Calibration-free <em>In Vitro</em> Quantification of Protein Homo-oligomerization Using Commercial Instrumentation and Free, Open Source Brightness Analysis Software

Rory Nolan; Luis A. Alvarez; Samuel C. Griffiths; Jonathan Elegheert; Christian Siebold; Sergi Padilla-Parra

doi:10.3791/58157

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Calibración-libre In Vitro cuantificación de proteína Homo-Oligomerización utilizando instrumentación comercial y Software de análisis de brillo libre de código abierto

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Biochemistry

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Calibration-free In Vitro Quantification of Protein Homo-oligomerization Using Commercial Instrumentation and Free, Open Source Brightness Analysis Software

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Calibración-libre In Vitro cuantificación de proteína Homo-Oligomerización utilizando instrumentación comercial y Software de análisis de brillo libre de código abierto

DOI:

10.3791/58157-v

•

08:22 min

•

July 17, 2018

•

Rory Nolan, Luis A. Alvarez, Samuel C. Griffiths, Jonathan Elegheert, Christian Siebold, Sergi Padilla-Parra^2,3,4

¹Cellular Imaging Group, Wellcome Centre Human Genetics,University of Oxford, ²Division of Structural Biology, Wellcome Centre Human Genetics,University of Oxford, ³Dynamic Structural Virology Group,Biocruces Health Research Centre, ⁴IKERBASQUE,Basque Foundation for Science

Chapters

00:04Title
00:50FKBP12F36V-mVenus Purification
03:24Preparation of Multiwell Plate Array
04:19Calibration-free Confocal Acquisition
06:26Results: FKBP12 Dimerizes upon Addition of BB Dimerizer Drug
07:23Conclusion

Summary

Automatic Translation

Este protocolo describe un enfoque libre de calibración para cuantificación de proteína homo-Oligomerización en vitro basado en la espectroscopia de fluorescencia de fluctuación comercial luz microscopia. Se muestran los métodos de análisis y configuración correcta adquisición.

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