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회전 가속도에 따라 쥐에 확산 축 차 뇌 손상의 유도
Chapters
Summary May 9th, 2020
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이 프로토콜은 두개골 골절이나 타박상없이 광범위한 백색 물질 손상을 유도하는 뇌 확산 축축한 손상 (DAI)의 신뢰할 수 있고 수행하기 쉽고 재현 가능한 설치류 모델을 검증합니다.
Transcript
외상성 뇌 손상은 사망과 장애의 주요 원인 중 하나입니다. 확산 축 하 뇌 손상은 TBI 후 개발 광범위 한 축 하 손상. 이 연구에서는 회전 가속 메커니즘 결과 TBI에 따라 유도 확산 축 상 뇌 손상에 대 한 우리의 모델을 제시 하 고 싶습니다.
300 ~ 350 그램의 성인 남성 스프라그-Dawley 쥐를 선택합니다. 쥐 차우와 물 광고 리비툼을 제공합니다. 오전 6:00에서 오후 12:00 사이에 모든 실험을 수행하십시오. 이 장치는 무겁고 안정적인 실험실 테이블에 배치되었습니다.
이 장치는 실린더, 철 중량, 원통형 튜브로 구성된 회전 메커니즘 및 헤드 고정 핀과 같은 구성 요소로 구성됩니다. 무게는 문자열에 부착되어 높이가 120cm로 상승합니다. 자유롭게 떨어지는 무게는 회전 메커니즘을 활성화 하는 볼트 안타.
쥐 측면 헤드 회전 장치는 머리를 0도에서 90도로 빠르게 돌리는 데 사용되었습니다. 유도 후, 축상 뇌 손상을 확산, 쥐는 회복실로 이동되었다. F는 킬로그램에 동물의 머리에 적용 된 힘입니다.
캐피탈 M은 힘의 순간이다, 운동 에너지에 대한 K. 리틀 m은 떨어지는 무게의 질량, 중력 가속을 위한 g, 센티미터의 높이h, D는 센티미터의 귀 핀 사이의 거리입니다. 신경 적자 와 학년 모델 적자의 평가를 위해, 우리는 쥐에 신경 학성 심각도 점수를 사용.
우리는 이동성, hemiplegia, 빔 보행 작업, 빔 보행 작업의 실패를 평가합니다. 빔 밸런싱 작업의 실패는 1.5센티미터 너비입니다. 안정성과 빔 밸런싱, 빔 밸런스 1.5cm 폭 및 반사 신경에 대한 노력.
48 시간 후 부상, 모든 쥐, 부상 및 대조군, 깊이 마취 및 0.9 %의 heparinized 식염수와 함께 전염되었고 0.1 M 인산염 완충성 식염수에 4 %의 포름알데히드의 500 밀리리터가 뒤따랐다. 수혈 후, 참수가 생성되고 뇌는 즉시 제거된 다음 48 시간 동안 4 %의 포름 알데히드 용액으로 고정되었습니다. 뇌는 그 때 소뇌와 두뇌 줄기가 해부되는 동안 후각 전구 얼굴에서 시각 피질에 5 밀리미터 관상 으로 막혔습니다.
파라핀 포함 에 이어, 관상 및 처진 섹션은 시상으로 만들어졌다. 베타 아밀로이드 전구체 단백질의 면역화학적 염색을 생성한다. 다른 시간에 쥐의 다양한 그룹은 계획에 표시됩니다.
실험 의 시작 부분에 축 하 뇌 손상을 확산. 시간에 48 시간, 신경 학성 심각도 점수를 검사했다. 48시간 시점에서, 베타-APP의 면역화학적 염색은 모두 두 군에서 수행되었다.
두 연구 그룹에 대 한 확산 축 하 뇌 손상 다음 48 시간 설명 신경 적자 48 시간. Mann-Whitney 시험은 신경학상 적자가 개입 후 48 시간에 15개의 순진한 쥐에 비해 15개의 확산 축상 뇌 손상 쥐에 대해 상당히 더 크다는 것을 지적했습니다. 쥐에서 고립 된 확산 축 선 뇌 손상 다음 축 하 및 신경 면역 rereactivities를 공개 하는 대표적인 사진 현미경 48 시간 부상 후 시간.
더 작은 세포 문자열은 베타 아밀로이드 전구체 단백질로 검출됩니다. 가짜 그룹에서는 발견되지 않았습니다. 우리의 작업에서, 우리는 회전 가속 메커니즘에 따라 확산 축 하 뇌 손상을 위한 간단 하 고 재현 가능 하 고 신뢰할 수 있는 새로운 모델을 개발.
이러한 모델은 확산 축상 뇌 손상의 병리 생리학의 더 나은 이해와 더 효과적인 치료의 개발을 가능하게 할 것이다. 당신의 관심을 주셔서 대단히 감사합니다.
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