A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Chapters
- 00:05Title
- 01:37Preparation of Cell Cytosol Containing Functional Glucocorticoid Receptor
- 03:04Immunoabsorption of GR from the Cytosol and Dissociation of hsp90
- 05:16Reconstitution of GR-hsp90 Heterocomplex using Molecular Chaperones, Cofactors, and ATP
- 06:17Analysis of Reconstituted Protein Complexes and Ligand Binding Activity
- 08:26Representative GR-hsp90 Heterocomplex Formation and Steroid Binding Activity
- 10:04Conclusion
Bir<em> In vitro</em> • hsp 90 protein kompleksleri proteinler ve hücresel lizatları saflaştırılmış fonksiyonel glukokortikoid reseptör (GR) hazırlanması için bir yöntem açıklanmıştır. Bu yöntem, tuz sıyırma ve protein kompleksi sulandırıldıktan takip rekombinant GR immunoadsorption kullanır. Potansiyel yöntemi uygulamaları gibi kofaktör ve tampon koşulları önemi tartışıldı.
Tags
Biochemical ReconstitutionSteroid ReceptorHsp90 Protein ComplexesLigand BindingMolecular ChaperoneEukaryotic Signaling ProteinsTranscription FactorsProtein KinasesCell CyclingTumorigenesisApoptosisSignaling PathwaysGlucocorticoid Receptor (GR)Immunoprecipitation AssayIn Vitro Reconstitution MethodHsp90 Functional ActivitySteroid Receptor Ligand BindingMolecular Chaperone Cofactor Requirements
