A subscription to JoVE is required to view this content.
You will only be able to see the first 2 minutes.
The JoVE video player is compatible with HTML5 and Adobe Flash. Older browsers that do not support HTML5 and the H.264 video codec will still use a Flash-based video player. We recommend downloading the newest version of Flash here, but we support all versions 10 and above.
If that doesn't help, please let us know.
Induktion af diffus axonal hjerneskade hos rotter baseret på rotationsacceleration
Chapters
Summary May 9th, 2020
Please note that all translations are automatically generated.
Click here for the English version.
Denne protokol validerer en pålidelig, nem at udføre og reproducerbare gnavere model af hjernen diffus axonal skade (DAI), der inducerer udbredt hvide stof skader uden kraniebrud eller kvæstelser.
Transcript
Traumatisk hjerneskade er en af de vigtigste årsager død og handicap. Diffus axonal hjerneskade er en udbredt axonal skade udvikle efter TBI. I denne forskning vil jeg gerne præsentere vores model om induktion diffus axonal hjerneskade baseret på roterende acceleration mekanisme resultat TBI.
Vælg voksne mandlige Sprague-Dawley rotter vejer 300 til 350 gram. Giv rotte chow og vand ad libitum. Udfør alle eksperiment mellem kl. Enheden blev placeret på et tungt, stabilt laboratoriebord.
Anordningen består af følgende komponenter: en cylinder, en jernvægt, en rotationsmekanisme bestående af et cylindrisk rør og hovedfikseringsstifter. Vægten er fastgjort til en streng og forhøjet til højden af 120 centimeter. Den frit faldende vægt rammer bolten, der aktiverer rotationsmekanismen.
Den rotte lateral hoved rotation enhed blev brugt til at dreje hovedet hurtigt fra nul til 90 grader. Efter induktion, diffus axonal hjerneskade, rotte blev flyttet til opsøgningsrum. F er den kraft, der påføres dyrets hoved i kg.
Capital M er kraftens øjeblik, K for kinetisk energi. Lille m er massen af den faldende vægt, g for gravitationel acceleration, h for højde i centimeter, og D er afstanden mellem ørestifterne i centimeter. Til vurdering af neurologiske underskud og grade model underskud, brugte vi Neurologisk Sværhedsgrad Score i rotter.
Vi evaluerer mobilitet, hemiplegi, stråle gå opgave, fiasko i stråle gå opgave. Fejl i strålebalanceringsopgaven bred 1,5 centimeter. Stabilitet og strålebalancering, indsats på strålebalance 1,5 centimeter bred og reflekser.
48 timer efter skaden, alle rotter, skade og kontrolgruppe, var dybt bedøvet og transcardiacally perfunderes med 0,9% hepariniseret saltvand efterfulgt af 500 milliliter 4% formaldehyd i 0,1 M fosfat buffer saltvand. Efter perfusion, halshugning blev produceret og hjernen blev straks fjernet, derefter fastsat i en 4% formaldehyd opløsning i 48 timer. Hjernen blev derefter blokeret i fem millimeter koronale sektioner fra olfaktoriske pære ansigt til den visuelle cortex, mens lillehjernen og hjernestammer blev dissekeret.
Efter paraffin indlejring, koronal og sagittal sektioner blev foretaget fra thalamus. Producere immunkemiske farvning af beta-amyloid forløber protein. De forskellige grupper af rotter på forskellige tidspunkter er vist på ordningen.
Diffus axonal hjerneskade i begyndelsen af eksperimentet. På tidspunktet 48 timer blev neurologisk sværhedsgradsscore undersøgt. På tidspunktet for 48 timer blev der udført immunkemisk farvning af beta-APP i alle to grupper.
Illustreret neurologisk underskud 48 timer efter diffus axonal hjerneskade for to studiegrupper. En Mann-Whitney test viste, at neurologiske underskud var betydeligt større for 15 diffus axonal hjerneskade rotter sammenlignet med 15 naive rotter på 48 timer efter intervention. Repræsentative fotomikrografer, der afslører aksonale og neuronale immunoreactivities efter isoleret diffus axonal hjerneskade hos rotter 48 timer efter skaden.
Mindre cellulære strenge påvises med beta-amyloid forløber protein. I sham gruppe, blev det ikke opdaget. I vores arbejde udviklede vi en enkel, reproducerbar og pålidelig ny model til diffus axonal hjerneskade baseret på rotationsaccelerationsmekanisme.
En sådan model vil muliggøre en bedre forståelse af patofysiologi af diffus axonal hjerneskade og udvikling af mere effektive behandlinger. Mange tak for deres opmærksomhed.
Related Videos
You might already have access to this content!
Please enter your Institution or Company email below to check.
has access to
Please create a free JoVE account to get access
Login to access JoVE
Please login to your JoVE account to get access
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Please enter your email address so we may send you a link to reset your password.
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Your JoVE Unlimited Free Trial
Fill the form to request your free trial.
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Thank You!
A JoVE representative will be in touch with you shortly.
Thank You!
You have already requested a trial and a JoVE representative will be in touch with you shortly. If you need immediate assistance, please email us at subscriptions@jove.com.
Thank You!
Please enjoy a free 2-hour trial. In order to begin, please login.
Thank You!
You have unlocked a 2-hour free trial now. All JoVE videos and articles can be accessed for free.
To get started, a verification email has been sent to email@institution.com. Please follow the link in the email to activate your free trial account. If you do not see the message in your inbox, please check your "Spam" folder.
