Author Produced

Optimering av manschettteknik för Murine Heart Transplantation

* These authors contributed equally
JoVE Journal
Immunology and Infection

Your institution must subscribe to JoVE's Immunology and Infection section to access this content.

Fill out the form below to receive a free trial or learn more about access:

 

Summary

Vi introducerar en inre rör strategi för manschetten teknik för mus massundersökning heterotopic hjärta transplantation för att hjälpa evert fartyget över manschetten. Vi fann att samarbetet mellan två erfarna kirurger avsevärt förkortar operationstiden.

Cite this Article

Copy Citation | Download Citations | Reprints and Permissions

Ma, Y., Xie, B., Dai, H., Wang, C., Liu, S., Lan, T., Xu, S., Yan, G., Qi, Z. Optimization of the Cuff Technique for Murine Heart Transplantation. J. Vis. Exp. (160), e61103, doi:10.3791/61103 (2020).

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

Murine hjärttransplantation har utförts i mer än 40 år. Med framsteg inom mikrokirurgi, vissa nya tekniker har använts för att förbättra kirurgisk effektivitet. I vårt labb har vi optimerat manschetttekniken med två stora steg. Först använde vi den inre rörtekniken för att sätta in ett tillfälligt inre rör i den yttre halsvenen och halspulsåderns blodkärl för att underlätta eversion av kärlet över manschetten. För det andra utförde vi komplett heterotopic hjärt transplantation genom samarbete med två erfarna kirurger. Dessa ändringar minskade effektivt drifttiden till 25 minuter, med en framgång på 95%. I den här rapporten beskriver vi dessa procedurer i detalj och tillhandahåller en extra video. Vi tror att detta betänkande om den förbättrade manschetttekniken kommer att erbjuda praktisk vägledning för murine heterotopic hjärttransplantation och kommer att förbättra nyttan av denna mus modell för grundforskning.

Introduction

Inrättandet av mus heterotopic hjärta transplantation genom end-to-end annastomosis i buken 1973 var en viktig milstolpe i grundläggande transplantation immunologi forskning1. Denna modell som ett viktigt och giltigt verktyg för att analysera mekanismerna för ischemi reperfusion skada2, immunologiska avstötning, och tolerans3,4. Emellertid, den komplexa och tidskrävande karaktär av kirurgi samt risken för infektioner kan resultera i allvarliga perioperative buken sammanväxningar och inflammatoriska reaktioner, vilket resulterar i en låg effektivitet för heterotopic hjärtat transplantation modell.

Den cervikala heterotopic hjärtat transplantation teknik beskrevs först av Chen i 19915. I denna modell är mottagarens yttre halsvenen anastomosed till pulmonell gatan i transplantatet och halspulsådern anastomosed till stigande stora kroppspulsådern. De främsta fördelarna med denna metod är bekvämligheten med övervakning och minskning av trauma till mottagaren. Samma år beskrev Matsuura en förbättrad teknik, där slutet av den yttre halsvenen och halspulsådern var everted över en Teflon manschett och fast med en omkrets silke ligatur6. Vissa forskare fixade också manschetten till rätt lungartär i donatorhjärtat innan manschetten sätts in i manschetten i mottagarens yttre halsven7. Hittills har manschetten tekniken använts i stor utsträckning i olika vaskulär pedicle transplantation modeller, inklusive de för lunga8,lever9, och njurmedicinska10 transplantation.

Hittills finns det flera svårigheter i samband med manschetttekniken. Till exempel är halspulsådern svår att evert över manschetten på grund av den extra elasticiteten, vilket resulterar i vävnaden vända bakåt. Därför kan ytterligare praxis och en mikrokirurgisk dilator krävas för att slutföra detta steg. Dessutom kan livmoderhalsens kärlberedning ta upp till 25 minuter.

