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Quantificazione simultanea di kynurenine selezionate analizzate dalla cromatografia liquida-spettrometria di massa in mezzo raccolto da colture cellulari tumorali
JoVE Journal
Bioengineering
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JoVE Journal Bioengineering
Simultaneous Quantification of Selected Kynurenines Analyzed by Liquid Chromatography-Mass Spectrometry in Medium Collected from Cancer Cell Cultures
DOI:

10:38 min

May 09, 2020

, ,

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:573-Nitrotyrosine (3NT), Kynurenine (Kyn), 3-Hydroxykynurenine (3HKyn), 3-Hydroxyanthranilic Acid (3HAA), Xanthurenic Acid (XA) and Charcoal Treated Culture Medium Preparation
  • 01:58Calibration Solution Preparation
  • 03:42Liquid Chromatography-Mass Spectrometry (LC-MS) System Setu
  • 04:20Calibration Curve Construction
  • 04:55Sample Collection
  • 05:33Sample Preparation for LC-MS Analysis
  • 06:30Protein Content Assessment and Data Normalization
  • 08:12Results: Representative LC-MS Data of Selected KYNURENINES Determination
  • 09:57Conclusion

Summary

Automatic Translation

Qui descritto è un protocollo per la determinazione di quattro diversi metaboliti del triptofano generati nella via della cinurenina (cinurenina, 3-idrossichinurenina, acido xanturenico, acido 3-idrossiantranilico) nel mezzo raccolto dalle colture cellulari tumorali analizzate dalla cromatografia liquida accoppiata con una singola spettrometria di massa quadrupolo.

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