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Chapters
- 00:05Title
- 01:43Preparation of Cell Lysate
- 03:20Determination of Optimal Lysate Dilution
- 04:02Microscale Thermophoresis Binding Studies
- 07:05Microscale Thermophoresis Data Analysis
- 08:25Results: Measuring the Affinity of Non-phosphorylated STAT3 Protein Binding to Oligonucleotides
- 09:40Conclusion
Termoforese microescala (MST) pode ser amplamente utilizado para a determinação da afinidade de ligação sem purificação da proteína alvo a partir de lisados celulares. O protocolo envolve a sobre-expressão da proteína GFP fundida, a lise das células em condições não desnaturantes, e detecção de sinal MST na presença de várias concentrações do ligando.