För att lösa dessa problem introducerar vi den inre rörtekniken, som är baserad på manschetttekniken och inkluderar fastställande av manschetten på den yttre halsvenen och halspulsådern med hjälp av ett inre rör för att hjälpa till med eversion av kärlväggen. Dessutom, med enkel utbildning, minskar mottagarens förberedelse till 15,5 minuter. Denna teknik minskar komplexiteten i operationen och kräver inte ytterligare praxis eller användning av en vaskulär dilator. Det kan tillämpas i alla transplantation immun forskning, särskilt för att kontrollera tredje part immuntolerans under vilken mottagaren får två hjärt allografts, en i buken och den andra i nacken11. Vi rekommenderar också samarbete mellan två skickliga kirurger för att fastställa denna modell, med en kirurg förbereder mottagaren djuret och den andra skörd och implantera givaren hjärtat. Ett sådant samarbete kan förkorta drifttiden till 25 minuter. Med hjälp av denna optimerade förfarande har vi etablerat syngeneic, allogena12,13,,14,15,16,17,18,19, och xenogena mus hjärta transplantation modeller20.

Grunden för utvecklingen av den inre rörtekniken var att minska drifttiden för inrättandet av en mus hjärttransplantation modell med en hög framgång. Optimering av livmoderhalscancer hjärttransplantation modell underlättar förvärv av hög framgång på kort tid av kirurgi tid jämfört med den traditionella sutur och manschett teknik21. Vidare kan samarbetsmodellen ytterligare minska givarhjärtats varma ischemiska tid jämfört med operationer som utförs med en enda operatör.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Djur (BALB/c, C57BL/6, hane, 8-12 veckor) är inhysda i en specifik patogenfri anläggning vid Xiamen University Laboratory Animal Center. C57BL/6 används som mottagare och BALB/c används som donator. Alla förfaranden utförs enligt IACUC:s riktlinjer (Institutional Animal Care and Use Committee).

OBS: En uppsättning mikrokirurgiska instrument, inklusive en mikrosax, mikrorakta pincett, mikroböjda pincett och mikronålshållare, är nödvändiga för operationen (Tabell och Material, Figur 1B, C, D, E). Ett par engångsklämmor för bulldog(figur 1F)behövs. Två manschetter för den yttre halsvenen och halspulsådern framställs genom att skära de anpassade polyamidrören med en nr 10 skalpell under ett mikroskop. Diametern på venen och artärmanschetten är 0,9 mm respektive 0,55 mm. Dessutom är diametern på innerröret för motsvarande venmanschett 0,6 mm, och dessa av innerröret för motsvarande artärmanschett är 0,28 mm (figur 1G).

1. Beredning av mottagare

  1. Söva mottagarmusen med pentobarbital (60 mg/kg, i.p). Använd atraumatiska mekaniska klippare för att ta bort håret vid rätt lateral cervikal region.
  2. Använd en steril bomullsspetsapplikator för att torka av det kirurgiska området med jod antiseptisk följt av 70% etanol.
  3. Placera musen i ryggläge på driftplattformen. Täck musen med steril gasväv.
  4. Använd en oftalmisk sax för att göra ett tvärgående snitt från den nedre en tredjedel hals mittlinjen till höger axel-nyckelbenet gemensamma.
  5. Isolera den högra yttre halsvenen med mikroböjda pincett för att exponera tillräckligt långa, skär av grenarna via elektrokoagulation och ligate kärlet i den distala änden med hjälp av en 6-0 silkes sutur.
  6. Kläm fast den yttre halsvenen proximally med hjälp av en bulldog klämma och sedan transect venen proximally till ligaturen med hjälp av en mikro sax.
  7. Tvätta kärllumen med 100 U/mL 0-4 °C hepariniserad koksaltlösning för att avlägsna eventuellt restblod.
  8. Dra den yttre halsvenen genom venmanschetten med hjälp av mikro raka pincett; sätt in venens inre rör i lumen som en stent och förånga kärlväggen över manschetten med mikrorakta pincett (figur 2A).
  9. Fixera den everted kärlet endotel vid den proximala änden av manschetten med en omkrets 8-0 siden sutur (figur 2B).
  10. Använd mikrorakta pincett för att dra ut venens inre rör från venkärlet.
  11. Utför trubbig dissekering med mikroböjda pincett för att isolera rätt halspulsådern intill den inre kanten av sternocleidomastoid.
  12. Clamp rätt halspulsådern proximally med hjälp av en bulldog klämma, ligate halspulsådern distally med hjälp av en 6-0 silke sutur, och använda en mikro sax för att transect halspulsådern proximally till ligaturen.
  13. Tvätta halspulsådern med 100 U/mL 0-4 °C hepariniserad koksaltlösning för att avlägsna eventuellt restblod.
  14. För halspulsådern genom artärmanschetten och sätt in artärens inre rör i artärkärlet med hjälp av mikrorakta pincett (figur 2C).
  15. Evert kärlet över manschetten med hjälp av mikro raka pincett; fastställa den everted fartyget endotel med hjälp av en omkrets 8-0 siden sutur (figur 2D).
  16. Dra tillbaka artärens inre rör från artärkärlet med mikrorakta pincett.
    Obs: Bevara mottagarens underkäbbens körtel.

