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β-アレプチンの並列尋問2 PRESTOタンゴアッセイを用いたGPCR規模でのリガンドスクリーニングの募集
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Biochemistry
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JoVE Journal Biochemistry
Parallel Interrogation of β-Arrestin2 Recruitment for Ligand Screening on a GPCR-Wide Scale using PRESTO-Tango Assay
DOI:

09:03 min

March 10, 2020

, ,

Chapters

  • 00:05Introduction
  • 00:43Primary Screening: Poly-L-Lysine Plate Preparation
  • 01:25Primary Screening: Cell Culture and Plate Seeding
  • 02:22Primary Screening: DNA Plate Preparation and Transfections
  • 03:35Primary Screening: Cell Stimulation and Luminescence Reading
  • 04:26Secondary Screening: Cell Seeding and Transfections
  • 05:59Secondary Screening: Half Log Dose-Curve Drug Plate Preparation and Luminescence Reading
  • 07:16Results: Representative Primary Screening Hit Identification and Secondary Screening Dose-Curve Responses
  • 08:23Conclusion

Summary

Automatic Translation

GPCRは、魅力的な薬剤の標的であることを考えると、GPCRリガンドスクリーニングは、リード化合物の同定や脱孤児化研究に不可欠です。これらの取り組みに向けて、TEVベースのレポーターアッセイを用いて約300 GPCRで一過性β-arrestin2募集の同時プロファイリングに使用されるオープンソースのリソースプラットフォームPRESTO-Tangoについて説明します。

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