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Chapters
- 00:05Title
- 02:28Fly Cup Preparation and Embryo Collection
- 04:00Embryo Homogenization and Clarification
- 04:48Microtubule Polymerization, Kinesin Binding and Differential Sedimentation of Microtubules and Kinesin
- 06:49Representative Kinesin Purification Results
- 08:29Conclusion
Este es un protocolo para aislar Kinesin activos de larga duración de la<em> Drosophila</em> Para los estudios de embriones de una sola molécula biofísicos. Mostramos cómo recoger los embriones, hacen que el lisado de embrión, y luego se polimerizan los microtúbulos (MTS). Kinesin se purifica mediante la inmovilización de que en el MT, girando hacia abajo los complejos MT Kinesin-, y luego soltar el kinesina de la MTs mediante la adición de ATP.
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IsolationPurificationKinesinDrosophila EmbryosMotor ProteinsMicrotubulesSub-cellular LocationsNeurodegenerative DiseasesTherapeutic ApproachesATP HydrolysisPurification ProtocolGeneticsSingle-molecule Biophysical StudiesLaying CupsFemales Per CupOvernight CollectionsBleach DechorionatedHomogenizedLow Speed SpinHigh Speed CentrifugationClarified SupernatantGTP And TaxolPolymerize MTsImmobilized On Polymerized MTsATP AnalogAdenylyl ImidodiphosphateRoom TemperatureMicrotubule Pellet
