角质层，用核酸或复合物注射性腺手臂。每个性腺手臂都含有一种生殖系同步物，这种同步物会发展成单个卵母细胞。注入腹膜性腺的材料将被纳入这些卵母细胞中，影响下一代。

注射蠕虫后，用M9缓冲器代替油。一旦蠕虫开始移动，将它们转移到含有细菌食物的NGM agar板。在下列协议中，性腺微注射法用于提供Cas9复合物，以瞄准和编辑dpy-10基因。

-从文本协议中描述的C. elegans 和 agarose 垫的准备开始。放置一个阿加罗斯注射垫， 盖滑到解剖范围。 使用蠕虫选择沿着垫子的一边铺设一小块卤素油轨道。 然后，使用涂有油的蠕虫采摘将几只蠕虫从NG agar板上提起并放入油轨中。细毛附着在移液器上，如睫毛或猫须，将蠕虫平行放置，轻轻地将蠕虫推入阿加罗斯垫。 直到舒适的微注射程序，只有一次安装并注射一个蠕虫。

一旦到位并连接到垫子上，用从蠕虫采摘尖上再滴几滴卤烃油覆盖蠕虫。将带安装的蠕虫的盖子滑移到注射显微镜上。在低放大倍度下，将蠕虫垂直于注射针，针头已充满 RNP解决方案，如文本协议所述。

切换到高放大倍数并重新定位与性腺手臂相邻的针头，对应于中后期核附近的区域。 使用微脉冲器，将针头移向蠕虫，稍微压碎角质层。 然后，用一只手轻点显微镜阶段的一侧，将针头击穿角质层。 打压注射踏板或按钮，慢慢填充到性腺手臂与注射混合，并删除针头。 用另一只性腺手臂重复步骤。

注入蠕虫后，取出结节垫中的盖片，放在解剖显微镜下。使用拉毛细管移液器，通过在蠕虫身上输送M9缓冲器来取代蠕虫的油。执行此处理以释放来自阿加的蠕虫。 10分钟后，当蠕虫在缓冲区中四处游荡时，使用拉毛细管移液器将它们移动到带有OP50细菌的NG agar板。将板放在摄氏20度的地方两到三个小时，直到蠕虫恢复并四处移动。一旦恢复，将蠕虫单独转移到NG然后，将板转移到25摄氏度的孵化器。