2. Förberedelse av givare

  1. Söva givarmusen med pentobarbital (60 mg/kg, i.p). Använd atraumatiska mekaniska klippare för att ta bort håret i bukregionen.
  2. Placera musen i ryggläge på driftplattformen. Täck musen med steril gasväv.
  3. Använd en steril bomullsspetsapplikator för att torka av det kirurgiska området med jod antiseptisk följt av 70% etanol.
  4. Gör ett bukmittens snitt med en oftalmisk sax och exponera bukhålan.
  5. Använd mikroböjda pincett för att exponera den sämre vena cava, och injicera sedan intravenöst 200 μL av 100 U/mL 0-4 °C hepariniserad koksaltlösning per 20 g kroppsvikt genom den sämre vena cava.
  6. Utför thoracotomy med oftalmisk sax, skär av revbenen genom de bilaterala midaxillary linje snitt, vänd den främre bröstväggen utåt för att exponera brösthålan.
  7. Punktskatt bräss med mikroböjda pincett.
  8. Exponera aorta, och sedan granska 200 μL av 100 U/mL 0-4 °C hepariniserade saltlösning till kranskärlen genom aortabågen.
    OBS: Undvik att perfusera gasbubblor i donatorhjärtat.
  9. Använd en mikro sax för att transect den stigande stora kroppspulsåder i början av aortabågen.
  10. Transect lungartären i början av de två huvudgrenarna med en mikrosax.
  11. Ligate den överlägsna vena cava och sämre vena cava proximally med en 6-0 siden sutur och använda en mikro sax för att transect anda distally till ligaturen.
  12. Ligate pulmonell vener tillsammans, omkretsande, med en enda 6-0 siden sutur, och skär av vengrenarna distally till ligaturen med hjälp av en mikro sax.
  13. Ta bort hjärttransplantatet från de omgivande mjuka vävnaderna; bevara den i 0-4 °C hepariniserad saltlösning.

3. Hjärta implantation

  1. Placera donatorhjärtat upp och ner i mottagarens högra halsregion.
  2. Mata in lungartären i givarhjärtat till en 6-0 silkesslinga med mikrorakta pincett.
  3. Linda kärllumen runt venmanschetten och dra sedan åt 6-0 silkessugsöglorna runt manschetten för att band kärlleden.
  4. Utför ansomos av aorta av transplantatet och artär manschetten genom att följa de steg som beskrivs i steg 3.2.
  5. Släpp den klämda halsvenen följt av den klämda halspulsådern. Håll kärlfogen obukten och se till att blodflödet är fritt.
    OBS: Sinusrytmen som återgår till mer än 200 gånger inom 1 min anses vara normal.
  6. Fukta donatorhjärtat med hjälp av varm (37 °C) saltlösning och kontrollera om transplantatet blöder. Ställ in det pulserande hjärttransplantatet i det subkutana utrymmet och sutur sedan snittet.

