Mikro-Bilgisayarlı Tomografi ile Çıplak Fareler içine İnsan Yağ Enjeksiyonu Canlılığına Değerlendirilmesi

* These authors contributed equally
Medicine

Your institution must subscribe to JoVE's Medicine section to access this content.

Fill out the form below to receive a free trial or learn more about access:

 

Cite this Article

Copy Citation | Download Citations

Atashroo, D. A., Paik, K. J., Chung, M. T., McArdle, A., Senarath-Yapa, K., Zielins, E. R., Tevlin, R., Duldulao, C. R., Walmsley, G. G., Wearda, T., Marecic, O., Longaker, M. T., Wan, D. C. Assessment of Viability of Human Fat Injection into Nude Mice with Micro-Computed Tomography. J. Vis. Exp. (95), e52217, doi:10.3791/52217 (2015).

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

Lipotransfer vücutta yumuşak doku eksikliklerinin tedavisinde cerrahın araçları arasında önemli bir araçtır. Yağ o, hazır kolayca elde ucuz ve doğal biyo-uyumlu olarak ideal bir yumuşak doku dolgu olduğunu. 1 Ancak, gelişen popülariteye rağmen, yağ grefti 10 yerde değişen yayınlanan tutma oranları ile, öngörülemeyen sonuçlara ve değişken greft sağkalım tarafından engellenmektedir -80%. 1-3

Yağ grefti ile ilgili soruşturma kolaylaştırmak için, biz bu nedenle enjekte yağ hacmi tutma gerçek zamanlı analiz için izin veren bir hayvan modeli geliştirdik. Kısaca, küçük bir kesik, bir CD-1 çıplak farenin derisi yapılır ve işlenmiş lipoaspirate 200-400 ul kafatası üzerine yerleştirilir. kafa derisi çünkü yardımları kafatasında tarafından sağlanan mükemmel arka plan kontrast, nedeniyle yerli deri altı yağ onun yokluğunda alıcı yeri olarak seçilen veAnaliz süreci. Mikro-bilgisayarlı tomografi (mikro-CT) başlangıçta greft ve bundan sonra her iki haftada bir tarama için kullanılır. BT görüntüleri yeniden inşa edilir ve bir görüntüleme yazılımı greft hacimlerini ölçmek için kullanılır.

Geleneksel teknikler ex vivo fiziksel ölçümleri ile greft ağırlık ve hacim sadece tek bir değerlendirme sağlamak için çalışma hayvanı euthanizing zorunlu olan yağ grefti hacmini değerlendirmek için. Biyokimyasal ve histolojik karşılaştırmaları aynı şekilde ötenazi için çalışma hayvanı gerektirmiştir. Bu tarif görüntüleme tekniği çalışması hayvan kurban zorunda kalmadan görselleştirme ve objektif ilk aşılama sonrası çoklu zaman noktalarında hacmi miktarının avantajı sunuyor. tekniği büyük greftler, risk deri ve yağ nekrozu olarak enjekte edilmesi mümkün greft boyutu ile sınırlıdır. Bu yöntem yağ grefti canlılığını ve hacim tutma değerlendiren tüm çalışmalar için yarar vardır. Özellikle providi çok uygundurYağ grefti bir görsel temsilini ng ve zamanla hacim değişiklikleri takip.

Protocol

NOT: Deneysel protokoller ve yağ elde etmek için hasta onam formları gözden ve Stanford Üniversitesi Kurumsal Değerlendirme Kurulu (Protokol # 2188) tarafından onaylanmıştır. Tüm hayvan prosedürleri Protokol # 9999 kapsamında Laboratuar Hayvan Bakımı (APLAC) Stanford İdari Heyeti tarafından kabul edildi. Tüm deneyler hayvan güvenliği ve insani bakım kurallarına sıkı sıkıya bağlı kalmanın ile yapılmıştır.

