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एक Oligonucleotide आधारित मिलकर आरएनए अलगाव प्रक्रिया Eukaryotic mRNA-प्रोटीन परिसरों को पुनर्प्राप्त करने के लिए
JoVE Journal
Biochemistry
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JoVE Journal Biochemistry
An Oligonucleotide-based Tandem RNA Isolation Procedure to Recover Eukaryotic mRNA-Protein Complexes
DOI:

09:45 min

August 18, 2018

Chapters

  • 00:04Title
  • 00:32Antisense Oligonucleotide (ASO) Design
  • 02:22Protein Extract Preparation
  • 04:08Step 1: Poly(A) RNA Isolation
  • 05:45Step 2: Specific mRNA Capture with 3 -Biotinylated 2 -Methoxy Modified Antisense RNA Oligonucleotides
  • 07:41Results: Capture of Specific mRNA-protein Complexes from Extracts Derived from UV Crosslinked Cells with TRIP
  • 09:00Conclusion

Summary

Automatic Translation

endogenously गठित mRNA-प्रोटीन कॉम्प्लेक्स की वसूली के लिए एक मिलकर आरएनए अलगाव प्रक्रिया (ट्रिप) का वर्णन किया गया है । विशेष रूप से, आरएनए-प्रोटीन कॉंप्लेक्स vivo मेंcrosslinked हैं, polyadenylated RNAs oligo (डीटी) मोतियों के साथ अर्क से अलग कर रहे हैं, और विशेष रूप से mRNAs संशोधित आरएनए antisense oligonucleotides के साथ कब्जा कर रहे हैं । mRNAs से बंधे प्रोटीन immunoblot विश्लेषण द्वारा पाए जाते हैं ।

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