Journal
/
Biology
/
Introduksjon Analyse av E3 Ubiquitin Ligase-funksjonen
JoVE Journal
Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Biology
In Vitro Analysis of E3 Ubiquitin Ligase Function

Introduksjon Analyse av E3 Ubiquitin Ligase-funksjonen

DOI:
10.3791/62393-v

•

06:06 min

•

May 14, 2021

•

, , ,
1Institute for Genetics and Cologne Excellence Cluster on Cellular Stress Responses in Aging Associated Diseases (CECAD),University of Cologne, 2Center for Molecular Medicine Cologne,University of Cologne

Chapters

  • 00:05Introduction
  • 00:43In Vitro Auto-Ubiquitylation Assay
  • 01:31In vitro Substrate Ubiquitylation Assay
  • 02:13Lysine Discharge Assay
  • 03:37Results: Analysis of the Ubiquitylation Products
  • 05:28Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Den nåværende studien gir detaljerte in vitro ubiquitylation analyseprotokoller for analyse av E3 ubiquitin ligase katalytisk aktivitet. Rekombinante proteiner ble uttrykt ved hjelp av prokaryote systemer som Escherichia coli-kultur.

Tags

E3 Ubiquitin LigaseIn Vitro AnalysisE2 Enzyme SpecificitySubstrate SelectionUbiquitin TransferAuto-ubiquitylation AssaySubstrate Ubiquitylation AssayLysine Discharge AssayRecombinant ExpressionEukaryotic ProteinsSDS-PAGEThermal CyclerMaster MixEDTAApyrase

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

Analysis of Schwann-astrocyte Interactions Using In Vitro Assays

In Vitro Analyse av PDZ-avhengige CFTR makromolekylær signalveier Komplekser

Analyse av gen-funksjon og visualisering av Cilia-generert Væskestrøm i Kupffer sin Vesikkel

siRNA Screening for å identifisere Ubiquitin og Ubiquitin-lignende system regulatorer av biologiske mekanismer i dyrkede pattedyrceller

Analyse av Nephron sammensetning og funksjon i voksen Sebrafisk Nyre

Funksjonell tilberedning og Channel Aktivitet Målinger av Renset villtype og Mutant CFTR Protein

Omfattende arbeidsflyten for genomet-identifikasjon og uttrykk Meta-analyse av ATL E3 Ubiquitin Ligase Gene familien i Grapevine

In Vitro SUMOylation analysen å studere SUMO E3 Ligase aktivitet

Analyse av Beta-celle-funksjonen bruker encellede oppløsning kalsium Imaging i sebrafisk holmer

Organoid-avledet epitelmonolayer: En klinisk relevant in vitro-modell for tarmbarrierefunksjon

Read Article