1. Yağ Toplama

  1. Coleman prosedür 17-19 kullanarak, seçmeli liposuction uygulanan sağlıklı kadın hastaların karın, kanadını, ve / veya uyluk bölgelerinden insan yağ dokusu edinin.
  2. Aşılama için lipoaspirate işlemek için, yağ 30 dakika yerleşmek için izin vererek başlar.
  3. Lipoaspirate genellikle altta üstündeki yağ, ortada yağ ve kan, üç katmanları içine yerleşir. Aspire ve üst petrol tabakası ve alt kan katmanı atın.
  4. Ayrıca kalan tumesc kaldırmak içinent akışkan ya da hücre döküntüsü, 350 x g'de 5 dakika 4 ° C yağ santrifüj ve alt sulu tabaka aspire.
  5. % 20 dağıtım hata sağlayan, aşılama için gerekli olan yağ miktarını hesaplayın ve 50 ml konik (lar) istenen yağ hacmi aktarın. Aşılama için gerekli olan yağ mikrolitre elde etmek için çalışma fare sayısı olarak 400 ile çarpın.
  6. Bu noktada, performans Celi Lipotransfer 20,21 Destekli ise, buz üzerinde aşılama için yağın yer hacmi. Sonra Zuk ve ark 22 tarafından tarif edilen standart tekniği kullanılarak, kalan yağdan yağ kaynaklı stromal hücreler (TSK) hasat.

2. Yağ Tırnak

  1. Kadın, deneysel çalışma için homozigot CD-1 çıplak fareler edinin. Yaş 12 hafta - 8 arası fareler seçin.
  2. Yaklaşık 10 dakika boyunca, 2 L / dakika ile% 2.5 izofluran / oksijen karışımı ile bir portatif kutu içine anestezi yer fare teşvik etmek için. Tavsiye isof unutmayınlurane doz fare suşu ile değişir.
  3. Fare solunum hızı yavaşladı zaman bir ayak tutam yeterli sedasyon onaylayın. Fare hem gözlere veteriner yağlama oftalmik merhem sürün.
  4. Fare ayak tutam yanıt olarak korkmak etmez, bu anestezi yeterli bir düzlem teyit etmektedir. / Dak 1-2 L% 2.5 izofluran / oksijen karışımı teslim bir roket ucu konisi içine farenin burnunu yerleştirin. Fare ayak tutam gelen çekilir ise, 5 dakika sonra yok etme kutusu ve tekrar test dönün.
  5. % 70 etanol solüsyonu ardından% 2.5 povidon-iyot ile kafa derisi sterilize sonra farenin altındaki steril alan ayarlayın ve. İki kez daha tekrarlayın.
  6. Fare üzerinde cerrahi perdeler yerleştirin ve steril alan korumak için dikkatli olun. Steril cihazlar, eldiven ve PPE her zaman kullanılmalıdır.
  7. Yağ hacmi, daha önce buz üzerine yerleştirildi aşılanmak için, önce teslim edilmeden önce oda sıcaklığına kadar ayarlamak için yağ sağlar.
  8. 1 ml ile 1 ml Luer-kilit şırınga Backloadşişman.
  9. Şırınganın ucuna bir 14 G, 8 cm uzunluğunda yağ grefti kanül bağlayın.
  10. Yağ 200 ila 400 ul kadar şırınga itme asal sistem şırınga içinde kalır. Şırınga itme yaparken kanül tamamen uzak kanül delik çıkan yağ gözlemleyerek yağ ile dolu olduğunu onaylayın.
  11. Ince forseps kullanarak, kafatasının kaudal-en yönü örten orta hatta dorsal cilt kaldırın. Ince makas kullanarak deride kesilmiş bir 1.5 mm yapın.
  12. Daha sonra aşılama gerçekleştirildikten sonra yara araya kenarları getirmek için kullanılacak kesme ortasından tek 6-0 naylon dikiş yerleştirin. Sütürü.
  13. Cilt kesisi ile kanül takılması ve örten deride herhangi bir bağ dokusu ekleri ücretsiz kafatası üzerinde bir yelpaze şeklinde desen ileri geri kanül geçirerek kafatası üzerinde deri altı cebe oluşturun.
  14. Cep oluşturulduktan sonra, c konumunaDoğrudan ucu kadar kafatası üzerinde fare orta hatta annula sadece göz arasında çizilen bir çizginin gerisinde olmalıdır cebinden rostral-en yönü yatıyor. (Şekil 1A)
  15. Yavaşça geri kanül çekerken pistonu ilerleyen, retrograd olarak yağ enjekte. Forseps kullanarak, bir araya yara kenarlarını getirmek ve cebinden sızmasını herhangi bir yağ tutmak için onları yukarı kaldırın.
  16. Daha önce ilk düğüm cilt hafifçe yatıyor emin, yerleştirildi dikiş kravat. Üç kare knot kravat ve 3 mm kuyruğu ile dikiş kesti. (Şekil 1B)
  17. Görselleştirme ve cep doldurulmadığından ve cep örten deri gergin değildir manuel palpasyon ile onaylayın. Cep doldurursanız, dikiş kesim ve cebinden içinde tüm yağ çıkarmak. Fosfat tamponlu tuzlu su (PBS), pH 7.4 ile cep yıkayın ve yağ daha küçük bir hacmi yeniden enjekte edilir.
  18. Bir fareyi çıkarınkendisi tarafından temiz bir kafes içinde onun arkasında veya yanında nesthesia ve yer. Düzenli nefes normal hareketler, kanama olmaması ve ağrı veya sıkıntı belirtileri hayvan izleyin. Hayvan acı ise kadar 48 saat boyunca buprenorfın 0.1 mg / kg subkutan her 6 saat yönetme.
  19. Hayvan katılımsız ayrılmadan önce sternum yatma korumak için yeterince uyandı emin olun. Tamamen iyileşene kadar diğer hayvanlarla bir kafese hayvan koymayın.
  20. 4 saat sonra, hayvan yemek ve içmek hareket ve normal nefes mümkün olduğundan emin olun ve ameliyat sitesinden kanama hiçbir olduğunu. Hayvan bakım tesisi için dönün.