4. Postoperativ vård och graft bedömning

  1. Registrera tiden till normal sinus rytm och bevarandet av normala sinus rytm i minst 5 minuter efter klämma release för att övervaka den postoperativa moderplantor funktion.
  2. Placera mottagaren ensam på en varm filt tills mottagaren vaknar upp från anestesi. Administrera buprenorfin analgesi, 0,05 mg/kg, s.c, i slutet av operationen och var 12 timmar i 72 timmar efter operationen.
  3. Registrera mottagarens vikt- och postoperativa återställningsstatus dagligen. Vid >15% viktminskning i förhållande till den på operationsdagen, hemiplegisk förlamning, eller infektion, avliva mottagaren via terminal isofluran inandning21.
  4. Övervaka transplantat överlevnad genom palpation dagligen. Operationen anses vara framgångsrik om murine allograft överlever i >72 timmar. Betyg graft funktion, som tidigare rapporterats22: Skala 3 - kraftigt pulserande och frekvens; Skala 2 - mindre pulserande; Skala 1- förmaksflimmer och överhängande avslag; eller Skala - 0, förlust av hjärtslag och fullständigt avslag.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Kirurgisk operation Tid

Efter träningen kan en skicklig kirurg framgångsrikt utföra operationen inom 35 minuter med hjälp av den inre rörtekniken, där cirka 15,5 minuter krävs för mottagarberedning, krävs 10,9 minuter för givarberedning, och 4,4 minuter krävs för donatorhjärtasyser. Den kalla och varma ischemitiden (från givarpreparat till hjärtimplantation) reduceras till 15,3 minuter jämfört med användningen med manschetttekniken utan innerrörsteknik och suturteknik (tabell 1)21.

Vi har utformat en samarbetsmodell för att ytterligare förbättra verksamhetens effektivitet. Som visas i schemat (Figur 3), en kirurg börjar utföra mottagaren förberedelse först, följt av inledandet av givaren beredning av en andra kirurg efter 4-5 minuter. Efter 15-16 minuter, den första kirurgen bör ha avslutat mottagaren beredning, då den andra kirurgen har avslutat skörd givaren hjärtat, bör börja anastomosing givaren hjärtat inom mottagaren. Denna samarbetsmodell kräver att varje kirurg endast utbildas i en enda del av manschetttekniken och ytterligare förkortar den totala drifttiden till cirka 25 minuter. En analys av >600 heterotopic murine transplantationer utförs via samarbete mellan två kirurger under de senaste två åren vid Organ Transplantation Institute of Xiamen University visar en framgång för hjärttransplantation med denna teknik på upp till 95%.

Överlevnad av major Histocompatibility Complex Cardiac Mismatched och matchade hjärttransplantat

Major Histocompatibility Complex (MHC), betecknas "H-2", har använts för att bestämma genetiska skillnader och likheter. Donator-missmatchade MHC antigener kan utlösa ympkvistar avstötning genom att interagera direkt med mottagaren T-celler eller indirekt som givareN MHC-härledda peptider uttryckt på mottagaren MHC molekyler23. Ett helt MHC-felmatchat BALB/c (H-2d)allograft hjärta kan avvisas, med en medianöverlevnadstid på 7,5 dagar efter transplantation till C57BL/6 (H-2b)mottagarmöss (figur 4A). I våra studier överlevde syngeneic hjärta transplantationer mer än 100 dagar, utom i ett sällsynt fall på grund av en 15% viktminskning jämfört med normal vikt före operationen.

Hjärta allografts kan skördas för histopatologiska undersökning vid tidpunkten för avstötning. Figur 4B visar utseendet på markerade cellmedierade avstötningsegenskaper, såsom inflammatorisk cellinfiltration, vävnadödem och mikrovaskulär ocklusion. Syngeneic ympkvistar är nära normala med några tecken på myocyte nekros eller inflammatorisk cell infiltration.

