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Cuantificación simultánea de kynureninas seleccionadas analizadas por cromatografía líquida-espectrometría de masas en medio recogido de cultivos celulares oncológicos
JoVE Journal
Bioengineering
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JoVE Journal Bioengineering
Simultaneous Quantification of Selected Kynurenines Analyzed by Liquid Chromatography-Mass Spectrometry in Medium Collected from Cancer Cell Cultures
DOI:

10:38 min

May 09, 2020

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Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:573-Nitrotyrosine (3NT), Kynurenine (Kyn), 3-Hydroxykynurenine (3HKyn), 3-Hydroxyanthranilic Acid (3HAA), Xanthurenic Acid (XA) and Charcoal Treated Culture Medium Preparation
  • 01:58Calibration Solution Preparation
  • 03:42Liquid Chromatography-Mass Spectrometry (LC-MS) System Setu
  • 04:20Calibration Curve Construction
  • 04:55Sample Collection
  • 05:33Sample Preparation for LC-MS Analysis
  • 06:30Protein Content Assessment and Data Normalization
  • 08:12Results: Representative LC-MS Data of Selected KYNURENINES Determination
  • 09:57Conclusion

Summary

Automatic Translation

Aquí se describe un protocolo para la determinación de cuatro metabolitos triptófanos diferentes generados en la vía kynurenina (kynurenina, 3-hidroxikynurenina, ácido xanthurenic, ácido 3-hidroxiyanthranilic) en el medio recogido de cultivos celulares cancerosos analizados por cromatografía líquida junto con una sola espectrometría de masa cuadrúpeda.

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