Journal
/
/
Biochemische Reconstitutie van Steroid Receptor • Hsp90 eiwitcomplexen en reactivering van Ligand binding
JoVE Journal
Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Biology
Biochemical Reconstitution of Steroid Receptor•Hsp90 Protein Complexes and Reactivation of Ligand Binding
DOI:

11:07 min

September 21, 2011

, ,

Chapters

  • 00:05Title
  • 01:37Preparation of Cell Cytosol Containing Functional Glucocorticoid Receptor
  • 03:04Immunoabsorption of GR from the Cytosol and Dissociation of hsp90
  • 05:16Reconstitution of GR-hsp90 Heterocomplex using Molecular Chaperones, Cofactors, and ATP
  • 06:17Analysis of Reconstituted Protein Complexes and Ligand Binding Activity
  • 08:26Representative GR-hsp90 Heterocomplex Formation and Steroid Binding Activity
  • 10:04Conclusion

Summary

Automatic Translation

Een<em> In vitro</em> Werkwijze voor de bereiding functionele glucocorticoid receptor (GR) • hsp90 eiwitcomplexen uit gezuiverde eiwitten en cellulaire lysaten wordt beschreven. De methode maakt gebruik van immunoadsorption van recombinant GR, gevolgd door zout-strippen en eiwitcomplex reconstitutie. Het belang van co-factoren en de buffer omstandigheden worden besproken, evenals potentiële methode toepassingen.

Related Videos

Read Article