Effekten av innerröret på vaskulär endotel

För att utvärdera skadan på vaskulära endotel efter att ha satt in det inre röret i lumen, 100 dagar efter syngeneic hjärttransplantation, kan vaskulära endotel av anestomos webbplats samlas in och färgas av immunofluorescent. I denna analys observerades ingen uppenbar förträngning av kärlvägg, trombos eller förtjockning av intimiteten (figur 4C). Elektron mikroskopisk avbildning visade att en slät endotel och en regelbunden längsgående krön bildning, med endotelceller ordnade prydligt och nära, utan uppenbara sediment på ytan (Figur 4D).

Figure 1
Figur 1: En uppsättning sterila kirurgiska instrument:
(A)Fina pincett och oftalmisk sax. B)Mikroböjta pincett. C)Mikroräta pincett; (D) Micro nålhållare; E)Mikrosax; F)Klämmor för bulldog. (G) En artär inre rör (röd prickade pil) och manschetten (röd fast pil), tillsammans med en ven inre rör (svart prickade pil) och manschetten (svart fast pil). Klicka här för att se en större version av denna siffra.

Figure 2
Figur 2: Förberedelse av mottagaren.
(A)För in venens inre rör i det yttre halsvenskärlet. (B)Evert ven kärlet över manschetten och fixa den med en omkrets 8-0 siden sutur; C)För in artärens inre rör i artärkärlets lumen. (D)Evert ven kärlet över manschetten och fixa den med en omkrets 8-0 siden sutur. Klicka här för att se en större version av denna siffra.

Figure 3
Figur 3: Drifttid för varje steg i heterotopic Murine Transplantation. Klicka här för att se en större version av denna siffra.

Figure 4
Figur 4: (A) Hjärttransplantat ÖverlevnadStid. Kaplan-Meier-tomt som visar överlevnaden av hjärtaleverings (BALB/c) och syngeneic grafts (C57BL/6) från donatormöss som transplanterats till C57BL/6 mottagarmöss (n=12 möss/grupp); (B)Mikroskopisk undersökning av C57BL/6 (vänster) Isograft och Wild Type BALB/c Allograft (höger) dag 7 efter transplantation (Skalbarer, 50 um; förstoring ×400); (C)Immunofluorescens (Skala barer, 50 μm; förstoring × 400) (D) Elektronmikroskopi Scanning av Vaskulär endothelium i transplantation (vänster) och naiv (höger) Mottagare. Klicka här för att se en större version av denna siffra.

Annastomos teknik Förberedelsetid för mottagare Förberedelsetid för givare Hjärtimplantationstid Kall och varm ischemitid Total operationstid
5 5 Cervikal heterotopic Sutur N N N < 45 min N
6. Cervikal heterotopic Manschetten 45 min 15 min 10 min N N
24 år Cervikal heterotopic Manschetten 15 min 20 min 15 min 25-40 min < 60 min
25 år Buk heterotopic Sutur N N N N 35 min
7. Cervikal heterotopic Manschetten N 20 min N 30 min 35 min
26 år Cervikal heterotopic Manschetten N 20 min 20 min < 35 min N
4. Buk heterotopic Sutur 60–70 min 6–7 min N N 75 min
21. Cervikal heterotopic Manschetten N N 7 min 20 min 45 min
27 år Buk heterotopic Sutur N 10-15 min N N 45-60 min
28 år Cervikal heterotopic Manschetten 25 min 20 min 15 min 20 min 60 ± 8 min
29 år (a på 29 procent Cervikal heterotopic Manschetten 31,9 min 21,1 min 5,1 min 28,5 min 57,8±3,9 min
29 år (a på 29 procent Cervikal heterotopic Sutur 25,2 min 20,5 min 30,8 min 51,3 min 83,9±2,9 min
Cervikal heterotopic i vårt protokoll Manschetten 15,5 min 10.9 min 4,4 min 15.3 min 35 min
(Enkel operation)
23 min
(Samarbete)

