8,302 Views
•
06:14 min
•
May 09, 2020
DOI:
Travmatik beyin hasarı ölüm ve sakatlık nedenlerinden biridir. Diffüz aksonal beyin hasarı TBI sonrası gelişen yaygın bir aksonal hasardır. Bu araştırmada, rotasyonel ivme mekanizması sonucu TBI dayalı indüksiyon diffüz aksonal beyin hasarı hakkında modelimizi sunmak istiyorum.
300 ila 350 gram ağırlığında yetişkin erkek Sprague-Dawley sıçanları seçin. Sıçan chow ve su reklam libitum sağlayın. 06:00 ile 12:00 arasında tüm denemeleri gerçekleştirin. Cihaz ağır ve istikrarlı bir laboratuvar masasına yerleştirildi.
Cihaz aşağıdaki bileşenlerden oluşur: bir silindir, demir ağırlığı, silindirik bir tüpten oluşan bir dönme mekanizması ve kafa sabitleme pimleri. Ağırlık bir dize bağlı ve 120 santimetre yüksekliğe yükselir. Serbestçe düşen ağırlık, dönme mekanizmasını etkinleştiren cıvataya çarpar.
Fare nin lateral kafa rotasyon cihazı, başı hızla sıfırdan 90 dereceye çevirmek için kullanıldı. İndüksiyon sonrası, diffüz aksonal beyin hasarı, sıçan kurtarma odasına taşındı. F, hayvanın kafasına kilogram olarak uygulanan kuvvettir.
Sermaye M kuvvet anı, K kinetik enerji için. Küçük m düşen ağırlığın kütlesi, yerçekimi ivmesi için g, santimetre yükseklik için h ve D santimetre kulak pimleri arasındaki mesafedir. Nörolojik açık ve sınıf model açıklarının değerlendirilmesi için sıçanlarda Nörolojik Şiddet Skoru kullandık.
Biz hareketlilik, hemipleji, Kiriş yürüyüş görevi, kiriş yürüyüş görevi başarısızlık değerlendirmek. Işın dengeleme görevinin 1,5 santimetre genişliğinde arızası. Stabilite ve ışın dengeleme, ışın dengesi 1.5 santimetre genişliğinde ve refleksler üzerinde çaba.
48 saat sonra yaralanma, tüm sıçanlar, yaralanma ve kontrol grubu, derin anestezi ve transkardiyak 0.9% heparinized salin ile perfüzyon ve 0.1 M fosfat tampon salin içinde% 4 formaldehit 500 mililitre izledi. Perfüzyondan sonra, decapitation üretildi ve beyinler hemen çıkarıldı, sonra 48 saat boyunca% 4 formaldehit çözeltisi sabit. Beyincik ve beyin sapları kesilirken beyinler koku ampul ünden görsel kortekse kadar beş milimetrelik koronal kesitlere bloke edildi.
Parafin katıştırma işleminden sonra talamustan koronal ve sagital kesitler yapıldı. Beta-amiloid öncüproteininimmünkimyasal boyamasını üretin. Farklı zamanlarda sıçanların çeşitli gruplar düzeni gösterilir.
Deneyin başında diffüz aksonal beyin hasarı. 48 saat sonra Nörolojik Şiddet Skoru incelendi. 48 saat içinde iki grupta da beta-APP immünokimyasal boyama yapıldı.
İki çalışma grubu için diffüz aksonal beyin hasarından 48 saat sonra resimli nörolojik açık. Mann-Whitney testi, müdahaleden 48 saat sonra 15 naif sıçana kıyasla 15 diffüz aksonal beyin hasarı sıçanda nörolojik açığın önemli ölçüde daha fazla olduğunu göstermiştir. Sıçanlarda 48 saat sonrası izole diffüz aksonal beyin hasarı sonrası aksonal ve nöronal immünoreaktiviteleri ortaya koyan temsili fotomikrograflar.
Beta-amiloid öncüproteini ile daha küçük hücresel dizeler saptanır. Sahte grupta, tespit edilmedi. Çalışmamızda, rotasyonel ivme mekanizmasına dayalı diffüz aksonal beyin hasarı için basit, tekrarlanabilir ve güvenilir yeni bir model geliştirdik.
Böyle bir model diffüz aksonal beyin hasarı ve daha etkili tedavilerin geliştirilmesi patofizyolojisi daha iyi anlaşılmasını sağlayacaktır. İlginiz için çok teşekkür ederim.
Bu protokol, kafatası kırıkları veya çürükler olmadan yaygın beyaz madde hasarına neden olan güvenilir, kolay ve tekrarlanabilir bir kemirgen beyin diffüz aksonal yaralanma (DAI) modelini doğrular.
Read Article
Cite this Article
Frank, D., Melamed, I., Gruenbaum, B. F., Grinshpun, J., Kuts, R., Shvartsur, R., Azab, A. N., Assadi, M. H., Vinokur, M., Boyko, M. Induction of Diffuse Axonal Brain Injury in Rats Based on Rotational Acceleration. J. Vis. Exp. (159), e61198, doi:10.3791/61198 (2020).
Copy