Journal
/
Genetics
/
Generering av definerte genomisk modifikasjoner bruke CRISPR-CAS9 i Human Pluripotent stamceller
JoVE Journal
Genetics
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Genetics
Generation of Defined Genomic Modifications Using CRISPR-CAS9 in Human Pluripotent Stem Cells

Generering av definerte genomisk modifikasjoner bruke CRISPR-CAS9 i Human Pluripotent stamceller

DOI:
10.3791/60085-v

•

09:04 min

•

September 25, 2019

•

, , ,
1Center for Cellular and Molecular Therapeutics,The Children’s Hospital of Philadelphia, 2Department of Pathology and Laboratory Medicine,The Children’s Hospital of Philadelphia, 3Department of Pathology and Laboratory Medicine,University of Pennsylvania

Chapters

  • 00:04Title
  • 01:19Test gRNA (GuidE RNA) Cutting Efficiency
  • 03:50Clone Screening
  • 04:51Transfection Setup
  • 06:07Checking for Mutations in Single Colonies
  • 07:11Results: Cutting Efficiency, and Generation and Screening of Mutations
  • 08:10Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Denne protokollen gir en metode for å forenkle generering av definerte heterozygot eller homozygote nukleotid endringer ved hjelp av CRISPR-CAS9 i menneskelige Pluripotent stamceller.

Tags

CRISPR-Cas9Human Pluripotent Stem CellsIsogenic LinesHeterozygous MutationsGene FunctionDisease ModelingColony PickingFluorescence-activated Cell SortingMEFsROCK Inhibitor

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

Ved hjelp av en Fluorescent PCR-kapillar-gelelektroforese teknikken for å genotype CRISPR / Cas9-mediert knockout-mutanter i en high-throughput-format

Utvalgsavhengig og uavhengig generasjon av CRISPR / Cas9-medierte Gene Knockouts i mammale celler

Opprinnelige celletransplantasjon for CRISPR/Cas9-baserte sprang framover i Xenopus

Immunostaining for DNA modifikasjoner: beregningsorientert analyse av AC Confocal bilder

CRISPR/Cas9-mediert målrettet integrering i Vivo med en homologi-mediert slutten begynte-basert strategi

Svært effektiv Gene avbrudd i Murine og menneskelig blodkreft stamfar celler av CRISPR/Cas9

En rask og lettvint rørledning for generering Genomic punkt mutanter i C. elegans bruker CRISPR/Cas9 Ribonucleoproteins

CRISPR/Cas9 Gene redigering gjør betinget mutanter av menneskelig malariaparasitten P. falciparum

Endogene Protein merking i menneskelig indusert Pluripotent stilk celler med CRISPR/Cas9

Lentiviral Vector plattform for effektiv levering av Epigenome-redigeringsverktøy i Human indusert Pluripotent Stamcelle-avledet sykdom modeller

Read Article