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真核生物 mRNA 蛋白質複合体を回復するオリゴヌクレオチド系タンデム型 RNA の隔離プロシージャ
JoVE Journal
Biochemistry
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JoVE Journal Biochemistry
An Oligonucleotide-based Tandem RNA Isolation Procedure to Recover Eukaryotic mRNA-Protein Complexes
DOI:

09:45 min

August 18, 2018

Chapters

  • 00:04Title
  • 00:32Antisense Oligonucleotide (ASO) Design
  • 02:22Protein Extract Preparation
  • 04:08Step 1: Poly(A) RNA Isolation
  • 05:45Step 2: Specific mRNA Capture with 3 -Biotinylated 2 -Methoxy Modified Antisense RNA Oligonucleotides
  • 07:41Results: Capture of Specific mRNA-protein Complexes from Extracts Derived from UV Crosslinked Cells with TRIP
  • 09:00Conclusion

Summary

Automatic Translation

内生的に形成された mRNA 蛋白質複合体の回復のためのタンデムの RNA 分離手順 (旅行) を説明します。具体的には、RNA 蛋白質の複合体は、生体内で架橋 polyadenylated Rna ランダムプライマー ビーズ抽出物から分離された、特定の Mrna が変更された RNA アンチセンス オリゴヌクレオチドでキャプチャされます。イムノブロット解析による蛋白質の Mrna にバインドが検出されます。

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