3. Mikro-BT

  1. Tarama ameliyat sonrası 3. günde başlangıç ​​hacmi fareler ve ameliyat sonrası 2, 4, 6 ve 8 taramalar tekrarlayın.
  2. Her zaman noktasında fareler görüntüleme yaparken, S daha önce belirtildiği gibi öncesi ve işlem sonrası sedasyon ve hayvan bakım yönergeleri izleyin2,2-2,4 ve 2,17-2,19 Teps'in.
  3. 100 mm veya daha iyi bir rekonstrüksiyon voksel boyutu ile bir mikro-CT tarayıcı taramalar yapın.
  4. 80 kVp bir tepe X-ışını kilovoltajin 450 uA bir anot akımı, her bir fare için bir 9 dakika tarama sırasında yaklaşık 5 centiGy bir katyon dozunun tatbik edilmesi. Bu değerler tarama protokolü bağlı olarak değişebilir unutmayın.
  5. İlk tarama yapmadan önce, hava, su ve kemik yoğunluğu arasında ayırım bir görüntüleme fantom mikro-BT kalibre.
  6. İki üst fareler ve altta iki ile ventral pozisyonda tarayıcı içine dört fareler yerleştirin. Bir tarama yatak kolayca fare gövdesini ve burun konileri gibi 10 ml şırınga tutmak için 60 ml şırınga kullanılarak inşa edilebilir. 23
  7. Dakika başına 1-2 L% 2.5 izofluran / oksijen karışımı ile anestezi altında fareler koruyun.
  8. Izci görüntü ile onaylayın ilk servikal vertebra için burundan ve kafatasının üst SKU tabanına fare tüm kafatası,ll, görüntülü edilecektir.

4. Mikro-BT Analizi

  1. Piksel yoğunluğu için eşikler kullanarak vokselleri seçerek İlgi Bölgeler oluşturulmasını sağlayan bir mikro-BT görüntüleme analiz yazılımı (ROI) ile yeniden görüntüleri açın. Yazılım ayrıca 3D oluşturulması seçilen voksellerin enterpolasyon yoluyla yüzeyleri ve hacim analizi için izin verir.
  2. İki boyutlu (2D) koronal, aksiyel, sagital ve görünümlerde yeniden BT görüntüleri yükleyerek başlayın. (Şekil 2A)
  3. Bir kılavuz olarak eksenel dilim kullanarak, yağ grefti en sol yanına gelir sagital dilim gidin. Yağ grefti karşılık gelen tüm vokselleri yakalar piksel yoğunluğu için bir üst ve alt eşiği seçin, ama bu çevredeki doku ve kemik dışlar. (Şekil 2B)
  4. Daha önce tanımlanmış piksel yoğunluğu eşik kullanarak yağ grefti karşılık sagital görünümde bir ROI tanımlayın. Rgreft sağ-en-boy ulaşana kadar navigasyon, bu prosedürü her beşinci sagital dilim EPEAT. (Şekil 2C)
  5. Tek bir birleşik 3D ROI içine tüm 2D ROI yıllardan seçilen vokselleri enterpolasyon. (Şekil 2B)
  6. Yazılım tarafından hesaplanan Kayıt ROI hacmi.
  7. Nihai yağ grefti hacmi görselleştirmek için 3D isosurface Render. (Şekil 2E)
  8. Sonraki analizlerde, piksel yoğunluğu maksimum ve minimum eşik değerleri temel analizi için kullanılan aynı tutmak için emin olun.

