Journal
/
Genetics
/
Generation af definerede genomiske modifikationer med CRISPR-CAS9 i humane pluripotente stamceller
JoVE Journal
Genetics
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Genetics
Generation of Defined Genomic Modifications Using CRISPR-CAS9 in Human Pluripotent Stem Cells

Generation af definerede genomiske modifikationer med CRISPR-CAS9 i humane pluripotente stamceller

DOI:
10.3791/60085-v

•

09:04 min

•

September 25, 2019

•

, , ,
1Center for Cellular and Molecular Therapeutics,The Children’s Hospital of Philadelphia, 2Department of Pathology and Laboratory Medicine,The Children’s Hospital of Philadelphia, 3Department of Pathology and Laboratory Medicine,University of Pennsylvania

Chapters

  • 00:04Title
  • 01:19Test gRNA (GuidE RNA) Cutting Efficiency
  • 03:50Clone Screening
  • 04:51Transfection Setup
  • 06:07Checking for Mutations in Single Colonies
  • 07:11Results: Cutting Efficiency, and Generation and Screening of Mutations
  • 08:10Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Denne protokol giver en metode til at lette genereringen af definerede heterozygot eller homozygot nukleotid ændringer ved hjælp af CRISPR-CAS9 i humane pluripotente stamceller.

Tags

CRISPR-Cas9Human Pluripotent Stem CellsIsogenic LinesHeterozygous MutationsGene FunctionDisease ModelingColony PickingFluorescence-activated Cell SortingMEFsROCK Inhibitor

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

Under anvendelse af et fluorescerende PCR-kapillær gelelektroforese Teknik til genotype CRISPR / Cas9-medieret Knockout Mutanter i et format med høj kapacitet

Udvælgelsesafhængig og uafhængig generering af CRISPR / Cas9-medierede Gene Knockouts i Pattedyrceller

Primordiale kønsceller Transplantation til CRISPR/Cas9-baserede kvantespring i Xenopus

Immunfarvning for DNA ændringer: beregningsmæssige analyse af Konfokal billeder

CRISPR/Cas9-medieret målrettede Integration In Vivo ved hjælp af en homologi-medieret End at deltage-baseret strategi

Højeffektive gen afbrydelse af Murine og menneskelige hæmatopoietisk stamceller ved CRISPR/Cas9

En hurtig og letkøbt Pipeline for generering af genomisk punkt mutanter i C. elegans bruger CRISPR/Cas9 Ribonucleoproteins

CRISPR/Cas9 gen redigering at gøre betinget mutanter af menneskelige Malaria parasitten, P. falciparum

Endogene Protein Tagging i menneskelige induceret pluripotente stamceller ved hjælp af CRISPR/Cas9

Lentiviral vektor Platform for effektiv levering af Epigenome-redigeringsværktøjer i menneskelige induceret pluripotente stamceller-afledt sygdomsmodeller

Read Article