Journal
/
/
אינדוקציה של פגיעה מוחית Axonal בחולדות מבוסס על האצת הסיבוב
JoVE Journal
Neuroscience
Author Produced
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Neuroscience
Induction of Diffuse Axonal Brain Injury in Rats Based on Rotational Acceleration

אינדוקציה של פגיעה מוחית Axonal בחולדות מבוסס על האצת הסיבוב

8,319 Views

06:14 min

May 09, 2020

DOI:

06:14 min
May 09, 2020

7 Views
, , , , , , , , ,

Transcript

Automatically generated

פגיעה מוחית טראומטית היא אחת הסיבות העיקריות למוות ונכות. פגיעה מוחית אקסונאלית מפוזרת היא נזק אקסונאלי נרחב להתפתח לאחר TBI. במחקר זה, אני רוצה להציג את המודל שלנו על אינדוקציה לפזר פגיעה מוחית אקסונאלית מבוסס על מנגנון האצה סיבובית התוצאה TBI.

בחר זכר בוגר חולדות ספראג-דאולי במשקל 300 עד 350 גרם. לספק צ’או עכברוש ומים עד ליביום. בצע את כל הניסויים בין השעות 06:00 עד 12:00. המכשיר הונח על שולחן מעבדה כבד ויציב.

המכשיר מורכב מהרכיבים הבאים: גליל, משקל ברזל, מנגנון סיבובי המורכב מצינור גלילי וסיכות קיבוע ראש. המשקל מחובר למחרוזת ומוגבה לגובה של 120 ס”מ. המשקל הנופל בחופשיות פוגע בבורג המפעיל את מנגנון הסיבוב.

מכשיר סיבוב ראש החולדה שימש לסובב את הראש במהירות מאפס ל-90 מעלות. לאחר אינדוקציה, פגיעה מוחית אקסונאלית מפוזרת, חולדה הועברה לחדר ההתאוששות. F הוא הכוח המוחל על ראשו של בעל החיים בקילוגרמים.

קפיטל אם הוא הרגע של הכוח, K לאנרגיה קינטית. מ ‘ קטן הוא המסה של המשקל הנופל, g עבור תאוצה כבידתית, h לגובה בסנטימרים, ו- D הוא המרחק בין סיכות האוזן בסנטימרים. להערכת גירעון נוירולוגי וגירעונות מודל כיתה, השתמשנו ציון חומרה נוירולוגית בחולדות.

אנו מעריכים ניידות, hemiplegia, משימת הליכה קרן, כישלון במשימה הליכה קרן. כישלון של משימת איזון קרן רחב 1.5 ס”מ. יציבות ואיזון קרן, מאמץ על מאזן קרן ברוחב 1.5 ס”מ רפלקסים.

48 שעות לאחר פציעה, כל החולדות, פציעה קבוצת ביקורת, היו מאוד הרדמה ו transcardiacally perfused עם 0.9% הפריניזציה מלוחים ואחריו 500 מיליליטר של 4% פורמלדהיד ב 0.1 M פוספט חיץ מלוחים. לאחר זיבול, עריפת ראש נוצרה והמוח הוסר מיד, ולאחר מכן תוקן בתסכום פורמלדהיד 4% במשך 48 שעות. המוח נחסם לאחר מכן לחמישה חלקים מילימטר coronal מפנים הנורה חוש הריח לקליפת המוח החזותית בעוד המוח הקטן וגבעולי המוח נותקו.

בעקבות הטמרת הפרפין, חלקים קורונטל ו sagittal נעשו מן התלמוס. מייצרים את הכתם האימונוכימי של חלבון בטא עמילואיד מבשר. קבוצות שונות של חולדות בזמנים שונים מוצגים על התכנית.

פגיעה מוחית אקסונאלית מפוזרת בתחילת הניסוי. בזמן 48 שעות, ציון חומרה נוירולוגית נבדק. בזמן 48 שעות, כתמים אימונוכימיים של בטא APP בוצע בכל שתי הקבוצות.

גירעון נוירולוגי מאויר 48 שעות לאחר פגיעה מוחית אקסונאלית מפוזרת עבור שתי קבוצות מחקר. בדיקה של מאן-וויטני הצביעה על כך שהגירעון הנוירולוגי היה גדול משמעותית עבור 15 חולדות פגיעה מוחית אקסונאליות מפוזרות בהשוואה ל-15 חולדות תמימות ב-48 שעות לאחר ההתערבות. פוטומיקרוגרפים מייצגים החושפים חיסוניות אקסונאלית ונוירונים בעקבות פגיעה מוחית אקסונאלית מפוזרת מבודדת בחולדות 48 שעות לאחר הפציעה.

מחרוזות תאיות קטנות יותר מזוהות עם חלבון בטא עמילואיד מבשר. בקבוצה מזויפת, זה לא זוהה. בעבודה שלנו, פיתחנו מודל חדש פשוט, ניתן לשחזור ואמין לפגיעה מוחית אקסונאלית מפוזרת המבוססת על מנגנון האצה סיבובי.

מודל כזה יאפשר הבנה טובה יותר של פתופיזיולוגיה של פגיעה מוחית אקסונאלית מפוזרת ופיתוח טיפולים יעילים יותר. תודה רבה לך על תשומת הלב שלך.

Summary

Automatically generated

פרוטוקול זה מאמת אמין, קל לבצע ולהציג מכרסם מודל של פגיעה במוח מפוזר סיבי (DAI) הגורמת נזק לבנים נרחבים ללא שברים הגולגולת או חבורות.

Read Article