5. Yağ Hasat

  1. Fareler hafta 8 24,25 zaman noktası için tarandıktan sonra, daha önce Steps 2,2-2,4 ve 2,17-2,19 yukarıda açıklandığı gibi fareler uyutmak.
  2. APLAC yönergeleri izleyerek, onların omurilik sütunları ayırarak fareler euthanize.
  3. Operatif alanda fare yerleştirin. Tenotominin makas kullanarak dikkatlice cep açın ve t teşrihO yağ grefti gelen deri ve bağ dokusu ekleri örten.
  4. Bu noktada, greft ekstre yardımcı olmak için üstteki sırt derisi yaması çıkarılması için yardımcı olabilir. (Şekil 3A)
  5. Hafifçe forseps ile greft üzerindeki çekişi muhafaza ve makas ile serbest gereken gerginlik ardışık noktaları görselleştirmek için bir taraftan diğerine greft çevirin.
  6. Greft ile çekilen bağ dokusu en aza indirmek için eksize mümkün olduğu greft olarak yakın kalmak. (Şekil 3B)
  7. Greft eksize sonra, en az 0.01 gram doğru bir daralı ölçekte kitle ölçün.
  8. Ölçülen kütle değeri kullanılarak yağ greft hacmi ve bir dönüşüm oranı, insan yağ ortalama yoğunluğu (0.9 g / mi) hesaplayın.
  9. Mikro-CT kullanılarak elde edilen yağ grefti hesaplanan hacmi karşılaştırın.
  10. Gerekirse yağ greft histoloji veya daha fazla analiz için işlenebilir.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Yağ greftler giderek Hafta 8 tarama bitiminde 8. Hafta (Şekil 4A) tarafından% 62.2 ortalama sağkalım 24 sonuçlanan, çalışma boyunca hacmi azaldı, her yağ grefti tek parça ekstre edildi. Bir Wilcoxan rank sum testi ya mikro-BT ile elde edilen veya fiziksel kitle hesaplanan yağ greft hacmi ölçümleri arasındaki farkı karşılaştırmak için kullanıldı. Anlamlı bir fark bu iki yöntem (iki taraflı p-değeri = 0,9362) arasında bulunmuştur. (Şekil 4B)

Tarama başına 5 centiGy beş tarama zaman noktalarında, her bir fare, tüm çalışma boyunca 25 centiGy toplam en fazla almıştır. Buna uygun olarak, farelerin hiç biri, deri, radyasyon yanıkları herhangi brüt kanıt göstermiştir.

Şekil 1,
Şekil 1. (A) (B) tamamlanmış yağ grefti üzerine Çıplak fare, bir tek naylon sütür ile yara getirmek için kullanılan Birlikte kenarları. cep dolu ama gergin değil olmuştur.

Şekil 2,
Yeniden görüntüler başlangıçta eksenel, koronal ve sagital görünümlerinde görüntülenen Şekil 2. (A). (B) sagital görünümü greft sol çoğu yönüne gitmek için bir rehber olarak eksenel görünümünü kullanma. Tüm vokselden böylece yağ dokusu temsil yağ grefti hacminin sınır sağlayacak eşik aralığında seçilmiş, böylece (C). Piksel yoğunluğu için bir eşik ayarlama ROI greft sol en yönü başlayan sagital görünüm tanımlanan ve devam hiçgreft diğer ucuna hareket eden y beşinci dilim. (D) 2D ROI tek bir 3D ROI yansıtılmadan Tüm seçilmiş vokselden. (E) Üç boyutlu yüzey toplam yağ grefti hacimleri görselleştirmek için kübik spline enterpolasyon-kullanılarak oluşturuldu .

Şekil 3,
Kaldırıldı cilt dorsal yama ile eksplantasyonunun önce Şekil 3. (A) Yağ grefti,. (B) açıklama yapıldı Yağ grefti.