Tabell 1: Jämförelse av tid för olika faser i olika mus hjärttransplantation tekniker.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Modeller för mushjärtadtransplantationer är viktiga verktyg för transplantationsimmunologiforskning, eftersom verktyg och material för att utvärdera immunmekanismerna för denna modell och ett stort antal genmodifierade möss finns tillgängliga. Mikrokirurgiska tekniska utmaningar, såsom fartyg sutur och eversion, har dock begränsat dess utbredda användning. I den aktuella studien har vi undersökt vissa centrala tekniska utmaningar av murine hjärttransplantation och har fått goda resultat. Ett kritiskt steg i protokollet införandet av ett inre rör i lumen som en stent för att evert kärlväggen över manschetten. Detta optimeringssteg löser den tekniska utmaningen att everting artärkärlet på grund av behovet av en omfattande sträcka. Individer utan mikrokirurgisk skicklighet kan börja utföra tekniken efter två månaders utbildning, vilket också kommer att bidra till den breda tillämpningen av denna modell.

Enligt vår erfarenhet kommer ett lämpligt inre rör att förbättra transplantationsresultaten. Innerrörets ytterdiameter bör vara något mindre än det mottagande blodkärlets innerdiameter. Dessutom bör trubbiga polypropylenrör eller cylindrar med hal yta användas som tillfälliga inre kärnor för att undvika att skada vaskulära endotel. I våra händer inträffade ingen trombos i 5% av modeller som misslyckades, även om blodpropp är en viktig faktor för misslyckande efter annastomos med hjälp av sutur teknik. Med hjälp av dessa mogna modeller, våra laboratorier har publicerat flera grundläggande forskningsartiklar som har erkänts av peer reviewers14,15,16,17,18,19.

Operationer som utfördes inom 35 minuter var inte signifikant annorlunda jämfört med den traditionella manschetttekniken, men den kalla och varma ischemitiden var betydligt lägre än andra tekniker (tabell 1). Genom att använda samarbetsmodellen minskar den genomsnittliga drifttiden ytterligare till 23-25 minuter, vilket återspeglas i anestesitiden för mottagarmusen och i givarens hjärtimplantationstid. En annan fördel med manschetttekniken att den begränsar den varma ischemiska tiden (tabell 1). Eftersom ingen ispåse används för att skydda hjärttransplantatet från musmottagarens varma kroppstemperatur, motsvarar den varma ischemiska tiden anastomostiden. Den optimerade manschetttekniken innebär att båda manschetterna förbereds på mottagaren för att förenkla annakosproceduren och förkortar därmed annakostiden. Därför begränsar manschetttekniken den varma ischemiska tiden till endast 4,4 minuter i genomsnitt.

Det finns dock vissa viktiga steg att notera med den nya tekniken diskuteras. Var noga med att bevara submandibular körtel av mottagaren musen i livmoderhalscancer heterotopic hjärttransplantation30, som submandibular körtel kan användas för att fixa hjärttransplantat och undvika vridning av kärlen. Undvik att skada vagusnerven när du isolerar den yttre halsvenen och halspulsådern, eftersom skada kan leda till halshemiplegi hos mottagaren. Trycket från bulldog klämmor bör hållas vid 20-25 gram för att undvika klämskador eller fartyg läckage. Tvätta kärlens lumen och manschetterna med 0-4 °C hepariniserad saltlösning för att avlägsna eventuellt restblod och gasbubblor. Detta förhindrar emboli i ympkvistar efter reperfusion. Använd en 1 ml-spruta för att parfymera givaren med 0-4 °C hepariniserad koksaltlösning och öka hastigheten till 50 μl per sekund för att bibehålla ett lämpligt tryck. Under annastomos, inte band den omkrets 8-0 suturer (används för att fixa den everted vaskulära endotel till manschetterna) i lumen av transplantat artärerna.

