A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Chapters
- 00:05Title
- 01:00Evaluation of the Purity of Isolated Primary Villous Cytotrophoblasts
- 03:13siRNA Transfection of Human Primary Villous Cytotrophoblasts
- 04:55Preparation of Nuclear Extracts from Cultured Cells
- 05:52Radiolabeling of Single Stranded Oligonucleotide
- 06:50DNA Binding Reaction
- 08:07Results: Syncytin-2 Knowckdown and Visualization of Syncytin-2 DNA-protein Complexes
- 09:14Conclusion
Этот протокол описывает способ эффективного трансфекции миРНК в свежеизолированных ворсинчатыми cytotrophoblasts человека с использованием microporation и идентификации ДНК-белковых комплексов в этих клетках. Трансфицированные клетки можно контролировать с помощью Вестерн-блоттинга и EMSA анализы в течение времени культивирования 4-дневного периода.