Şekil 4,
Şekil 4. (A) Mikro-BT hacimsel analiz sekiz hafta boyunca yağ grefti hacminin kademeli kaybı göstermiştir. Mikro-BT ile ölçülen (B) Nihai yağ grefti hacimleri, aşılanmış yağ grefti kitleler hesaplanan hacimlerinin yakından geldis. İnsan yağ (0.9 g / ml) ortalama yoğunluğu bir dönüşüm oranı olarak kullanılmıştır.

Tablo 1
Gerçek Ölçülen Yağ Cilt 24 vs Tablo 1. Hesaplanan Mikro-BT Hacim

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Bu noktaya kadar, pek çok araştırmacı yağ greftlerinin uzun süreli sağkalım ölçmek olmayan görüntüleme yöntemleri dayanıyordu, ancak bu yöntemler çalışma hayvanın kurban gerektirir ve sadece tek bir ölçüm elde var. 3,10-12 Çalışmamız temsil bir fare modelinde yağ aşı yaşamda kalması amacı, gerçek zamanlı kantitatif izin geliştirilmiş bir analiz metodu.

Bu süreçte kritik bu sağlam bağışıklık sistemine sahip fare kullanıldığında ortaya çıkabilecek greft reddini engellemektedir yeterince bağışıklık yetersizliği fareler araştırmada kullanılmıştır sağlanmasıdır. Yağ bütünlüğünü koruyarak grefti hasat, işleme ve yerleştirme aşamalarında önemlidir. Geleneksel kabul görmüş standartlara uygun olarak, aşılama için yağ emme yardımlı liposuction (SAL) tarafından alınmalıdır. Yerleştirme sırasında, yağ herhangi bir hızlı 0.5 mi / saniye değerinden daha sabit bir akış hızında enjekte edilir. Bir 14 ayar kanül i aşılama için tercih edilirna fare, ancak daha büyük çaplı kanüller yağ herhangi bir yaralanma olmaksızın kullanılabilir. Onlar artan kesme stres arıza yağ neden olabilir küçük kanüller ve iğneler-özellikle de daha dar 16-göstergesi olan yerleştirme sırasında cesareti. Yukarıda da çökeltme, santrifüj ve / veya filtrasyon herhangi bir kombinasyonu işlemek için tercih edilen bir teknik, her ne kadar uzun yağı ve kan tabakalar yeterli önce aşılama için yağdan ayrılır olarak kullanılabilir.

Yağ grefti nedeniyle yağ grefti tutarsız doğası sonuçlarında değişimini en aza indirmek için boyutunda en az 200 ul olmalıdır. Boyutu 400 ul kadar büyük greftler kullanılabilir, ancak bu hacim üstünde, bozulmuş vasküler arz ve aşırı cilt gerginliği yağ ve cilt nekrozu neden olabilir. Sonuç olarak, maksimum yağ greft boyutu yüzey alanı ve cep hacmi ile belirlenir. , Po güvenle teslim edilebilir bir greft hacmini artırmak içincket daha kapsamlı diseksiyon ile genişletilebilir. Ancak, bu greft ve daha az net çevreleyen doku arasındaki kontrastı yapacak kafatasının üst sınırları ötesinde yağ koyabilirsiniz. Bu nedenle, sonraki voksel seçimi daha zor olacak.

Ilk cilt insizyonu yeterince küçük olduğu takdirde, bir ameliyat dikiş ipliği, yağ ihtiva ettiği kalır ve cebinden sızıntı görülmez sürece gerekli olabilir. Bir dikiş konursa, bakım, aksi takdirde cilt dökümü meydana gelebilir, çok sıkı ilk düğüm için değil alınmalıdır. Enflamatuar reaksiyonu sınırlayan ve enfeksiyon liman daha az olasıdır gibi naylon gibi bir emilmeyen monofilament sütür, tercih edilir. Kesi yeniden epitelizasyon 24 saat 48 ameliyat sonrası içinde meydana gelecek ve dikiş şu anda kaldırılmış olabilir. Emilebilir ve örgülü dikiş kullanılmamalıdır. Cilt her zaman gerekli en az kuvvet ile ele alınmalıdır, ve cerrah cildi ezmek için değil, özenyara kenarlarını yukarı tutarak.

Müfettişlerin 'görüntü analiz yazılımına bağlı olarak, piksel yoğunluğu ve doku yoğunluğu arasındaki ilişki tam olarak değişebilir. Müfettişler, en doğru çevredeki doku yağ grefti ayıran bir maksimum ve minimum aralığı elde etmek için piksel yoğunluğu eşik seçmelisiniz. her birim tutarlılığı korumak için analiz esnasında aynı maksimum ve minimum eşik değerleri kullanılır.

