A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Chapters
- 00:05Title
- 01:37Preparation of Cell Cytosol Containing Functional Glucocorticoid Receptor
- 03:04Immunoabsorption of GR from the Cytosol and Dissociation of hsp90
- 05:16Reconstitution of GR-hsp90 Heterocomplex using Molecular Chaperones, Cofactors, and ATP
- 06:17Analysis of Reconstituted Protein Complexes and Ligand Binding Activity
- 08:26Representative GR-hsp90 Heterocomplex Formation and Steroid Binding Activity
- 10:04Conclusion
<em> В пробирке</em> Способ получения функциональных глюкокортикоидных рецепторов (ГР) • Hsp90 белковых комплексов из очищенных белков и клеточных лизатов описано. Метод использует иммуноадсорбции рекомбинантных GR следует соли зачистки и восстановления белкового комплекса. Важность кофакторов и буферных условия обсуждаются, равно как и потенциальные области применения метода.
Tags
Biochemical ReconstitutionSteroid ReceptorHsp90 Protein ComplexesLigand BindingMolecular ChaperoneEukaryotic Signaling ProteinsTranscription FactorsProtein KinasesCell CyclingTumorigenesisApoptosisSignaling PathwaysGlucocorticoid Receptor (GR)Immunoprecipitation AssayIn Vitro Reconstitution MethodHsp90 Functional ActivitySteroid Receptor Ligand BindingMolecular Chaperone Cofactor Requirements