Även om det finns begränsningar i samarbetsmodellen, som inkluderar behovet av mikrokirurgiska tekniker, tillgången på två samtidiga mikroskop och dubbelt så många skickliga kirurger, har det ändå visat sig vara ett framgångsrikt förhållningssätt till att utföra vaskulariserad organtransplantation. Dess bredare tillämpning kan ytterligare bidra till att utveckla nya immunsuppressiva protokoll och studera mekanismerna för akut och kronisk avstötning i transplantationsområdet.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Författarna har inget att avslöja.

Acknowledgments

Detta arbete stöddes av Fujian Provincial Health Education Joint Research Project (WKJ2016-2-20), National Natural Science Foundation of China (81771271 och 81800664), Kinas nationella nyckel-FoU-program (2018YFA0108304) och utbildnings- och forskningsprojektet för unga och medelålders lärare i Fujian-provinsen (JAT170714), Naturvetenskapliga stiftelsen i Hunan-provinsen i Kina (2019JJ50842) och Huxiang Young Talents of Hunan-provinsen (2019RS2013).

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Artery cuff Self-made Polyamide tube. diameter: 0.55 mm,length: 1.0 mm
Artery inner tube Self-made Polyamide tube. Diameter: 0.28mm
Micro curved forceps Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Surgical Instruments Factory WA3050 1/8 arc, 0.3-mm tip without a hook
Micro needle holders Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Surgical Instruments Factory WA2050 0.2-mm tip
Micro scissors Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Surgical Instruments Factory WA1050 Straight, blade length: 10 mm
Micro straight forceps Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Surgical Instruments Factory WA3060 0.15-mm tip without a hook
Scanlan Vascu-Statt Bulldog Clamps Scanlan International Inc 1001-531 Clamping pressure 20–25 grams
Vein cuff Self-made Polyamide tube. diameter: 0.9 mm,length: 1.2 mm
Vein inner tube Self-made Polyamide tube. Diameter: 0.6 mm