Piksel yoğunluğu eşik değerleri ayarlandıktan sonra greft hacmi seçmek için birden fazla yöntem vardır. Elimizde iyi sagital görünümünde bir fırça aracı ile resim bulmak rağmen, diğer voksel seçim yöntemleri bir yatırım getirisi eksenel görünümünde eğri aracı veya resim çizim gibi kullanılabilir oluşturmak için. Tek bir kişi tüm hacim ölçüm hatalarını azaltmak amacıyla olabildiğince uyumlu analizleri gerçekleştirir eğer tercih edilir.

olmayanBu yöntem ve greft evrim gerçek zamanlı görselleştirme invaziv geleneksel tekniklere göre önemli avantajlar sunuyoruz. Ancak, bu teknik kalan greft canlılığı ve sağlığı tanımlamak için yeteneği sınırlıdır. Ayrıca, bu greft göreli revaskülarizasyon göstermek mümkün değil. Görünüm ve greft yoğunluğu değişiklikler yağ nekrozu, enfeksiyon, kist oluşumu, ya da sıvılaşma ima olsa, tek başına mikro-CT kesin sonuçlara varmak için zordur.

Biz bu teknik gelecek çalışmalar daha şişman greft sağkalım ve kaybına neden olan faktörleri anlamak için yapılabilir bunun üzerine bir vakıf olarak hizmet umuyoruz. Bu tema üzerine varyasyonlar hücreleri, büyüme faktörleri, sitokinler, genleri kök rolünü aydınlatmak olabilir, ve hücre yüzey belirteçleri yağ grefti hacmi nihai koruma oynamak. Hipotezleri test etmek için zıt bu gelişmiş araç ile, TRANSFO yağ transferi daha iyi anlaşılması için sabırsızlanıyoruzBir daha öngörülebilir birine yumuşak doku açıklarını tedavisi için bir kaprisli teknik rms.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Acknowledgments

Bu çalışma, ACS Franklin H. Martin Fakültesi Araştırma Bursu, Hagey tarafından desteklenen Meşe Vakfı, Pediatrik Rejeneratif Tıp Hagey Laboratuvarı ve MTLDCW Ulusal Sağlık, Hibeler NIHR21DE019274, NIHR01DE019434, NIHR01DE021683 Enstitüsü ve NIHU01HL099776 tarafından desteklenen Pediatrik Rejeneratif Tıp ve Stanford Üniversitesi Çocuk Sağlığı Araştırma Enstitüsü Fakültesi Akademik Ödülü için laboratuvar. Mikro-CT İn Vivo Görüntüleme Yenilik Stanford Merkezi'nde gerçekleştirildi.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
SAL lipoaspirate
Centrifuge Beckman Coulter, Inc., Pasadena, CA
50 ml conical tubes BD Biosciences, San Jose, CA
CD-1 nude mice (Crl:CD1-Foxn1nu) Charles River Laboratories, Inc., Wilmington, MA
Isoflurane Henry Schein, Dublin, OH
2.5% Betadine Purdue Pharma, L.P., Stamford, CT
70% Ethanol solution  Gold Shield, Hayward, CA
1cc luer-lock syringe BD Biosciences, San Jose, CA
14 gauge cannula Shippert Medical, Centennial, CO
Forceps Fine Science Tools, Heidelberg, Germany
Tenotomy scissors Fine Science Tools, Heidelberg, Germany
6-0 nylon suture Ethicon, Blue Ash, OH
Phosphate buffered saline Gibco, Carlsbad, CA
micro-CT scanner  Siemens Healthcare, Pleasanton, CA
Phantom  TriFoil Imaging, Northridge, CA
Imaging analysis software IRW, Siemens Healthcare, Pleasanton, CA
Scale  Mettler-Toledo International, Inc., Columbus, OH

