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Individuazione di partner proteine ​​interagenti mediante Tandem Affinity Purification
JoVE Journal
Biology
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JoVE Journal Biology
Identification of Protein Interacting Partners Using Tandem Affinity Purification
DOI:

10:02 min

February 25, 2012

, , ,

Chapters

  • 00:05Title
  • 01:30Transfection
  • 02:20Cell Lysis
  • 03:30Binding to Rabbit IgG-agarose
  • 04:53TEV Protease Cleavage
  • 05:48Binding to Immobilized Streptavidin Beads
  • 07:50Biotin Elution of the Streptavidin Binging Peptide and Bait Protein

Summary

Automatic Translation

Tandem purificazione per affinità è un valido approccio per l'individuazione di partner di legame proteico. Come prova di concetto, questa metodologia è stata applicata al ben caratterizzato eIF4E fattore di inizio traduzione di co-precipitato i fattori coinvolti in cellule ospiti di inizio di traduzione. Questo metodo è facilmente adattabile a qualsiasi proteina cellulare o virale.

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