Journal
/
Biology
/
In vitro Analyse af E3 Ubiquitin Ligase Funktion
JoVE Journal
Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Biology
In Vitro Analysis of E3 Ubiquitin Ligase Function

In vitro Analyse af E3 Ubiquitin Ligase Funktion

DOI:
10.3791/62393-v

•

06:06 min

•

May 14, 2021

•

, , ,
1Institute for Genetics and Cologne Excellence Cluster on Cellular Stress Responses in Aging Associated Diseases (CECAD),University of Cologne, 2Center for Molecular Medicine Cologne,University of Cologne

Chapters

  • 00:05Introduction
  • 00:43In Vitro Auto-Ubiquitylation Assay
  • 01:31In vitro Substrate Ubiquitylation Assay
  • 02:13Lysine Discharge Assay
  • 03:37Results: Analysis of the Ubiquitylation Products
  • 05:28Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Denne undersøgelse giver detaljerede in vitro allestedsnærværende assay protokoller til analyse af E3 ubiquitin ligase katalytisk aktivitet. Rekombinante proteiner blev udtrykt ved hjælp af prokaryote systemer såsom Escherichia coli kultur.

Tags

E3 Ubiquitin LigaseIn Vitro AnalysisE2 Enzyme SpecificitySubstrate SelectionUbiquitin TransferAuto-ubiquitylation AssaySubstrate Ubiquitylation AssayLysine Discharge AssayRecombinant ExpressionEukaryotic ProteinsSDS-PAGEThermal CyclerMaster MixEDTAApyrase

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

Analysis of Schwann-astrocyte Interactions Using In Vitro Assays

In vitro-analyse af PDZ-afhængige CFTR Makromolekylære signalering Komplekser

Analyse af genfunktioner og Visualisering af Cilia er genereret Fluid Flow i Kupffer s vesikel

siRNA Screening at identificere Ubiquitin og ubiquitinlignende System Regulators Biologisk Pathways i dyrkede pattedyrceller

Analyse af Nephron opbygning og funktion i Voksen Zebrafisk Kidney

Funktionel Opløsning og kanalaktivitet Målinger af renset Vildtype og Mutant CFTR Protein

Omfattende arbejdsgang for Genome-wide identifikation og udtryk Meta-analyse af ATL E3 Ubiquitin Ligase gen familie i Grapevine

In Vitro SUMOylation analyse at studere SUMO E3 Ligase aktivitet

Analyse af Beta-celle funktion ved hjælp af encellede opløsning Calcium Imaging i zebrafisk Holme

Organoidafledt epitelmonolag: En klinisk relevant in vitro-model til tarmbarrierefunktion

Read Article