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Gir, P., et al. Fat grafting: evidence-based review on autologous fat harvesting, processing, reinjection, and storage. Plast Reconstr Surg. 130, (1), 249-258 (2012).
  2. Kaufman, M. R., et al. Autologous fat transfer national consensus survey: trends in techniques for harvest, preparation, and application, and perception of short- and long-term results. Plast Reconstr Surg. 119, (1), 323-331 (2007).
  3. Smith, P., et al. Autologous human fat grafting: effect of harvesting and preparation techniques on adipocyte graft survival. Plast Reconstr Surg. 117, (6), 1836-1844 (2006).
  4. Eppley, B. L., Dadvand, B. Injectable soft-tissue fillers: clinical overview. Plast Reconstr Surg. 118, (4), 98e-106e (2006).
  5. Yarborough, J. M. The treatment of soft tissue defects with injectable collagen. Am J Med Sci. 290, (1), 28-31 (1985).
  6. Baumann, D. P., Butler, C. E. Soft tissue coverage in abdominal wall reconstruction. Surg Clin North Am. 93, (5), 1199-1209 (2013).
  7. Tukiainen, E. Chest wall reconstruction after oncological resections. Scand J Surg. 102, (1), 9-13 (2013).
  8. Zan, T., et al. Surgical treatment of facial soft-tissue deformities in postburn patients: a proposed classification based on a retrospective study. Plast Reconstr Surg. 132, (6), 1001e-1014e (2013).
  9. Bucky, L. P., Percec, I. The science of autologous fat grafting: views on current and future approaches to neoadipogenesis. Aesthet Surg J. 28, (3), 313-321 (2008).
  10. Lee, J. H., et al. The effect of pressure and shear on autologous fat grafting. Plast Reconstr Surg. 131, (5), 1125-1136 (2013).
  11. Kirkham, J. C., et al. The impact of liposuction cannula size on adipocyte viability. Ann Plast Surg. 69, (4), 479-481 (2012).
  12. Medina, M. A., et al. 3rd et al. Polymer therapy: a novel treatment to improve fat graft viability. Plast Reconstr Surg. 127, (6), 2270-2282 (2011).
  13. Horl, H. W., Feller, A. M., Biemer, E. Technique for liposuction fat reimplantation and long-term volume evaluation by magnetic resonance imaging. Ann Plast Surg. 26, (3), 248-258 (1991).
  14. Har-Shai, Y., Lindenbaum, E. S., Gamliel-Lazarovich, A., Beach, D., Hirshowitz, B. An integrated approach for increasing the survival of autologous fat grafts in the treatment of contour defects. Plast Reconstr Surg. 104, (4), 945-954 (1999).
  15. Fontdevila, J., et al. Assessing the long-term viability of facial fat grafts: an objective measure using computed tomography. Aesthet Surg J. 28, (4), 380-386 (2008).
  16. Meier, J. D., Glasgold, R. A., Glasgold, M. J. Autologous fat grafting: long-term evidence of its efficacy in midfacial rejuvenation. Arch Facial Plast Surg. 11, (1), 24-28 (2009).
  17. Coleman, S. R. Structural fat grafts: the ideal filler. Clin Plast Surg. 28, (1), 111-119 (2001).
  18. Coleman, S. R. Structural fat grafting: more than a permanent filler. Plast Reconstr Surg. 118, (3 Suppl), 108S-120S (2006).
  19. Pu, L. L., Coleman, S. R., Cui, X., Ferguson, R. E., Vasconez, H. C. Autologous fat grafts harvested and refined by the Coleman technique: a comparative study. Plast Reconstr Surg. 122, (3), 932-937 (2008).
  20. Matsumoto, D., et al. Cell-assisted lipotransfer: supportive use of human adipose-derived cells for soft tissue augmentation with lipoinjection. Tissue Eng. 12, (12), 3375-3382 (2006).
  21. Yoshimura, K., Suga, H., Eto, H. Adipose-derived stem/progenitor cells: roles in adipose tissue remodeling and potential use for soft tissue augmentation. Regen Med. 4, (2), 265-273 (2009).
  22. Zuk, P. A., et al. Multilineage cells from human adipose tissue: implications for cell-based therapies. Tissue Eng. 7, (2), 211-228 (2001).
  23. Habte, F., et al. Impact of a multiple mice holder on quantitation of high-throughput MicroPET imaging with and without Ct attenuation correction. Mol Imaging Biol. 15, (5), 569-575 (2013).
  24. Chung, M. T., et al. Micro-computed tomography evaluation of human fat grafts in nude mice. Tissue Eng Part C Methods. 19, (3), 227-232 (2013).
  25. Thanik, V. D., et al. A murine model for studying diffusely injected human fat. Plast Reconstr Surg. 124, (1), 74-81 (2009).

Comments

0 Comments


    Post a Question / Comment / Request

    You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

    Usage Statistics