Journal
/
Genetics
/
Højeffektive gen afbrydelse af Murine og menneskelige hæmatopoietisk stamceller ved CRISPR/Cas9
JoVE Journal
Genetics
This content is Free Access.
JoVE Journal Genetics
Highly Efficient Gene Disruption of Murine and Human Hematopoietic Progenitor Cells by CRISPR/Cas9

Højeffektive gen afbrydelse af Murine og menneskelige hæmatopoietisk stamceller ved CRISPR/Cas9

DOI:
10.3791/57278-v

•

08:27 min

•

April 10, 2018

•

, , , ,
1Stem Cells & Regenerative Medicine Center,Baylor College of Medicine, 2Center for Cell and Gene Therapy,Baylor College of Medicine, 3Centro di Ricerca Emato-Oncologica (CREO),University of Perugia, 4Department of Molecular & Human Genetics,Baylor College of Medicine, 5Texas Children’s Hospital & Houston Methodist Hospital

Chapters

  • 00:05Title
  • 01:05sgRNA Fwd Primer Design, DNA Template Synthesis, and ln Vitro Transcription of sgRNA
  • 03:38Cas9-sgRNA Complexing and Electroporation
  • 05:45Results: Use of Cas9-sgRNA Electroporation Protocol to Study Efficient Knockout of Target Gene
  • 07:48Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

En protokol for hurtig CRISPR/Cas9-medieret gen forstyrrelser i mus og primære hæmatopoietisk menneskeceller er beskrevet i denne artikel. Cas9-sgRNA ribonucleoproteins er indført via elektroporation med sgRNAs genereret gennem in vitro- transskription og kommercielle Cas9. Høj redigering effektivitet opnås med begrænset tid og finansielle omkostninger.

Tags

CRISPR/Cas9Gene DisruptionHematopoietic Progenitor CellsRibonucleoproteinSingle-guide RNAPCRT7 RNA PolymeraseGene KnockoutPrimary CellsHigh EfficiencyFast TurnaroundCost-effectiveNormal And Malignant HematopoiesisPrimary T-cellsHematopoietic Cell LinesPrimary Leukemia Samples

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

QTL Mapping og CRISPR / Cas9 redigering for at identificere et lægemiddelresistensgen i<em> Toxoplasma gondii</em

Udvælgelsesafhængig og uafhængig generering af CRISPR / Cas9-medierede Gene Knockouts i Pattedyrceller

En standardmetode til at undersøge ejendommen mutagenicitet som en funktion af punkt Mutation reparation katalyseret af CRISPR/Cas9 og SsODN i humane celler

Mikroinjektion af CRISPR/Cas9 Protein i kanal havkat, Ictalurus punctatus, embryoner til Gene Editing

En protokol til produktion af Integrase-mangelfuld Lentiviral vektorer for CRISPR/Cas9-medieret gen Knockout i dividere celler

Effektiv produktion og identifikation af CRISPR/Cas9-genereret gen Knockouts i Model System Danio rerio

CRISPR/Cas9 gen redigering at gøre betinget mutanter af menneskelige Malaria parasitten, P. falciparum

Endogene Protein Tagging i menneskelige induceret pluripotente stamceller ved hjælp af CRISPR/Cas9

Forberedelse og gen modifikation af ikkemenneske primat hæmatopoietisk stamceller og stamceller

CRISPR/Cas9 ribonucleoprotein-medieret præcis Genredigering ved Rørelektroporation

Read Article