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siRNA Transfection and EMSA Analyses on Freshly Isolated Human Villous Cytotrophoblasts
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siRNA-Transfektion und EMSA-Analysen auf frisch isolierten menschlichen Villöse Cytotrophoblasten

DOI:
10.3791/53995-v

•

09:57 min

•

September 20, 2016

•

, , ,
1Department of Biological Sciences,University of Quebec in Montreal, 2Department of Pharmacology and Therapeutics,McGill University, 3Department of Clinical Sciences,University of Montreal

Chapters

  • 00:05Title
  • 01:00Evaluation of the Purity of Isolated Primary Villous Cytotrophoblasts
  • 03:13siRNA Transfection of Human Primary Villous Cytotrophoblasts
  • 04:55Preparation of Nuclear Extracts from Cultured Cells
  • 05:52Radiolabeling of Single Stranded Oligonucleotide
  • 06:50DNA Binding Reaction
  • 08:07Results: Syncytin-2 Knowckdown and Visualization of Syncytin-2 DNA-protein Complexes
  • 09:14Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Dieses Protokoll beschreibt ein Verfahren zur siRNA effizient transfizieren in frisch isolierten menschlichen villöse Zytotrophoblasten Verwendung Mikroporation und Identifizieren von DNA-Protein-Komplexe in diesen Zellen. Transfizierte Zellen können durch Western-Blot überwacht werden und EMSA-Analysen während der 4-tägigen Kulturzeit.

Tags

SiRNA TransfectionEMSAHuman Villous CytotrophoblastsPlacenta ResearchGene ExpressionCytotrophoblast DifferentiationRegulatory MechanismsFACS AnalysisCK7 Positive CellsFlow Cytometry

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