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Corry, R. J., Winn, H. J., Russell, P. S. Heart transplantation in congenic strains of mice. Transplantation Proceedings. 5 (1), 733-735 (1973).
  2. Que, W. et al. Prolonged cold ischemia time in mouse heart transplantation using supercooling preservation. Transplantation. (2019).
  3. Wang, C. Y. et al. Suppression of murine cardiac allograft arteriopathy by long-term blockade of CD40-CD154 interactions. Circulation. 105 (13), 1609-1614 (2002).
  4. Hasegawa, T., Visovatti, S. H., Hyman, M. C., Hayasaki, T., Pinsky, D. J. Heterotopic vascularized murine cardiac transplantation to study graft arteriopathy. Nature Protocols. 2 (3), 471-480 (2007).
  5. Chen, Z. H. A technique of cervical heterotopic heart transplantation in mice. Transplantation. 52 (6), 1099-1101 (1991).
  6. Matsuura, A., Abe, T., Yasuura, K. Simplified mouse cervical heart transplantation using a cuff technique. Transplantation. 51 (4), 896-898 (1991).
  7. Wang, Q., Liu, Y., Li, X. K. Simplified technique for heterotopic vascularized cervical heart transplantation in mice. Microsurgery. 25 (1), 76-79 (2005).
  8. Li, W. et al. Surgical technique for lung retransplantation in the mouse. Journal of Thoracic Disease. 5 (3), 321-325 (2013).
  9. Kamada, N., Calne, R. Y. A surgical experience with five hundred thirty liver transplants in the rat. Surgery. 93 (1 Pt 1), 64-69 (1983).
  10. Chen, H., Zhang, Y., Zheng, D., Praseedom, R. K., Dong, J. Orthotopic kidney transplantation in mice: technique using cuff for renal vein anastomosis. PLoS One. 8 (10), e77278 (2013).
  11. Miller, M. L. et al. Spontaneous restoration of transplantation tolerance after acute rejection. Nature Communications. 6, 7566 (2015).
  12. Lin, Y. et al. Overexpression of Jagged-1 combined with blockade of CD40 pathway prolongs allograft survival. Immunology and Cell Biology. 93 (2), 213-217 (2015).
  13. Xie, B. et al. Combined costimulation blockade inhibits accelerated rejection mediated by alloantigen-primed memory T cells in mice. Immunological Investigations. 38 (7), 639-651 (2009).
  14. Shao, W. et al. Combination of monoclonal antibodies with DST inhibits accelerated rejection mediated by memory T cells to induce long-lived heart allograft acceptance in mice. Immunology Letters. 138 (2), 122-128 (2011).
  15. Dai, H. et al. Blockade of CD27/CD70 pathway to reduce the generation of memory T cells and markedly prolong the survival of heart allografts in presensitized mice. Transplant Immunology. 24 (4), 195-202 (2011).
  16. Yan, G. et al. Inhibition of accelerated rejection mediated by alloreactive CD4(+) memory T cells and prolonged allograft survival by arsenic trioxide. Immunological Investigations. 42 (5), 438-454 (2013).
  17. Yan, G. et al. Inhibiting accelerated rejection mediated by alloreactive CD4(+) memory T cells and prolonging allograft survival by 1alpha,25-dihydroxyvitamin D(3) in nude mice. Immunology Letters. 149 (1-2), 54-61 (2013).
  18. Lin, Y. et al. Arsenic trioxide is a novel agent for combination therapy to prolong heart allograft survival in allo-primed T cells transferred mice. Transplant Immunology. 25 (4), 194-201 (2011).
  19. Shao, W. et al. CD44/CD70 blockade and anti-CD154/LFA-1 treatment synergistically suppress accelerated rejection and prolong cardiac allograft survival in mice. Scandinavian Journal of Immunology. 74 (5), 430-437 (2011).
  20. Li, Y. et al. A highly reproducible cervical cuff technique for rat-to-mouse heterotopic heart xenotransplantation. Xenotransplantation. (2017).
  21. Oberhuber, R. et al. Murine cervical heart transplantation model using a modified cuff technique. Journal of Visualized Experiments. (92), e50753 (2014).
  22. Blanchard, J. M., Pollak, R. Techniques for perfusion and storage of heterotopic heart transplants in mice. Microsurgery. 6 (3), 169-174 (1985).
  23. Felix, N. J. et al. H2-DMalpha(-/-) mice show the importance of major histocompatibility complex-bound peptide in cardiac allograft rejection. Journal of Experimental Medicine. 192 (1), 31-40 (2000).
  24. Tomita, Y. et al. Improved technique of heterotopic cervical heart transplantation in mice. Transplantation. 64 (11), 1598-1601 (1997).
  25. Niimi, M. The technique for heterotopic cardiac transplantation in mice: experience of 3000 operations by one surgeon. Journal of Heart and Lung Transplantation. 20 (10), 1123-1128 (2001).
  26. Wang, K., Zhang, N., Li, H. Improved technique of mouse heterotopic heart graft retransplantation. Microsurgery. 26 (3), 200-202 (2006).
  27. Plenter, R. J., Grazia, T. J. Murine heterotopic heart transplant technique. Journal of Visualized Experiments. (89) (2014).
  28. Ratschiller, T. et al. Heterotopic Cervical Heart Transplantation in Mice. Journal of Visualized Experiments. (102), e52907 (2015).
  29. Zhou, Y., Gu, X., Xiang, J., Qian, S., Chen, Z. A comparative study on suture versus cuff anastomosis in mouse cervical cardiac transplant. Experimental and Clinical Transplantation. 8 (3), 245-249 (2010).
  30. Fukunaga, N., Bissoondath, V., Rao, V. Submandibular Gland-preserving Technique for Heterotopic Cervical Heart Transplantation in Mice. Transplantation. 102 (11), e464-e465 (2018).

Comments

0 Comments


    Post a Question / Comment / Request

    You must be signed in to post a comment. Please sign in or create an account.

    Usage Statistics