Journal
/
/
En Standard metode for å undersøke stedet genetisk virkning som en funksjon av punkt mutasjon reparasjon katalysert av CRISPR/Cas9 og SsODN i menneskeceller
JoVE Journal
Genetics
This content is Free Access.
JoVE Journal Genetics
A Standard Methodology to Examine On-site Mutagenicity As a Function of Point Mutation Repair Catalyzed by CRISPR/Cas9 and SsODN in Human Cells
DOI:

10:07 min

August 25, 2017

,

Chapters

  • 00:05Title
  • 00:38Cell Line, Culture Conditions, and Harvest
  • 01:57Plating the Cells and Releasing Them from Aphidicolin Synchronization
  • 02:44RNA Complexing
  • 04:13Harvesting the Cells for Targeting
  • 05:30Targeting Samples
  • 06:13Analysis of Gene Edited Cells and Transfection Efficiency
  • 06:57DNA Sequence Analysis
  • 07:56Results: Effective Point Mutation Repair
  • 09:41Conclusion

Summary

Automatic Translation

Denne protokollen beskriver arbeidsflyten med et CRISPR/Cas9-basert redigering system for reparasjon av punkt mutasjoner i pattedyrceller. Her bruker vi en kombinasjon tilnærming til genet redigering med en detaljert etterarbeid eksperimentelle strategi for å måle indel formasjon på målområdet-i hovedsak analysere stedet mutagenese.

Related Videos

Read Article