Journal
/
Biochemistry
/
Identifizierung der Bindungsproteine kleiner Liganden mit der differentiellen radialen Kapillarwirkung des Ligandenassays (DRaCALA)
JoVE Journal
Biochemistry
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Biochemistry
Identifying the Binding Proteins of Small Ligands with the Differential Radial Capillary Action of Ligand Assay (DRaCALA)
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

Identifizierung der Bindungsproteine kleiner Liganden mit der differentiellen radialen Kapillarwirkung des Ligandenassays (DRaCALA)

DOI:
10.3791/62331-v

•

09:26 min

•

March 19, 2021

•

, ,
1Department of Biology,University of Copenhagen

Chapters

  • 00:05Introduction
  • 00:42Preparation of Whole Cell Lysates
  • 01:43Nickel-Nitrilotriacetic Acid (Ni-NTA) Affinity Purification of Relseq and GppA
  • 02:55Gel Filtration
  • 03:33Synthesis of 32P-Labeled Guanosine Pentaphosphate (pppGpp) and Guanosine Tetraphosphate (ppGpp)
  • 05:08DRaCALA Screening of the Target Proteins of (p)ppGpp
  • 06:37Quantification and Identification of Potential Target Proteins
  • 07:46Results: DRaCALA Plate Screening and Quantification
  • 08:39Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Der Differential Radial Capillary Action of Ligand Assay (DRaCALA) kann verwendet werden, um kleine ligandenbindende Proteine eines Organismus unter Verwendung einer ORFeome-Bibliothek zu identifizieren.

Tags

DRaCALASmall Signaling MoleculesEffector ProteinsOVium LibraryE. ColiIPTGLysis BufferNickel-NTA ResinWashing BufferElution BufferGel Filtration

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

Identifizierung von kleinen Molekülen-bindende Proteine ​​in nativer zellulären Umgebung von lebenden Zellen Photoaffinitatsmarkierung

Verfahren zur Identifizierung von niedermolekularen Inhibitoren des Protein-Protein-Wechselwirkung zwischen HCN1- und TRIP8b

Messprofile biomolekularen DSC mit thermolabilen Liganden schnell zu charakterisieren, Falt- und bindende Wechselwirkungen

Stickstoff-Kavitation und differentielle Zentrifugation ermöglicht eine Überwachung der Verteilung von peripheren Membranproteinen in kultivierten Zellen

Rab10 Phosphorylierung Erkennung von LRRK2 Aktivität mit SDS-PAGE mit einem Phosphat-Bindung

Erfassung der Interaktion Kinetics eines Ionenkanals Proteins mit kleinen Molekülen durch die Bio-Schicht Interferometrie Assay

Methode für effiziente Umfaltung und Reinigung des Chemorezeptor-Liganden-bindende Domäne

Erkennung von kleine GTPase Prenylation und GTP binden mit Membran Fraktionierung und GTPase verbundene Immunosorbentprobe Assay

Analyse der AtHIRD11 inneren Unordnung und Bindung in Richtung Metallionen durch Kapillare Gelelektrophorese und Affinität Kapillarelektrophorese

Eine semi-High-Throughput-Anpassung des NADH-gekoppelten ATPase-Assays zum Screening kleiner Molekülinhibitoren

Read Article