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Un procedimiento de aislamiento de RNA tándem basada en oligonucleótidos recuperar complejos eucariotas ARNm-proteína
JoVE Journal
Biochemistry
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JoVE Journal Biochemistry
An Oligonucleotide-based Tandem RNA Isolation Procedure to Recover Eukaryotic mRNA-Protein Complexes
DOI:

09:45 min

August 18, 2018

Chapters

  • 00:04Title
  • 00:32Antisense Oligonucleotide (ASO) Design
  • 02:22Protein Extract Preparation
  • 04:08Step 1: Poly(A) RNA Isolation
  • 05:45Step 2: Specific mRNA Capture with 3 -Biotinylated 2 -Methoxy Modified Antisense RNA Oligonucleotides
  • 07:41Results: Capture of Specific mRNA-protein Complexes from Extracts Derived from UV Crosslinked Cells with TRIP
  • 09:00Conclusion

Summary

Automatic Translation

Se describe un procedimiento de aislamiento de RNA tándem (viaje) para la recuperación de complejos proteicos de ARNm endógeno formado. Específicamente, complejos RNA-proteína son reticulado en vivo, cofia RNAs son aislados de los extractos con los granos oligo(dT) y particular mRNAs son capturados con oligonucleótidos antisentido de RNA modificados. Proteínas a mRNAs son detectadas por el análisis de immunoblot.

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